3種苯并咪唑類藥物對大熊貓西氏貝蛔蟲的驅蟲效果初步觀察

李才武，李果，王一，胡正泉，成彥曦，王群，何鳴，周宇，曾文，周繼秋，瞿祖鳳，張志忠，4*，楊光友，謝約

(1. 中國大熊貓保護研究中心，四川都江堰611830； 2. 大熊貓國家公園珍稀動物保護生物學國家林業和草原局重點實驗室，四川都江堰611830； 3. 沈陽森林動物園管理有限公司，沈陽110000；4. 國家林業和草原局野生動植物保護司，北京100714； 5. 四川農業大學，成都611130)

大熊貓Ailuropodamelanoleuca是中國特有珍稀瀕危動物，是全球最具觀賞價值和科學研究價值的動物之一。盡管中國大熊貓遷地保護已取得了可喜成績，圈養種群數量持續增加，但疾病依然嚴重威脅其種群安全(鐘志軍等，2014)。在各類疾病中，寄生蟲病占有極其重要的位置(張華等，2010)。西氏貝蛔蟲Baylisascarisschroederi是圈養大熊貓體內寄生蟲病中感染率最高的(賴從龍等，1993；Wangetal.，2018)，野生個體感染率幾乎達100%(葉志勇，1989；馮文和，張安居，1991；Pengetal.，2017)。蛔蟲通過掠奪宿主的營養以及大量蟲體寄生引起胃腸道阻塞并可進入膽管、肝管及胰管等對宿主產生機械性損害。蛔蟲病對大熊貓健康影響嚴重，嚴重感染時可致死(楊光友，1998；李德生等，2014)。據統計，由蛔蟲病引起的大熊貓直接、間接死亡率高達66.67%(張華等，2010)。在圈養大熊貓蛔蟲的防治中，伊維菌素和雙羥萘酸噻嘧啶等是常用的驅蟲藥物(李德生等，2015)。西氏貝蛔蟲產卵量大，蟲卵在外環境中的生存能力強，大熊貓在圈養環境下重復感染率很高。雖然獸醫使用常用藥物每月驅蟲，但大熊貓仍呈現蛔蟲反復感染的現象，驅蟲藥物有待進一步優化篩選。同時，長期使用某種藥物導致蟲體耐藥性增加，因此，對一些驅蟲藥的驅蟲效果進行評價并篩選出高效的藥物及有效劑量對預防和治療圈養大熊貓蛔蟲病具有重要意義。阿苯達唑和甲苯咪唑被廣泛應用在人身上，安全性較高。目前在大熊貓感染蛔蟲的臨床治療中，也選用阿苯達唑、芬苯達唑和甲苯咪唑3種藥物，但是缺乏對這3種藥物驅蟲效果的有效評估。因此，本試驗選用這3種苯并咪唑類藥物對圈養大熊貓進行驅蟲，并對驅蟲效果進行統計分析，以期為圈養大熊貓西氏貝蛔蟲病的防控提供新的策略。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗動物為中國大熊貓保護研究中心臥龍神樹坪基地的圈養大熊貓。試驗藥物包括阿苯達唑(片劑，批號：17020410，中美天津史克制藥有限公司)、芬苯達唑(膏劑，批號：16280356，Merck Animal Health)、甲苯咪唑(片劑，批號：160328505，西安楊森制藥有限公司)。主要試劑有飽和硫酸鎂溶液(440 g無水硫酸鎂溶解于1 000 mL水)。主要儀器有光學顯微鏡(日本奧林巴斯)和離心機(Werk Nruniversal)等。

1.2 試驗方法

阿苯達唑按10 mg·kg-1體質量，芬苯達唑按5 mg·kg-1、10 mg·kg-1體質量，甲苯咪唑按10 mg·kg-1體質量每天口服1次，連續服用 2 d。分別在驅蟲前3 d和驅蟲后的第10天、第20天用一次性自封袋收集大熊貓排出的新鮮糞便約200 g，逐一登記編號后帶回實驗室，4 ℃保存待檢。采用飽和硫酸鎂離心漂浮法檢查蟲卵。投藥后觀察供試大熊貓的采食、排糞、精神狀態及活動情況等。在投藥前后觀察供試動物糞樣中的排蟲情況，并進行記錄與統計。根據投藥后大熊貓的排蟲情況及蟲卵轉陰率判定驅蟲效果。蟲卵轉陰率(%)=(驅蟲前蟲卵陽性糞樣數-驅蟲后蟲卵陽性糞樣數)/驅蟲前蟲卵陽性糞樣數×100%。

2 結果

2.1 阿苯達唑片劑組

口服阿苯達唑后，13只供試大熊貓的采食、排糞、精神狀態及活動情況等未見異常。

5只投藥前糞檢蛔蟲卵為陽性的大熊貓(冰華、發發、思嘉、蘇星、禧禧)在投藥后排出大量蛔蟲(最高達89條)，投藥后第10天、第20天糞檢蛔蟲卵為陰性，蟲卵轉陰率為100%。其余8只大熊貓在投藥前糞便中自然排出蛔蟲幼蟲(香琳、紫煙)或糞檢蛔蟲卵為陰性者(傲傲、華虎、蒲蒲、森森、希望、香琳、鑫鑫、紫煙)在投藥后均排出了數量不等(1～50條)的蛔蟲幼蟲，投藥后第10天、第20天糞檢蛔蟲卵均為陰性(表1)。

2.2 芬苯達唑膏劑組

口服芬苯達唑后，10只供試大熊貓的采食、排糞、精神狀態及活動情況等未見異常。

1只投藥前糞檢蛔蟲卵為陽性的大熊貓(正正)，按5 mg·kg-1體質量口服，投藥后第10天、第20天糞檢蛔蟲卵仍為陽性；而2只投藥前糞檢蛔蟲卵為陽性的大熊貓(華美、森森)按10 mg·kg-1體質量口服，投藥后第10天、第20天糞檢蛔蟲卵為陰性，蟲卵轉陰率為100%。其余7只大熊貓在投藥前糞便中自然排出蛔蟲幼蟲(森森、珍珍)或糞檢蛔蟲卵為陰性者(冰華、回回、彤彤、優優)在投藥后均排出了數量不等(1～13條)的幼蟲，投藥后第10天、第20天糞檢蛔蟲卵均為陰性(表2)。

表1 阿苯達唑片劑對大熊貓蛔蟲的驅蟲效果Table 1 The deworming effect of albendazole tablets on Ailuropoda melanoleuca

表2 芬苯達唑膏劑對大熊貓蛔蟲的驅蟲效果Table 2 The deworming effect of fenbendazole ointments on Ailuropoda melanoleuca

2.3 甲苯咪唑片劑組

口服甲苯咪唑后，16只供試大熊貓的采食、排糞、精神狀態及活動情況等未見異常。

這16只大熊貓在投藥前糞檢蛔蟲卵為陰性者，在投藥后均排出了數量不等(1～171條)的幼蟲，投藥后第10天、第20天糞檢蛔蟲卵均為陰性(表3)。

3 討論

蛔蟲病是大熊貓的一種常見寄生蟲病，嚴重威脅著大熊貓的健康(葉志勇，1989；馮文和，張安居，1991；楊光友，1998；張華等，2010；李德生等，2014)。針對蛔蟲病的藥物治療和驅蟲已開展了一些初步研究與篩選，葉志勇和張安居(1981)應用驅蟲凈、驅蛔靈、山道年酚酞及獸用敵百蟲4種藥物對8只大熊貓進行了驅蟲試驗，驅蟲凈、驅蛔靈和獸用敵百蟲效果較好，但研究未做定量分析。雙羥萘酸噻嘧啶和伊維菌素是廣譜、高效、低毒的腸道寄生蟲驅蟲藥物，普遍用于圈養大熊貓腸道驅蟲(張均利，蔡蓉根，1987；李德生等，2014)。對馬蛔蟲Parascarisequorum的驅蟲效果研究表明，雙羥萘酸噻嘧啶的有效率為97.6%，而伊維菌素的驅蟲效果差，僅為33.5%(Slocombeetal.，2007)。李德生等(2014)定量分析了2種藥物對大熊貓的驅蟲效果，得到了類似的結果，雙羥萘酸噻嘧啶的蟲卵轉陰率為80.00%，而伊維菌素的僅為44.44%，可能與伊維菌素的長期使用導致了寄生蟲的耐藥性有關(曹授俊等，2005)。阿苯達唑、芬苯達唑和甲苯咪唑是廣譜、高效、低毒的苯并咪唑類驅蟲藥，廣泛應用于人、家畜及野生動物蠕蟲病的防治(周忠勇等，1997；孫四平等，2008；楊美蘭等，2008；Lietal.，2012；唐耀，陳小麗，2018)，3種藥物在圈養大熊貓中已有零星使用(張銳，1991；劉維忠，楊光成，1994)，但對大熊貓蛔蟲的驅蟲效果還未做定量評估。本研究中，阿苯達唑對大熊貓蛔蟲成蟲和腸道幼蟲均有顯著的驅除效果。芬苯達唑的驅蟲效果需進一步觀察。甲苯咪唑對大熊貓蛔蟲4～5期幼蟲有很好的驅除效果。

表3 甲苯咪唑片劑對大熊貓蛔蟲的驅蟲效果Table 3 The deworming effect of mebendazole tablets on Ailuropoda melanoleuca

蠕蟲藥驅蟲效果的判定可以用蟲卵減少率和蟲卵轉陰率2個指標來判定。本實驗未選用蟲卵減少率這個指標，主要是因為考慮大熊貓的生活習性。大熊貓99%的食物都是竹子，但是它們對竹類的消化利用率較低，食物在體內停留的時間短，為了滿足能量需求而大量進食，故而排糞量多(10～13 kg)，糞便中蟲卵密度極低，因而對糞樣蟲卵進行糞便蟲卵數計數的值極不準確，容易造成人為取樣誤差。同時，大熊貓西氏貝蛔蟲完成其生活史的時間在60 d 以上，圈養大熊貓常自然排出或嘔吐出未發育成熟的幼蟲，初步評價藥物對幼蟲的驅除效果也是很重要的。

一些藥物會引起大熊貓的不適，存在安全隱患，如服用驅蟲凈、驅蛔靈后，大熊貓活動減少，有腹部不適，表現側臥、仰睡、排稀便等，而服用獸用敵百蟲后的反應更加強烈，會出現腸蠕動加快、口流清水、精神不振、爬臥或側臥、腹疼劇烈、呼吸和脈博加快等(葉志勇，張安居，1981)。本研究中的受試大熊貓在喂藥后未發現異常現象，表明3種藥物在10 mg·kg-1體質量連續口服2 d喂藥配置中的安全性較好，但因受試樣本數量有限，用藥安全性還有待進一步觀察。同時由于個體差異，對藥物毒性的敏感性不同，用藥時還需小心謹慎、密切觀察，避免事故發生。

制定合理的驅蟲計劃，對防治大熊貓蛔蟲病、保障大熊貓的健康有重要意義。輪換用藥是防止大熊貓蛔蟲產生抗藥性、保證驅蟲效果的重要手段。本研究為阿苯達唑、芬苯達唑和甲苯咪唑3種藥物對大熊貓西氏貝蛔蟲有效使用提供了重要參考。