李永娟 周文豪
北京英惠爾生物技術有限公司,北京100081
不同的發酵條件、生產工藝等會對發酵產品的性能產生影響,進而影響養殖動物的生產性能和健康狀況。在養殖生產中,常用消化率來評定原料的利用效果。劉勇等[1]以奧尼羅非魚為試驗對象,研究鮮雜魚- 豆粕發酵混合物替代魚粉對飼料營養物質和蛋白質消化率,發現混合發酵蛋白不同比例替代魚粉后對飼料干物質消化率和蛋白質消化率無顯著影響。在對不同飼料原料營養物質表觀消化率的研究中發現,凡納濱對蝦對酵解羽毛粉的消化率要高于水解羽毛粉,推測可能是因為羽毛粉在利用微生物發酵過程中產生了小肽、氨基酸等和大量的有益微生物菌群,從而能促進對營養物質的利用率[2]。運用體外消化法測定加州鱸對不同原料的消化率,結果顯示,加州鱸對原料的利用效果因飼料原料不同而出現差異,其中動物性蛋白的效果最好[3]。同樣,大口黑鱸對發酵豆粕的干物質表觀消化率要比普通豆粕高[4]。百惠康是經液體深層和固體定向發酵技術生產的酵母培養物,富含生物活性代謝產物,具有多重功能,被用來維持和改善動物的消化道健康及其免疫功能,提高飼料的適口性和利用率,增強抵御不良應激反應的能力。本實驗室研究人員已對百惠康進行過多次驗證,結果證明百惠康可以作為蛋白原料運用到飼料中。生產過程中,我們也在不斷改進和優化產品效果,所以本試驗選取草魚作為研究對象,研究了不同發酵條件下的3 種百惠康小試產品對草魚生長性能、消化率和抗感染能力的影響。
試驗飼料分為4 組,包括豆粕對照組和不同發酵條件百惠康等蛋白替代豆粕的試驗組,各處理組配方見表1。百惠康由北京英惠爾生物技術有限公司提供,粗蛋白55%。按照配方要求準確稱量粉碎后的各飼料原料,逐級放大混勻,用制粒機加工成3 mm的硬顆粒飼料。自然風干,保存備用。

表1 飼料配方及營養成分 %
試驗于北京英惠爾生物技術研究院室內溫控循環水養殖系統中進行,魚苗經暫養穩定后開始試驗。養殖試驗開始前,禁飼24 h。試驗分為4 個處理組,每個處理4 個重復,每個重復放養大小規格一致、初始體重230 g 左右的健康草魚25 尾,于350 L玻璃桶中養殖50 d,分別于每天08:00、11:00、14:00、17:00 進行飽食投喂。養殖試驗進行7 d 后,開始收集糞便。投喂飼料后,收集形狀完整的糞便于-20 ℃冰箱保存。糞便于55 ℃烘干,每缸收集到干重10 g 左右后結束收集工作。試驗期間連續充氧以保證溶氧,定期檢測水質。養殖期間溶氧>6.0 mg/L,水溫28~32 ℃,pH 7.5~8.0,氨氮<0.2 mg/L,亞硝酸鹽<0.02 mg/L。
養殖試驗結束后,饑餓24 h 開始采集樣品,每桶單獨稱重并記錄尾數。稱重結束后,每桶隨機取3尾魚,單獨測量體長、稱體重,分別剝離內臟、肝臟稱重,記錄數據。樣品采集結束后,每桶選8 尾魚腹腔注射嗜水氣單胞菌進行攻毒試驗,記錄7 d 的累積死亡率。
成活率(survival rate,SR)=試驗結束時魚尾數/試驗開始時魚尾數×100%;
增重率(weight gain rate,WGR)=(終末均重(g)-初始均重(g))/初始均重(g)×100%;
飼料系數(feed conversion rate,FCR)=攝食飼料干重(g)/(終末體重(g)-初始體重(g));
攝食率(feed intake,FI)=100×飼料消耗量(g)/((末體重(g)+初體重(g))/2×天數);
肝體比(hepatosomatic indices,HSI)=100%×肝臟質量(g)/魚體質量(g);
臟體比(viscerosomatic indices,VSI)=100%×內臟團重量(g)/魚體重(g);
肥滿度(condition factor,CF,g/cm3)=100×魚體重(g)/魚體長3(cm3);
飼料干物質表觀消化率= [1-飼料中Y2O3%/糞便中Y2O3%]×100%;
營養成分表觀消化率= [1-(飼料中Y2O3%×糞便營養成分%)/(糞便中Y2O3%×飼料營養成分%)]×100%;
累積死亡率(Accumulative mortality rate,AMR)=累計死亡尾數/初始尾數×100%。
試驗數據用平均值±標準誤(mean±SE)表示,數據分析采用SPSS 20.0 軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA),組間若有顯著性差異,再作Duncan 氏多重比較檢驗,顯著性水平為P<0.05。
由表2可知,各組之間增重率、特定生長率、飼料系數和攝食率均沒有顯著差異;百惠康1 組和百惠康2 組增重率高于對照豆粕組,百惠康3 組增重率低于對照組;特定生長率與增重率趨勢一致;百惠康1 組和百惠康2 組飼料系數低于對照組,百惠康3 組高于對照組;百惠康1 組攝食率高于對照組,其他2 組均低于對照組。

表2 不同發酵條件百惠康對草魚生長和飼料利用的影響
由表3可知,各組肥滿度、臟體比和肝體比均沒有顯著差異;百惠康組肥滿度高于對照組,臟體比低于對照組;百惠康1 組和百惠康2 組肝體比高于對照組,百惠康3 組低于對照組。

表3 不同發酵條件百惠康對草魚形體的影響
由表4可知,對照組和百惠康1 組干物質和粗蛋白質消化率顯著高于百惠康2 組和3 組,各組粗脂肪消化率之間沒有顯著差異。

表4 不同發酵條件百惠康對草魚消化率的影響
由圖1可知,第7 天時,各組死亡率均接近100%。其中,百惠康3 組最高,百惠康1 組最低。

圖1 不同發酵條件百惠康對草魚累積死亡率的影響
研究發現,不同發酵條件導致花生粕的營養成分和風味物質等不同[5]。羅琳等[6]在研究加工工藝即膨化和硬顆粒對鯉生長性能的影響時發現,膨化工藝飼料對魚體的生長有顯著效應。本試驗以不同發酵條件的酵母培養物(百惠康)為材料,研究其對草魚飼喂效果的影響,以篩選出效果更優的產品,促進百惠康產品的改進。試驗結果顯示,各組生長性能指標均沒有差異性,但是百惠康1 組和百惠康2 組的效果略高于對照組,而百惠康3 組略低于對照組,這表明不同發酵條件對百惠康會產生一定的影響。在對大口黑鱸的研究中,也顯示5 g/kg 酵母水解物除可促進蛋白沉積外,對其他生長指標沒有顯著影響[7]。酵母提取物經8 周飼喂后對中華絨螯蟹的生長性能略有促進作用,但也沒有產生顯著影響[8]。
消化酶活性可以衡量動物對營養物質的消化吸收能力,啤酒酵母粉替代牛蛙飼料中50%的魚粉后,會使腸道消化酶活性降低,從而使飼料干物質、粗蛋白和粗脂肪的表觀消化率顯著下降[9]。在對蝦的研究中,酵母水解物可以提高肝胰腺胰蛋白酶和脂肪酶的活性[10]。同樣,消化率也可以用來評價營養物質的利用情況。在本試驗中,不同發酵條件百惠康對草魚消化率的影響效果不同,百惠康1 組干物質和粗蛋白質的表觀消化率略高于對照組,其他2 組低于對照組。這可能是由于不同的發酵條件過程中會產生不同的代謝產物,從而影響營養物質的利用。
酵母源產品已被廣泛證明對動物的抗病能力有促進作用。在研究酵母培養物對鯽抗感染能力的影響中,酵母培養物替代鯽飼料中20%魚粉組的累積死亡率與對照組沒有顯著差異[11],活性酵母制劑可以促進刺參的抗病力,提高病原感染能力[12],酵母培養物可以改善烏蘇里擬鲿抗氧化和抗感染能力[13]。在本試驗中,百惠康1 組前期死亡較快,但最終累積死亡率與對照組相同,低于百惠康其他組,證明了酵母產品的抗病性能,同時表明了不同發酵條件的百惠康效果存在差異性。
百惠康替代豆粕可以提高草魚的生長性能,改善草魚的形體指標,影響營養物質的消化率,降低死亡率。綜合上述結果,百惠康1 組的效果優于百惠康2 組和百惠康3 組,結合生產工藝和草魚的生長效果推薦使用百惠康1 組的發酵條件。