牛布魯氏菌病快速檢測卡的應用

郭兆衛 丁宏 李文忠 楊科 普仕華 段琳琳 張書光*

(1，云南省德宏州動物疫病預防控制中心 678400；2，云南省盈江縣弄璋鎮李文忠奶牛場 678300；3，云南省隴川縣動物疫病預防控制中心 678700)

布魯氏菌病（簡稱布病）是由布魯氏菌感染引起的一種人畜共患疾病。患病豬、牛、羊等病畜是布病的主要傳染源，布魯氏菌可以通過破損的皮膚黏膜、消化道和呼吸道等途徑傳播。急性期病例以發熱、乏力、多汗、肌肉、關節疼痛和肝、脾、淋巴結腫大為主要表現[1]。慢性期病例多表現為關節損害等。布病是 《中華人民共和國農業農村部公告》 (第96 號) 公布的二類動物疫病。

傳染源：羊為主要傳染源，其次為牛和豬，目前為止，尚未見到人傳染給人的病例。傳播途徑：病菌可通過消化道、呼吸道黏膜、皮膚黏膜、眼結膜和性器官黏膜而發生感染。主要傳播途徑：獸醫或牧民為病畜接生；養殖戶、屠戶、擠奶工、廚師、實驗室檢測人員及經常接觸病畜的人員等均可受到感染（病菌易從接觸處的破損皮膚進入人體，可由皮膚、黏膜感染細菌）；消化道感染途徑多是通過進食染菌的生乳、乳制品和未煮沸病畜肉類。易感人群：所有人對布魯菌普遍易感。據報道，從 2011年 3～5月間，27 名學生和 1 名教師相繼確診感染布病，發病原因經流行病學調查確定為某大學動物醫學學院使用了患病山羊做動物實驗導致，該病畜實驗前未經現場檢疫。目前我省對布魯氏菌病采用檢疫凈化措施，檢出的布魯氏菌病陽性動物全部無害化處理，并對同群畜進行檢測排查。按照國家對撲殺動物補助標準：羊 500 元/只、肉牛 3000 元/頭、奶牛6000 元/頭、豬 800 元/頭，豬牛羊補償標準不高，如果引種時買到布魯氏菌病陽性動物，將給養殖戶帶來巨大損失。因此，建議在養殖場引種時購買布魯氏菌病快速檢測卡進行檢測后再行引種。

1 材料與方法

1.1 材料

牛，真空采血管，止血鉗，記號筆，采樣登記表，酒精棉球，平板，牛血清，虎紅平板凝集實驗抗原（中國獸醫藥品監察所）等，布魯氏菌病快速檢測卡（韓國安捷）。

1.2 使用真空采血管采集牛血

使用真空采血管（普通生化管）采集牛靜脈血2～5ml（牛180 份），4℃冰箱過夜保存，析出血清后取上清保存于1.5ml 離心管中，編號為B1-B180，-20℃保存待檢，同時將血清背景信息填寫在采樣登記表上。

1.3 虎紅平板凝集實驗

180 份待檢牛血清和布魯氏菌病陰、陽性血清解凍后，使用虎紅平板凝集實驗進行檢測，并記錄檢測結果等。

1.4 布魯氏菌病快速檢測卡

將分離到的血清和布病陰、陽性血清使用布魯氏菌病快速檢測卡進行檢測，記錄檢測結果。

2 實驗結果

參見附表。

附表 動物血清的虎紅平板凝集實驗和快速檢測卡檢測結果

3 討論

布魯氏菌病的檢測采用虎紅平板凝集實驗，需要采血、標記動物、分離血清、虎紅平板凝集實驗等步驟，耗費時間和人力。目前市場上出現的布魯氏菌病快速檢測卡種類越來越多，使用方便快捷，價格比虎紅平板凝集實驗略高，但快速檢測卡省去分離血清的時間，10min 內可以出檢測結果，因此未，來快速檢測卡很可能用于引種前快速檢疫[2]。實驗結果表明，在有限的樣本量里，虎紅平板凝集實驗和布魯氏菌病快速檢測卡檢測結果完全一致。因此，建議在養殖場引種時先使用布魯氏菌病快速檢測卡進行檢測后再行引種。