筋舒膠囊的鎮痛作用及對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響*

劉渝松 ，文 巧 ，郭 亮 ，李 蘭 ，馬善治 ，李 卿 ，葉承莉 ，郭劍華 ，劉才英 △

（1.重慶市中醫骨科醫院，重慶 400012； 2.重慶市中藥研究院，重慶 400065）

慢性軟組織損傷是因疲勞性損傷、積累性損傷、隱蔽性損傷或急性軟組織損傷久治不愈產生的一系列癥狀，也稱為陳傷或勞損。本病屬中醫“筋傷”范疇，《圣濟總錄·傷折惡血不散》云：“若因傷折，內動經絡，血行之道不得宣通，瘀積不散，則為腫為痛，治宜除去惡瘀，使氣血流通，則可以復完也。”筋舒膠囊為筋舒湯經劑型改良而成，由當歸、熟地黃、骨碎補、杜仲、雞血藤等中藥組方，具有舒筋活血、養血通絡、補肝益腎功效。本研究中在前期筋舒湯制備工藝、質量標準評價及急性毒性試驗基礎上，探討了筋舒膠囊的鎮痛作用及對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響，為筋舒膠囊治療慢性軟組織損傷提供實驗室依據。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 動物、儀器與試藥

動物：SPF級KM小鼠50只，雌雄各半，實驗動物生產許可證號為SCXK（渝）2017-0003，動物合格證號為0005271；SPF級SD大鼠70只，雌雄各半，實驗動物生產許可證號為SCXK（渝）2017-0003，動物合格證號為0005274，0005286，0005300。均由重慶市中藥研究院實驗動物研究所提供。飼養條件為分籠飼養，自由攝水，定期更換墊料，室溫20.4～24.5℃，相對濕度41% ～58%，壓力37～43 Pa。本研究符合動物實驗倫理學原則。大、小鼠維持飼料均購自北京科澳協力飼料有限公司，生產許可證號為 SCXK（京）2014-0010，批號為17103213。

儀器：R2000-3型電子計重計數秤（奧帝斯儀器＜常州＞有限公司）；BS224S型電子天平（北京賽多利斯儀器系統公司）；CLW-1020型純水機（重慶乾崍儀器有限公司）；DGF型電熱鼓風干燥箱（重慶銀河試驗儀器有限公司）；S.VS-1300U型凈化工作臺（上海躍進醫療器械有限公司）；FASCO-5010BX型血流變快測儀（重慶大學維多生物工程研究所）。

試藥：筋舒膠囊（重慶市中醫骨科醫院，批號為20171001）提取物；阿司匹林腸溶片（拜耳醫藥保健有限公司，批號為BJ34002）；復方丹參片（廣州白云山和記黃埔中藥有限公司，批號為G17A018）；冰醋酸（重慶川東化工＜集團＞有限公司化學試劑廠，批號為20160901）；戊巴比妥鈉（英國 Sigma公司，批號為908M031）；鹽酸腎上腺素注射液（重慶迪康長江制藥有限公司，批號為160801）。

1.2 方法

對小鼠的鎮痛作用[1-2]：取50只小鼠，按體質量分為模型組（A組，等體積純化水），陽性藥組（B組，阿司匹林腸溶片61.0 mg／kg），以及筋舒膠囊高、中、低劑量組（C1組、C2組、C3組，生藥 20.8，10.4，5.2 g／kg），各 10 只。分別灌胃給予相應藥物，給藥劑量均為20 mL／kg，每日1次，連續5 d。末次給藥后1 h，各組小鼠均腹腔注射0.8%冰醋酸0.2 mL，記錄注射后20 min內小鼠出現扭體反應（腹部內凹、伸展后肢、臀部抬高）的次數及其潛伏期。

對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響[3-5]：取70只大鼠，按體質量分為空白對照組（A組，等體積純化水），模型組（B組，等體積純化水），陽性藥組（C組，復方丹參片 1.1 g／kg）及筋舒膠囊高、中、低劑量組（D1組、D2組、D3組，生藥 10.4，5.2，2.6 g／kg），分別灌胃給予相應藥物，每日1次，連續7 d。末次給藥后 1 h，除 A組外，其余各組給藥體積均為每100 g體質量0.08 mL皮下注射0.1%腎上腺素，2 h后將大鼠置4℃冰水中浸泡5 min，于首次注射后4 h再次給予同劑量的腎上腺素（注：再次注射腎上腺素后死亡10只大鼠），禁食不禁飲18 h。次日給予戊巴比妥鈉45 mg／kg麻醉后腹主動脈采血約5 mL，分別加入肝素鈉抗凝管（3 mL）和EDTA抗凝管（2 mL），測定血液流變學指標。

1.3 統計學處理

采用SPSS13.0統計學軟件分析。計量資料以表示，行t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 對小鼠的鎮痛作用

與A組比較，B組、C1組、C2組小鼠扭體反應潛伏期顯著延長，且扭體反應次數顯著減少（P＜0.01），C3組小鼠僅扭體潛伏期顯著延長（P＜0.05）。詳見表 1。

表1 筋舒膠囊對小鼠的鎮痛作用（± s，n=10）

表1 筋舒膠囊對小鼠的鎮痛作用（± s，n=10）

注：與 A 組比較，*P＜0.05，**P ＜0.01。

組別A組B組C1組C2組C3組生藥劑量61.0 mg／kg 20.8 g／kg 10.4 g／kg 5.2 g／kg扭體潛伏期（min）3.5±0.7 8.3±1.9**5.3±0.8**5.2±1.0**4.3±0.7*扭體次數（次）30.6±7.7 13.2±5.7**13.8±6.6**14.8±4.7**28.3±9.1

2.2 對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響

與A組比較，B組大鼠血黏度，血漿黏度，紅細胞比容，還原黏度，紅細胞變形指數和紅細胞剛性指數均顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）；與B組比較，C組大鼠高切全血黏度、高切還原黏度、紅細胞聚集指數、紅細胞變形指數和紅細胞剛性指數均顯著降低（P＜0.05或P＜0.01）；D1組及D2組大鼠低切全血黏度和低切還原黏度均顯著降低（P＜0.05或P＜0.01）。詳見表 2。

表2 筋舒膠囊對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響（±s）

表2 筋舒膠囊對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響（±s）

注：與 A 組比較，#P ＜0.05，##P＜0.01；與 B 組比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01。

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3 討論

慢性軟組織損傷屬中醫“筋傷”范疇，是由于人體筋、骨、肌肉、脈絡受損，氣血瘀阻，損傷失治、遷延日久會形成“血虛”與“血瘀”并存，從而導致“筋脈瘀滯而失于精血之濡養”，出現腫脹、疼痛、功能受限等癥狀。當歸可抑制血小板聚集，明顯提高小鼠對熱刺激致痛的痛閾，抑制小鼠對化學刺激致痛的扭體反應[6]；丹參可通過作用靶點改善試驗動物的血液流變學，改變高黏滯血癥動物血液的黏、濃、聚、滯狀態[7]；牛膝總皂苷有明顯的鎮痛作用，且作用強度與劑量呈正相關[8]。

血瘀證是因血液流動性和黏性異常而引發的血流紊亂癥狀，主要表現為血液流變學異常及體內微循環障礙，伴有全血黏度升高及血小板聚集性增強等現象[9]。臨床已將血液流變學作為診斷血瘀證的客觀指標[10]。本研究中給予大鼠皮下注射大劑量腎上腺素以模擬暴怒時的機體狀態，并以冰水浸泡模擬寒邪入侵，建立了大鼠急性血瘀證模型，復制出了血液呈“黏、濃、凝、集”的狀態[11]。

復方丹參片主要由丹參、三七、冰片組方[12]，其中，丹參與三七均可顯著抑制血小板聚集，丹參主要成分丹參酮ⅡA可顯著降低血小板活性及凝血活性，丹酚酸B可顯著抑制血小板活化，丹參素可顯著延長凝血時間，抑制血小板聚集[13]。故本研究中以復方丹參片為陽性對照藥物。

本研究結果顯示，高、中劑量筋舒膠囊能顯著延長冰醋酸所致小鼠扭體反應潛伏期和減少小鼠扭體反應次數（P＜0.01），低劑量筋舒膠囊僅能能明顯延長冰醋酸所致小鼠扭體反應潛伏期（P＜0.05），提示筋舒膠囊具有明顯鎮痛作用。高、中劑量筋舒膠囊能明顯降低血瘀模型大鼠的低切全血黏度和低切還原黏度（P＜0.01或P＜0.05），且高切還原黏度也呈降低趨勢，提示筋舒膠囊對大鼠具有一定的活血化瘀作用。

綜上所述，筋舒膠囊有明顯的鎮痛作用及一定的活血化瘀作用，其活血化瘀作用可能與降低低切全血黏度和低切還原黏度有關。