土霉素分散片的制備及質(zhì)量評(píng)價(jià)

蔣公建，魏世軍，駱世軍，雷元軍，范建彪，符華林

（1.重慶市萬(wàn)州區(qū)畜牧站，重慶 萬(wàn)州 404100；2.重慶先鋒動(dòng)物藥業(yè)有限公司，重慶 萬(wàn)州 404100；3.重慶市開(kāi)州區(qū)畜牧獸醫(yī)局，重慶 開(kāi)州 405400；4.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院獸藥創(chuàng)新制劑工程技術(shù)研究中心，四川 成都 611130）

土霉素是20世紀(jì)40年代發(fā)現(xiàn)的四環(huán)素族廣譜抗菌藥物，獸醫(yī)臨床上廣泛用于治療大腸桿菌或沙門(mén)氏菌引起的下痢，多殺性巴氏桿菌引起的牛敗血癥、豬肺疫、禽霍亂，支原體引起的牛肺炎、豬氣喘病，血孢子蟲(chóng)引發(fā)的泰勒焦蟲(chóng)病以及放線菌病等[1]。土霉素在水中極微溶解，易溶于稀酸和稀堿，故常用其鹽酸鹽。臨床主要?jiǎng)┬陀型撩顾刈⑸湟骸⑵瑒㈩A(yù)混劑、混懸劑等[2-4]。

藥物的起效時(shí)間與藥物劑型息息相關(guān)，普通片劑由于崩解時(shí)間慢常常導(dǎo)致藥物起效較慢。分散片是一種速釋固體劑型，是指遇水迅速崩解并均勻分散的片劑，可口服或加水分散后飲用，也可咀嚼或含服，主要適用于難溶性藥物及生物利用度較差的藥物。現(xiàn)有的土霉素普通片劑，崩解遲緩，藥物溶出速度慢，生物利用度差，不能滿足臨床需要[4]。本研究將土霉素普通片劑制成分散片，利用分散片能迅速崩解、溶出的特點(diǎn)，解決土霉素內(nèi)服吸收不規(guī)則、不完全的問(wèn)題，為提高其生物利用度奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 藥品及試劑 土霉素，含量9%，來(lái)自石家莊某生化有限公司；羧甲基淀粉鈉（CMS-Na）、微晶纖維素（MCC）、低取代羥丙基纖維素（L-HPC）、聚乙二醇（PEG4000），均購(gòu)自安徽某藥用輔料有限公司；可溶性淀粉，購(gòu)自成都某化工公司。

1.2 主要儀器 片劑崩解儀，ZRS-6型智能溶出試驗(yàn)儀，TDP型單沖壓片機(jī)，紫外分光光度計(jì)。

1.3 土霉素分散片的制備方法

1.3.1 崩解劑的篩選 影響分散片質(zhì)量的最關(guān)鍵因素是崩解劑的選擇，本研究主要對(duì)崩解劑的種類和用量進(jìn)行了正交優(yōu)化。以可溶性淀粉和糊精按3∶1的比例混合作為填充劑，以10%淀粉漿作黏合劑，以崩解時(shí)限為主要檢測(cè)指標(biāo)，對(duì)預(yù)試驗(yàn)篩選的羧甲基淀粉鈉（CMS-Na）、低取代羥丙基纖維素（L-HPC）和微晶纖維素（MCC）三種不同崩解劑進(jìn)行考察。3種崩解劑的用量范圍分別為：CMS-Na 5%～9%，L-HPC 2%～4%，MCC 10%～20%。然后采取正交設(shè)計(jì)對(duì)各崩解劑的用量進(jìn)行優(yōu)化（見(jiàn)表1）。

表1 正交試驗(yàn)因素水平表

1.3.2 制備步驟 采取濕法制粒壓片的方法制備土霉素分散片[5]，崩解劑采取內(nèi)外加入法。具體制備過(guò)程：先稱取處方量的L-HPC、CMS-Na、MCC混合均勻；隨后分別稱取處方量的土霉素原藥、可溶性淀粉、糊精和50%崩解劑混合，加入適量10%淀粉漿，制成松、軟、黏、濕度適宜的軟材，過(guò)16目篩制粒，置于60℃干燥箱中烘干15 min；整粒過(guò)16目篩，加入潤(rùn)滑劑聚乙二醇（PEG4000）和剩余的50%崩解劑混合，用單沖壓片機(jī)壓片即得到土霉素分散片。

1.4 土霉素分散片的質(zhì)量檢測(cè)

1.4.1 崩解時(shí)限檢查 按照《中國(guó)藥典》附錄XA規(guī)定的崩解時(shí)限檢查法[6]，取土霉素分散片各6片，分別置崩解儀吊籃的玻璃管中，溫度為37±1℃，啟動(dòng)崩解儀，記錄崩解時(shí)間。

1.4.2 分散均勻性測(cè)定 按照《中國(guó)藥典》附錄IA有關(guān)片劑的規(guī)定[6]，分散片還應(yīng)該進(jìn)行分散均勻性測(cè)定，方法：取分散片6片，加入裝有100mL水（水溫控制在15～25℃）的燒杯中，照崩解時(shí)限檢查法，選擇篩孔內(nèi)徑為710μm的不銹鋼篩網(wǎng)，振搖3 min，考察分散片是否全部崩解并通過(guò)篩網(wǎng)。

1.4.3 片重差異測(cè)定 取20片土霉素分散片，精確稱量每片片重，求得平均值，計(jì)算片重差異，然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析[6]。

1.4.4 脆碎度檢查 按照藥典2015版附錄項(xiàng)下的檢查法進(jìn)行測(cè)定[6]。取若干片分散片，使其總重量約為6.5 g，用吹風(fēng)機(jī)吹去脫落的粉末，精密稱重，置圓筒中，轉(zhuǎn)動(dòng)100次，取出，同法除去粉末，精密稱重，計(jì)算減失重量。

1.4.5 溶出度測(cè)定 先建立土霉素含量測(cè)定方法[4]。精密稱取土霉素0.1 g，用適量稀鹽酸溶解并定容至100mL，得到1mg/mL的溶液，分別移取2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL于50mL容量瓶中，用水定容至刻度。以水為空白，在354nm處測(cè)定吸光度（A）值，將A值對(duì)濃度（C）進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：A=0.006874C-0.002389（r=0.9996，n=6）。結(jié)果表明，鹽酸土霉素在29.4～116.7μg/mL濃度范圍內(nèi)，吸光度與濃度呈良好的線性關(guān)系，精密度和回收率良好，可用于土霉素定量。

參考《中國(guó)藥典》附錄規(guī)定的方法測(cè)定溶出度[6]。以水為溶出介質(zhì)（500 mL），取最優(yōu)處方土霉素分散片和自制土霉素普通片，分別投入溶出度測(cè)定儀，設(shè)置溫度為37±0.5℃，轉(zhuǎn)速為75r/min，然后計(jì)時(shí)，至規(guī)定的取樣時(shí)間，每次吸取溶出液10mL（同時(shí)補(bǔ)充相同體積、相同溫度的水），立即用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾（取樣至過(guò)濾應(yīng)在30s內(nèi)完成）。取澄清濾液，測(cè)定吸光度，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算藥物濃度，然后推算出每片的溶出度。

2 結(jié)果與分析

2.1 崩解劑篩選結(jié)果 分散片與普通片的主要區(qū)別在于崩解時(shí)間不一樣，因此本研究主要對(duì)崩解劑進(jìn)行了優(yōu)化，其結(jié)果見(jiàn)表2。采用極差法對(duì)不同崩解劑組合的崩解時(shí)間進(jìn)行分析，得出3種崩解劑對(duì)崩解時(shí)間的影響順序?yàn)锳＞C＞B，即CMS-Na對(duì)崩解時(shí)間影響最大，其次是MCC，最后是L-HPC。3種崩解劑的最優(yōu)組合是A3B2C3。

表2 崩解劑篩選正交試驗(yàn)結(jié)果

驗(yàn)證試驗(yàn)：由于最后得到的崩解劑組合并未包括在9次試驗(yàn)中，故進(jìn)行了驗(yàn)證試驗(yàn)。按處方A3B2C3制備分散片，平行操作3次，結(jié)果3份樣品的崩解時(shí)限分別為45、37、41s，平均41s。可見(jiàn)驗(yàn)證試驗(yàn)和正交試驗(yàn)結(jié)果一致，表明該處方穩(wěn)定可行，所制得的三批分散片外觀光潔、完整，在水中崩解快，符合分散片的各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)。

2.2 最優(yōu)處方土霉素分散片的質(zhì)量評(píng)價(jià)

2.2.1 片重差異測(cè)定 20片土霉素分散片的片重及平均片重結(jié)果見(jiàn)表3。根據(jù)《中國(guó)藥典》規(guī)定的片重差異限度計(jì)算各片的片重差異[6]，并判斷各片是否符合規(guī)定。結(jié)果表明，制得的分散片片重差異在-2.810%～2.621%，符合《中國(guó)藥典》規(guī)定的“0.3 g以下片劑的片重差異在±7.5%內(nèi)”，說(shuō)明本研究研制的土霉素分散片片重差異符合要求。

表3 土霉素分散片片重差異分析

2.2.2 分散均勻性測(cè)定 結(jié)果顯示：所選取的6片分散片全部在3 min內(nèi)崩解并通過(guò)710 μm篩網(wǎng)，符合《中國(guó)藥典》規(guī)定[6]。

2.2.3 脆碎度檢查 結(jié)果顯示：所選取的分散片在規(guī)定時(shí)間內(nèi)減失重量為0.27%，未檢出斷裂、龜裂和粉碎的藥片，符合藥典規(guī)定。

2.2.4 溶出度測(cè)定 按照《中國(guó)藥典》附錄XC規(guī)定的方法測(cè)定溶出度，計(jì)算每個(gè)藥片在不同時(shí)間點(diǎn)的累積溶出度[6]，繪制分散片和普通片的溶出度曲線（圖1）。從圖1可以看出，土霉素分散片在30min時(shí)的累積溶出度已經(jīng)達(dá)到85%，而普通片的溶出度僅為55%，分散片的溶出速率明顯大于普通片，更有利于藥物的吸收和療效的發(fā)揮。

圖1 土霉素分散片和普通片的溶出度曲線圖

3 小結(jié)

控制分散片質(zhì)量的主要因素是結(jié)合主藥的性質(zhì)選擇能快速崩解溶出的適宜輔料，崩解劑的種類和量直接影響到分散片的內(nèi)在質(zhì)量[5]。本試驗(yàn)選擇L-HPC、CMS-Na、MCC三種崩解劑聯(lián)合使用，比單用一種崩解劑效果更好，而且在制備工藝中采用內(nèi)外加法，既有利于崩解，又利于溶出，提高了分散性。

CMS-Na是一種白色無(wú)定形粉末，由于分子結(jié)構(gòu)特殊致其在水中容易分散并溶脹，吸水后可膨脹至原體積的300倍，是性能優(yōu)良的崩解劑。MCC具有海綿狀的多孔管狀結(jié)構(gòu)，具有優(yōu)良的填充性和崩解性，常用于調(diào)節(jié)溶出速率。L-HPC具有很大的表面積和孔隙度，所以有很好的吸水速度和吸水量，其吸水膨脹率在500%～700%，崩解后的顆粒較細(xì)，利于藥物溶出。

通過(guò)以上試驗(yàn)結(jié)果分析得出，鹽酸土霉素分散片崩解迅速、溶出度高，符合分散片制劑要求，所用輔料價(jià)格便宜，且制備工藝簡(jiǎn)單，適合工業(yè)化生產(chǎn)，具有良好的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。