鑒定與衰老相關的甲基化基因及篩選具有逆調(diào)控效應的物質(zhì)

楊星九，黃 昊，馬 竣，周光朋，蔡海利，葉志海，王建銘，韓曉亮*，高 苒

(1.中國醫(yī)學科學院醫(yī)學實驗動物研究所，北京協(xié)和醫(yī)學院比較醫(yī)學中心，北京 100021； 2.博爾誠(北京)科技有限公司，北京 102600)

衰老是指機體對環(huán)境的生理和心理適應能力進行性降低、逐漸趨向死亡的現(xiàn)象。病理學上，衰老是應激和勞損，損傷和感染，免疫反應衰退，營養(yǎng)失調(diào)，代謝障礙以及疏忽和濫用藥物積累的結果，是包括癌癥、糖尿病、心血管疾病和神經(jīng)退行性疾病的主要危險因素[1]。尋找可靠的衰老生物標志物和延緩生理衰老的方法一直是科學家們熱衷研究的領域之一。

衰老是一個緩慢而復雜的生物進程，涉及遺傳學、表觀遺傳學等因素的作用和相互作用[2]。DNA甲基化修飾是一種表觀遺傳標記，是在DNA甲基化轉移酶(DNA methyltransferase，DNMT)或去甲基化酶的作用下，在基因組DNA中的CpG二核苷酸的胞嘧啶5’碳位共價鍵結合或去除一個甲基基團。DNA甲基化修飾是能夠在不改變DNA序列的前提下，改變遺傳表現(xiàn)，進而通過基因表達調(diào)控實現(xiàn)多種生物過程的發(fā)生和進行，包括胚胎發(fā)育、基因組印記和衰老等[3]。多種常見疾病涉及DNA甲基化修飾異常，如癌癥、心血管疾病、衰老和代謝紊亂等[4]。

DNA甲基化是一種可以在人群中定量檢測的表觀遺傳標記。近年的研究證明了人體基因組DNA甲基化的整體水平隨著年齡的增長顯著下降，并且很多研究報道了特定甲基化修飾位點與實際年齡具有顯著相關性[5]。Horvath和Hannum等[6-7]通過整合353和71個CpG位點建立了基于DNA甲基化的“表觀遺傳時鐘”模型；這些CpG位點的基因與細胞存活和發(fā)育顯著相關，通過檢測這些位點的DNA甲基化水平，可以評估機體的衰老進程。研究發(fā)現(xiàn)在患有與衰老相關疾病的人群中，如阿爾茨海默病、癌癥、心血管疾病和亨廷頓病，DNA甲基化年齡超過了實際年齡，此現(xiàn)象被定義為“年齡加速(age acceleration)”[5]。

越來越多的證據(jù)支持營養(yǎng)和飲食可以調(diào)控DNA甲基化修飾，進而調(diào)節(jié)健康狀況和影響衰老進程。Hannum等[8]運用71個CpG位點的DNA甲基化水平建立了年齡預測模型，并通過觀察性研究發(fā)現(xiàn)增加魚類和蔬菜的攝入與表觀遺傳老化程度減弱具有相關性。Lee等[9]在近期也證明了外源補充葉酸、維生素B12和黃烷醇能夠延緩女性甲基化年齡的衰老。因此，通過飲食干預逆轉DNA甲基化修飾異常，從而延緩衰老進程將可能成為一個新興的研究領域。

我們通過數(shù)據(jù)庫(Pubmed， CNKI和萬方數(shù)據(jù)庫)檢索關于DNA甲基化標志物和年齡預測的文獻，根據(jù)發(fā)表文獻中特定基因的DNA甲基化率與年齡的相關性，確定了兩個與人體衰老進程相關的甲基化基因，分別是促泌素(secretagogin，SCGN)和整合素亞基α2b(integrin subunit alpha 2b，ITGA2B)基因。本研究進一步運用GEO數(shù)據(jù)庫驗證了SCGN和ITGA2B基因甲基化標志物與人體衰老進程的相關性，并基于全基因組甲基化芯片數(shù)據(jù)，篩選其中與衰老進程相關性最高的甲基化位點，從而建立了相應的甲基化qPCR檢測體系。最后，我們通過獨立樣本的檢測進一步驗證其與衰老的相關性，并評估了抗衰老天然提取物中的有效物質(zhì)對與衰老相關的DNA甲基化標志物甲基化水平的影響。

1 材料和方法

1.1 實驗材料

1.1.1 外周血樣本

53名健康志愿者參與了此項研究；其中男性30例，平均41歲(24～60歲)，女性23例，平均41.4歲(27～60歲)，相應性別和年齡分布見表1，年齡和性別分布無顯著差異(P=0.756)。本研究的相關實驗遵循福利倫理的相關規(guī)則和要求，符合涉及人的生物醫(yī)學研究的倫理原則，包括知情同意原則、控制風險原則、免費和補償原則、保護隱私原則、依法賠償原則和特殊保護原則，所有志愿者同意此項研究并簽署了知情同意書。

1.1.2 細胞

胃癌AGS細胞系和肝癌HepG2細胞系購自中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所細胞資源中心。

1.1.3 文獻數(shù)據(jù)庫

PubMed數(shù)據(jù)庫(www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/)，中國知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫(www.cnki.net/)和萬方數(shù)據(jù)庫(www.wanfangdata.com.cn)；全基因組甲基化譜數(shù)據(jù)來源：基因表達匯編(Gene Expression Omnibus，GEO)數(shù)據(jù)庫(www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/)。

1.2 主要試劑與儀器

血細胞基因組DNA提取試劑盒和亞硫酸氫鹽處理試劑盒購自博爾誠(北京)科技有限公司；細胞RMPI-1640培養(yǎng)基和胎牛血清購自美國Gibco公司；阿扎胞苷(5-azacytidine, 5-Aza)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin gallate，EGCG)和沒食子酸(gallic acid， GA)購自美國Sigma公司；CCK8試劑盒購自日本同仁化學研究所；PCR引物和探針由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。磁珠分離架購自美國Invitrogen公司，實時定量PCR儀ABI 7500購自Life Technologies公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 篩選和驗證與衰老進程相關的甲基化基因

通過數(shù)據(jù)庫(Pubmed，中國知網(wǎng)和萬方)檢索關于DNA甲基化標志物和衰老相關的文獻，關鍵詞“methylation”，“biomarker”，“aging”和“甲基化”，“標志物”，“衰老”或“年齡”，根據(jù)發(fā)表文獻中特定基因的DNA甲基化率與年齡的相關性，篩選出了一組候選的與衰老相關的DNA甲基化標志物。通過檢索公共數(shù)據(jù)庫Gene Expression Omnibus(GEO)，獲取涉及人體衰老進程的全基因組甲基化調(diào)控的數(shù)據(jù)，并利用這些數(shù)據(jù)通過與年齡的相關性分析對上述甲基化基因進行驗證。

1.3.2 建立和驗證與衰老進程相關的甲基化基因的qPCR檢測方法

細胞基因組DNA提取、定量及亞硫酸氫鹽處理：血液和培養(yǎng)的細胞均按照血細胞基因組DNA提取試劑盒(博爾誠(北京)科技有限公司)說明書步驟，提取細胞基因組DNA，使用核酸蛋白濃度分析儀測定所提取DNA的濃度和純度。使用亞硫酸氫鹽處理試劑盒(博爾誠(北京)科技有限公司)說明書對符合要求的血細胞基因組DNA進行亞硫酸氫鹽轉化處理、純化；-20℃保存，48 h內(nèi)使用。

1.3.3 DNA甲基化位點的選定及其對應引物、探針的合成

基于全基因組甲基化芯片數(shù)據(jù)，挑選了與人體衰老進程相關性最高的SCGN和ITGA2B基因及位點，采用Meth-Primer軟件對基因序列進行分析，設計相應基因序列的引物序列及探針，建立了其甲基化qPCR檢測體系。引物和探針序列由生工生物工程(上海)股份有限公司合成，序列見表2。

表1 健康志愿者性別、年齡分布資料

表2 引物、探針序列

1.3.4 DNA甲基化陰陽性對照實驗及實時定量PCR及其結果判定

使用DNA甲基轉移酶處理的白細胞基因組DNA作為目標基因靶序列甲基化狀態(tài)的陽性參考品，全基因組擴增的白細胞基因組DNA作為目標基因靶序列甲基化水平的陰性參考品，ACTB(β-Actin)作為內(nèi)參，進行實時定量PCR，摸索基因的引物、探針等最佳反應條件。本研究使用ABI 7500實時定量PCR儀對DNA樣本進行PCR反應，50 μL體系中添加PCR反應液30 μL和DNA樣本液20 μL，反應液中包含正、反向引物(0.3 μmol/L)，檢測探針(1 μmol/L)。以2-ΔΔCT計算基因特異位點甲基化在細胞系中相對水平，其中ΔCT(試驗樣品)=CT(試驗樣品，目的基因)—CT(試驗樣品，內(nèi)參基因ACTB)，ΔΔCT(試驗樣品)=ΔCT(試驗樣品)—ΔCT(陽性參考品)。

注：A：SCGN甲基化水平與年齡呈正相關；B：ITGA2B甲基化水平與年齡呈負相關。圖1 SCGN和ITGA2B基因甲基化水平與年齡的相關性Note. A, Methylation level of SCGN was positively correlated with age. B, Methylation level of ITGA2B was negatively correlated with age.Figure 1 Correlation between SCGN and ITGA2B methylation levels and age

1.3.5 細胞培養(yǎng)

胃癌AGS細胞和肝癌HepG2細胞常規(guī)培養(yǎng)于DMEM完全培養(yǎng)液內(nèi)(含10%胎牛血清)，每48 h更換培養(yǎng)基，使用0.04%胰酶消化液消化細胞傳代，對數(shù)生長期細胞進行細胞學實驗。

1.3.6 細胞存活實驗

對數(shù)生長期細胞1×104個接種于96孔板，3種藥物按照不同濃度稀釋加入培養(yǎng)孔，每種藥物設3個復孔。培養(yǎng)48 h后吸棄上清，更換完全培養(yǎng)液(含10% CCK8)，繼續(xù)37℃孵箱培養(yǎng)3 h，振蕩床輕微振蕩10 s，采用自動酶標儀(Bio-Rad)檢測各孔450 nm波長的吸光度。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 甲基化基因特異位點的篩選及驗證

通過256例人體外周血白細胞基因組DNA的全基因組甲基化芯片(Illumina公司的Human Methylation 450k芯片)數(shù)據(jù)與相應個體年齡的相關性分析，驗證了候選DNA甲基化標志物促泌素(secretagogin，SCGN)和去甲基化標志物整合素亞基α2b(integrin subunit alpha 2b，ITGA2B)的甲基化率(β)與生物年齡均具有顯著性相關性(圖1)，相關系數(shù)R2分別為0.6439和0.7233，P值均小于0.001。

2.2 甲基化陰陽性對照體系的選擇

在本研究中，DNA甲基轉移酶處理的白細胞基因組DNA的目標基因靶序列為完全甲基化狀態(tài)，全基因組擴增的白細胞基因組DNA的目標基因靶序列為完全去甲基化狀態(tài)。因此，我們使用DNA甲基轉移酶處理的白細胞基因組DNA作為目標基因靶序列甲基化狀態(tài)的陽性參考品，全基因組擴增的白細胞基因組DNA作為目標基因靶序列甲基化水平的陰性參考品。

經(jīng)多次實驗摸索條件后確定最優(yōu)反應條件：94℃ 20 min；55.5℃ 35 s，93℃ 30 s，45個循環(huán)；40℃ 5 s；4℃保存。對陽性參考品的檢測中，SCGN基因靶序列顯示發(fā)生擴增，在45個循環(huán)內(nèi)未檢測到ITGA2B基因靶序列的擴增(圖2A)，對陰性參考品的檢測中，ITGA2B基因靶序列顯示發(fā)生擴增，而在45個循環(huán)內(nèi)未檢測到SCGN基因靶序列的擴增(圖2B)，說明本系統(tǒng)均能夠特異檢測到處于甲基化狀態(tài)的SCGN和去甲基化狀態(tài)ITGA2B基因。

注：A：陽性參考品能特異檢測到甲基化的SCGN；B：陰性參考品能特異檢測到去甲基化的ITGA2B。圖2 SCGN和ITGA2B檢測體系的擴增曲線Note. A, Positive reference can specifically detect methylated SCGN. B, Negative reference can specifically detect demethylated ITGA2B.Figure 2 Amplification curves of the SCGN and ITGA2B detection systems

2.3 SCGN的甲基化和ITGA2B的去甲基化水平均與年齡呈線性關系

2.4 EGCG和GA抑制腫瘤細胞存活

腫瘤是衰老的一種表現(xiàn)，綠茶提取物的主要成分EGCG和GA已證明具有延緩衰老的功效，本研究使用EGCG和GA作用于胃癌細胞AGS和肝癌細胞HepG2，觀察EGCG和GA對腫瘤細胞存活能力的影響，化療藥物5-Aza作為陽性對照。結果顯示5-Aza，EGCG和GA對胃癌細胞AGS和肝癌細胞HepG2均具有顯著的抑制生存作用(劑量-存活曲線，見圖4)，IC50分別為21.4 μmol/L、26.1 μmol/L、40 μmol/L和13.9 μmol/L、62.1 μmol/L、114.4 μmol/L。

2.5 EGCG和GA逆轉細胞中的SCGN的甲基化和ITGA2B的去甲基化水平

注：A：SCGN甲基化水平與年齡呈正相關；B：ITGA2B甲基化水平與年齡呈負相關；C：基于SCGN和ITGA2B甲基化水平的模型相對值與年齡呈正相關；D：男性和女性的基于SCGN和ITGA2B甲基化水平的模型相對值與年齡均呈正相關。圖3 SCGN和ITGA2B基因甲基化水平與年齡的相關性Note. A, Methylation level of SCGN was positively correlated with age. B, Methylation level of ITGA2B was negatively correlated with age. C, Relative values of the model based on SCGN and ITGA2B methylation levels were positively correlated with age. D, Both relative values of the model based on SCGN and ITGA2B methylation levels of males and females were positively correlated with age.Figure 3 Correlation between SCGN and ITGA2B gene methylation level and age

注：A、B和C：分別顯示5-Aza、EGCG和GA對胃癌AGS和肝癌HepG2細胞48 h的劑量—存活曲線。圖4 藥物對AGS和HepG2細胞的劑量—存活曲線Note. Dose-survival curves of 5-Aza (A), EGCG (B), and GA (C) for gastric cancer AGS cells and liver cancer HepG2 cells for 48 h, respectively.Figure 4 Dose-survival curves of drugs on AGS and HepG2 cells

阿扎胞苷(5-Aza)是一種胞嘧啶核苷類藥物，能直接摻入DNA中，抑制DNA和RNA合成，可殺傷處于S期的細胞，其可以抑制基因組DNA的整體甲基化，無特異靶向性，本研究中使用5-Aza作為逆轉DNA甲基化的陽性對照藥物。綠茶提取物的主要成分EGCG和GA已證明具有延緩衰老的功效，我們使用EGCG和GA處理胃癌細胞AGS和肝癌細胞HepG2后，發(fā)現(xiàn)基因組DNA中SCGN基因的甲基化水平下降，ITGA2B基因的去甲基化水平下降，差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而已知的廣譜的DNA甲基化抑制劑5-Aza能夠顯著抑制SCGN的甲基化水平和增加ITGA2B的去甲基化水平(即ITGA2B的甲基化水平下降)(如圖5)。以上說明EGCG和GA可能通過多靶點抑制衰老作用基因的甲基化水平(SCGN)和去甲基化水平(ITGA2B)從而逆轉衰老進程，而5-Aza通過抑制基因組DNA的整體甲基化水平，更多的發(fā)揮細胞毒性作用。因此，本檢測方法能夠用于監(jiān)測藥物、營養(yǎng)品、或保健品對細胞、組織、或人體的抗衰老作用和功效評估。

注：A：5-Aza、EGCG和GA均能下調(diào)AGS和HepG2細胞的SCGN甲基化水平；B：5-Aza上調(diào)AGS和HepG2細胞的ITGA2B的去甲基化水平(即下調(diào)甲基化)，EGCG和GA顯著下調(diào)ITGA2B的去甲基化。*P<0.05, ** P<0.01, *** P<0.001。 圖5 藥物對細胞系SCGN、ITGA2B基因甲基化水平的影響Note. A, 5-Aza, EGCG, and GA down-regulated SCGN methylation levels in AGS and HepG2 cells. B, 5-Aza up-regulated the demethylation level of ITGA2B in AGS and HepG2 cells (i.e., down-regulation of methylation), and EGCG and GA significantly down-regulated the demethylation of ITGA2B. *P<0.05， **P<0.01， ***P<0.001.Figure 5 Effect of drugs on the methylation levels of SCGN and ITGA2B genes in cell lines

3 討論

迄今為止，DNA甲基化是在衰老研究中最為廣泛研究的表觀遺傳機制。近年全基因組DNA甲基化測序技術的廣泛應用，DNA甲基化在衰老研究領域中的研究成果快速增長。隨著機體組織的衰老，基因組DNA甲基化整體水平通常會降低，但某些與特定基因相關的DNA序列在衰老過程中發(fā)生DNA甲基化水平上升[10]。隨著這些研究成果的積累，表觀年齡的概念被逐步建立和接受。在已建立的多種“表觀遺傳時鐘”模型中，Horvath等建立的基于353個CpG位點的DNA甲基化預測模型被廣泛使用，其年齡預測準確度為+/-3.6年[6]。Hannum等利用血細胞基因組DNA甲基化數(shù)據(jù)建立的基于71個CpG位點的年齡預測模型與年齡具有較高的相關性，預測準確度為+/-4.9年[7]。即使Horvath和Hannum的“表觀遺傳時鐘”模型顯示與實際年齡較高的相關性，但兩個模型只共享了5個CpG位點[5]。Weidner等開發(fā)了一種基于血液樣本的“表觀遺傳時鐘”，其優(yōu)先將數(shù)據(jù)集減少到與年齡高度相關的102個CpG位點，其中ITGA2B，ASPA和PDE4C基因上的3個CpG位點構建的預測模型顯示與實際年齡具有較高的相關性，預測準確度為+/-3.3年[11]。以上位點的數(shù)據(jù)均是基于微陣列芯片研究，需要大量的DNA和復雜的生物信息學分析。因此，我們擬篩選一組與年齡相關的甲基化基因，并通過設計特異引物和探針識別和量化與單個表觀遺傳位點相關的CpG位點的甲基化狀態(tài)，從而簡化操作流程和降低檢測成本。

通過文獻檢索分析，我們確定了一組與人體衰老進程相關的甲基化基因，運用GEO數(shù)據(jù)庫對這些甲基化相關標志物進行了驗證，結果發(fā)現(xiàn)SCGN和ITGA2B基因甲基化水平與年齡具有顯著相關性。根據(jù)微陣列芯片中基因甲基化與年齡的相關性及探針位點(SCGN：cg06493994，ITGA2B：cg25809905)，我們對SCGN和ITGA2B的特異位點的DNA甲基化檢測建立了定量PCR檢測體系。SCGN基因位于6號染色體上，編碼的蛋白是一種分泌型鈣結合蛋白，主要位于細胞質(zhì)中，該蛋白被認為參與氯化鉀刺激的鈣通量和細胞增殖[12-13]。ITGA2B基因位于17號染色體上，編碼的蛋白是整合素鏈家族成員之一，編碼前原蛋白經(jīng)蛋白水解生成輕鏈和重鏈，通過二硫鍵結合形成α-2b/β-3整合素細胞粘附受體的亞基，這種受體通過介導血小板聚集在血液凝固系統(tǒng)中起著至關重要的作用[14]。

在本研究中，我們使用DNA甲基轉移酶處理的白細胞基因組DNA和全基因組擴增的白細胞基因組DNA分別作為目標基因靶序列甲基化狀態(tài)的陽性參考品和陰性參考品，建立了SCGN和ITGA2B的特異位點的DNA甲基化檢測體系。對53名志愿者血漿檢測結果顯示SCGN和ITGA2B基因靶序列的甲基化水平均與年齡呈顯著的相關性，其與相關研究結果一致。進一步對SCGN基因靶序列的Ct值和ITGA2B基因靶序列的Ct值進行回歸分析，獲得回歸方程，結果顯示回歸方程計算的幾何平均值與年齡具有更顯著的相關性。Horvath和Hannum的DNA甲基化表觀年齡預測的檢測使用甲基化芯片檢測(Infinium 450K)，檢測費用昂貴，技術難度大，難以廣泛推廣。我們在本研究中通過檢測SCGN的甲基化和ITGA2B的去甲基化水平，建立了一種新的DNA甲基化衰老預測模型，該模型推算的結果與生物年齡具有較好的相關性。

營養(yǎng)素和飲食，如葉酸、膽堿、蛋氨酸、維生素B6和B12，可以通過參與單碳代謝，促進S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)(通用甲基供體)產(chǎn)生，增強DNA甲基化，從而實現(xiàn)DNA甲基化修飾的調(diào)控[15-16]。天然提取物的主要成分，如表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯(EGCG)、沒食子酸(GA)、白藜蘆醇、類黃酮、木黃酮和槲黃素等，可以通過抑制DNA甲基化轉移酶，導致整體DNA甲基化水平下降[16]。營養(yǎng)素和飲食可以通過DNA甲基化的調(diào)控調(diào)節(jié)代謝、改變疾病易感性，從而維持健康及預防疾病發(fā)生[17-19]。

腫瘤是細胞衰老的表現(xiàn)和結果。我們使用腫瘤細胞模型對化療藥物5-Aza和天然化合物EGCG、GA進行了評估，觀察化合物對細胞生長增殖能力及對SCGN和ITGA2B的甲基化水平的影響。結果顯示5-Aza，EGCG和GA對胃癌細胞AGS和肝癌細胞HepG2均具有顯著的抑制生長增殖作用。EGCG和GA能夠逆轉基因組DNA中SCGN的甲基化和ITGA2B的去甲基化，而已知的DNMT1抑制劑5-Aza能夠顯著抑制基因組的DNA甲基化水平，包括SCGN和ITGA2B。說明EGCG和GA可能通過多種機制調(diào)控衰老相關基因的甲基化水平(SCGN)和去甲基化水平(ITGA2B)，從而逆轉衰老程度。天然化合物EGCG和GA是綠茶提取物和發(fā)酵烏龍茶提取物的主要成分，已證明具有逆轉DNA甲基化及延緩衰老的功效[20-22]，本研究的結果與其相一致。因此，通過檢測SCGN和ITGA2B的甲基化水平，可以評估機體的衰老程度，進一步可以作為評估藥物、營養(yǎng)品或保健品對細胞、機體或人體的抗衰老作用和功效。

本研究建立的基于SCGN和ITGA2B的甲基化水平衰老預測模型，與實際年齡具有較好的相關性，但標準誤差仍然較大，可能與模型建立使用的樣本量太小(53例)相關。另一方面，表觀遺傳學的變化與機體的健康狀態(tài)相關，我們猜測模型構建的樣本人群的健康狀態(tài)也是導致標準誤差較大的主要原因之一，即模型預測值反映的是機體的健康狀態(tài)，根據(jù)模型預測值推算的生物學年齡高于正常值，說明機體可能處于亞健康狀態(tài)。因此，我們需要大規(guī)模收集樣本，并了解樣本人群的健康狀態(tài)，整體評估衰老預測模型，同時評估基于SCGN和ITGA2B的甲基化水平衰老預測模型用于評估機體健康狀態(tài)的可能性。

人體衰老是一個緩慢而復雜的生物進程，涉及遺傳學、表觀遺傳學等因素的作用和相互作用。基因組甲基化調(diào)控是表觀遺傳學的一種重要機制。此項研究驗證了文獻報道的SCGN和ITGA2B基因甲基化調(diào)控與衰老進程的相關性，并建立了一種方便、便捷的甲基化qPCR檢測方法及衰老預測模型。借助這一檢測方法，我們篩選、驗證了抗衰老天然提取物中有效成分對SCGN和ITGA2B基因甲基化調(diào)控的逆轉效應。此項研究證明了與人體衰老相關的甲基化調(diào)控有可能在藥物或營養(yǎng)物質(zhì)的作用下發(fā)生逆轉，并通過檢測特定基因甲基化調(diào)控的變化有可能用于監(jiān)測人體衰老進程，另一方面，檢測特定基因甲基化調(diào)控的變化有可能用于檢測人體的健康狀態(tài)，這為基于基因甲基化調(diào)控機制開發(fā)抗衰老或者調(diào)節(jié)健康狀態(tài)的藥物或產(chǎn)品提供了實驗證據(jù)和研發(fā)工具。