HPLC-MS/MS測定氧化型染發劑中11種染料成分

文/張鵬，廣東中科樂活環境科技有限公司

關鍵字：HPLC-MS/MS測定；染發劑；燃料成分

近些年，染發已經成為人們追求年輕、時尚的首要選擇。根據染色后可以持續的時間，染發劑劃分為暫時性、半永久性、永久性三類，其中，永久性包含植物、金屬和氧化三類永久性染發劑[1]。其中，氧化型染發劑內包含苯胺類物質，存在一定的毒性、致敏性，長時間使用，會導致患者出現皮膚過敏、誘發各類癌癥等危害[2]。如今，用于檢測染發劑內染料的方法包含高效液相色譜法（HPLC）、高效液相色譜-質譜法（HPLC-MS）等[3]。本文以氧化型染發劑內11種成分為對象，探究實施HPLC-MS/MS測定的方法，以期為類似研究提供一定的參考。

1 實驗儀器與方法

1.1 實驗儀器與材料

所選11種燃料標準品純度均超過98%，其中，染料（5）、（7）分別選購與比利時、瑞士；其它燃料購于百靈威科技有限公司，具體見表1。實驗用水通過Milli-Q超純水機制備完成；混合春被溶液劑量為100mg/L,依次稱取標準品各0.0100g，添加0.10g抗壞血酸，以5%甲醇溶解以后，定容為100mL棕色容量屏內.這一溶液避光保存在4oC,限定一周使用，并利用水稀釋到所需的濃度。

表1 實驗使用產品規格、性狀

表2 實驗所有部分儀器

1.2 方法

稱取0.10g市場上發售的染發劑樣品、抗壞血酸0.05g置入25mL具塞比色管內,添加10mL甲醇(5%)及10mL正乙烷,實施渦旋振蕩、超聲振蕩分別為30s、10min。選取4000r/min離心處理5min，除去正乙烷層。添加10mL正乙烷,重復上述操作.選取經上述處理得甲醇水溶液1mL讓其過SPEC18小柱，以5%甲醇洗脫，定容到100mL。這一溶液經濾膜過濾，待測。

2 結果

2.1 萃取劑及條件的選擇

本次研究使用的11種待測染料均是苯的硝基、甲基及氨基等物質的替代物，需要使用極性強的溶劑完成提取操作。本次使用使用水與甲醇、乙醇或者乙酸以此混合開展萃取實驗。實驗種，還深入分析抗壞血酸、亞硫酸鈉等抗氧化劑對于目標組分的保護功能。氧化型染發劑大多為膏狀或者粉狀，在液體介質內分散性比較差。開展實驗時，先要挑選渦旋振蕩促使樣品和溶劑充分均勻，并通過超聲抽提，利用正交、單因子實驗對樣品潮濕萃取條件進行優化出來。選取抗壞血酸為抗氧化劑，超聲提取時間控制為10min。

2.2 HPLC條件確定

11種有待檢測組分極性比較強，因此，挑選較小的分子量物質分離的反相C18柱當做分離柱。采用EC-C18色譜柱，這些待測樣品能夠在10min之內獲取滿意的分離效果。依次考察甲醇-水、乙腈-水這兩種流動相狀態下組分的分離度極其響應值。研究結果證實，所用甲醇-水流動相展開梯度洗脫，部分組分響應數值略高于乙腈-水。采用10mmol/L乙酸銨-甲醇作為流動相可有效抑制拖尾,有效改善色譜的峰形.為促使11種目標組分同時展開測定,并把原有梯度開展適當的分段,從而獲取HPLC-MS/MS譜,見圖1.根據該圖可知,并未實施完全分離的染料3和11、染料1和10均可利用不同定量粒子實施分離和測定操作。

圖1 HPLC-MS/MS譜效果圖

2.3 實際樣品測試結果分析

通過本文提到的方法對5種不同品牌的氧化型染發劑樣品展開成分分析，研究結果表明，被檢測的染料3、8、11含量均沒有大于標準的限定值。研究結果證實，本文使用的方法用于氧化型染發劑染料成分檢測中在監測范圍、條件等方面均有獨特的優勢，具有良好的應用前景。