25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑高效液相色譜分析

李彥飛，馮澤騰，張小軍

（中農立華生物科技股份有限公司，北京 100052）

敵草隆（diuron），化學名稱為3-(3,4-二氯苯基)-1,1-二甲基脲，其屬于光合系統Ⅱ受體位點的光合作用電子傳遞抑制劑。敵草隆為脲類除草劑，用于非耕作區防除一年生禾本科雜草和某些闊葉雜草，如旱稗、馬唐、狗尾草、野莧草、莎草、藜等，也能防除稻田眼子菜、四葉萍，牛毛草等[1-5]。丙炔氟草胺（flumioxazin），化學名稱為N-(7-氟-3,4-二氫-3-氧-(2-丙炔基)-2H-1,4-苯并嗪-6-基)環己-1-烯-1,2-二羧酰亞胺，其屬于原卟啉原氧化酶抑制劑。在光和氧中，引起敏感作物中原卟啉的大量累積，使細胞膜脂質過氧化作用增強，從而導致敏感雜草的細胞膜結構和細胞功能不可逆損害。丙炔氟草胺可穩定控制棉花、大豆、花生、蘋果、柑橘、葡萄、梨等田間的水萱麻、藜、地膚、刺苞果、粟米草、望江南、野菊、毛木藍、曼陀羅、牽牛、鼠李、龍葵、黑茄、馬齒莧等雜草，尤其是對闊葉雜草防效較好，并且對三嗪類光合作用抑制劑、磺酰脲類、磺酰苯胺和咪唑啉酮類等ALS抑制劑產生抗藥性的雜草具有較好的防治效果[6-10]。目前丙炔氟草胺、丙草胺分析方法均較成熟，但對于兩者的復配制劑分析方法尚未見報道。

本文建立了高效液相色譜法對25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑中2種有效成分進行同時分析，結果表明該方法具有重現性好，準確度高，分離效果好等優點。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

美國安捷倫Agilent 1220高效液相色譜儀（具備紫外可變波長檢測器）；TU-1901型普析通用紫外可見分光光度計；色譜柱：Agilent TC-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 m）。

乙腈（色譜純），新蒸2次蒸餾水；敵草隆標樣（純度≥99%）、丙炔氟草胺標樣（純度≥99%），北京勤誠亦信科技開發有限公司提供；25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑，中農立華生物科技股份有限公司。

1.2 色譜條件

流動相：乙腈+水（體積比為55∶45），流速0.8 mL/min，柱溫30℃，檢測波長230 nm，進樣體積5.0 L，在上述色譜操作條件下，敵草隆的保留時間約為6.2 min，丙炔氟草胺的保留時間約為7.7 min。敵草隆及丙炔氟草胺標樣色譜見圖1。25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑樣品的高效液相色譜圖見圖2。

圖1 敵草隆及丙炔氟草胺標樣高效液相色譜圖

圖2 25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑高效液相色譜圖

1.3 溶液配制

1.3.1 標樣溶液的配制

稱取敵草隆標樣0.05 g（精確至0.000 2 g），丙炔氟草胺標樣0.02 g（精確至0.000 2 g），置于100 mL的容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻并超聲溶解10 min，用0.45 m濾膜過濾，備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑試樣0.3 g（精確至0.000 2 g），放置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻并超聲溶解10 min，用0.45 m濾膜過濾，備用。

1.4 測定

在上述操作條件下，待儀器穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰2針敵草隆或丙炔氟草胺標樣的峰面積相對變化小于1.0%后，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

1.5 計算

將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標樣溶液中的敵草隆或丙炔氟草胺峰面積分別進行平均。試樣中敵草隆或丙炔氟草胺的質量分數w（%）按下式計算。

式中：A1為標樣溶液中敵草隆或丙炔氟草胺峰面積平均值；A2為試樣溶液中敵草隆或丙炔氟草胺峰面積平均值；m1為標樣的質量，g；m2為試樣的質量，g；P為標樣中敵草隆或丙炔氟草胺的質量分數，%。

2 結果與討論

2.1 流動相的選擇

以甲醇與水按不同比例為流動相時，敵草隆和丙炔氟草胺的出峰時間晚且峰形較寬。當以乙腈與水作為流動相時，二者的出峰時間適中，峰形尖銳無拖尾，且分離效果良好。綜合考慮，最終選定乙腈+水（體積比為55∶45）為流動相。

2.2 檢測波長的選擇

通過使用TU-1901型普析通用紫外可見分光光度計對敵草隆和丙炔氟草胺標樣溶液在近紫外區波段范圍內進行掃描，可得到該標樣溶液對應的吸收波長與響應值的紫外光譜圖。當檢測波長選定為230 nm時，敵草隆與丙炔氟草胺的吸收峰強烈，且基線平穩，雜質吸收較小，主峰和雜質峰分離效果較好。因此，最終選定230 nm作為本分析方法的檢測波長。

2.3 分析方法的線性相關性

分別稱取5個不同質量的敵草隆、丙炔氟草胺標準品于100 mL的容量瓶中，依據上述色譜條件配置成一系列不同質量濃度的標準溶液進行測定。以敵草隆（丙炔氟草胺）進樣質量為橫坐標，以敵草隆（丙炔氟草胺）峰面積為縱坐標繪圖，得敵草隆和丙炔氟草胺的線性相關性曲線，分別見圖3、圖4。

圖3 敵草隆線性關系圖

圖4 丙炔氟草胺線性關系圖

敵草隆線性方程為y=2 220.6x+154.39，r2=0.999 3。丙炔氟草胺線性方程為y=4 855x-30.48，r2=0.999 8。該方法在測定范圍內線性相關性很好。

2.4 方法的精密度

從同一個25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑中準確稱取5個試樣，在上述色譜操作條件下進行分析，試驗結果見表1。由表1可知，敵草隆質量分數為18.08%，標準偏差為0.039，變異系數為0.22%。丙炔氟草胺質量分數為7.29%，標準偏差為0.038，變異系數為0.52%。該方法的精密度能滿足定量分析要求。

表1 25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑精密度測定

2.5 方法的準確度

在已知含量的25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑中加入一定量的敵草隆、丙炔氟草胺標樣，在上述液相色譜操作條件下進行測定，并計算回收率。回收率測定結果見表2。

表2 25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑回收率測定

3 結論

本文采用高效液相色譜法同時測定25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑中有效成分質量分數。本方法準確度和精密度高，線性關系良好，簡便、快速，是25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑可行的分析方法。