布病疫苗不同免疫方法對(duì)比評(píng)價(jià)

吳 丹 張夏平 劉冬冬 李 偉

（吉林省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林長(zhǎng)春 130062）

布魯氏菌病被稱為補(bǔ)兵，是一種由布魯氏菌屬引起的一種奀瘦共患的傳染病，是一種細(xì)胞內(nèi)寄生的病原菌，主要的侵害部位就是動(dòng)物的淋巴系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)，能夠感染的生物型是比較多，其中羊布魯氏菌的致病性是最強(qiáng)的，在臨床上也是牛、羊、豬的布魯氏菌病的影響最大，病畜主要是通過流產(chǎn)物、精液和乳汁排菌。免疫接種的范圍主要是疫情呈地方性流行的區(qū)域，主要的免疫對(duì)象是免疫接種范圍內(nèi)的牛、羊、豬等等，主要是通過采用滴眼免疫、灌服免疫和自由飲水免疫的方法對(duì)實(shí)驗(yàn)羊只進(jìn)行疫苗免疫，然后對(duì)動(dòng)物血清進(jìn)行采集，然后通過虎紅平板、試管凝集等方法對(duì)免疫前后的不同時(shí)期的抗體水平進(jìn)行對(duì)比，然后選取出最佳的免疫方法，具有一定的推廣價(jià)值。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

對(duì)某地區(qū)某羊場(chǎng)的實(shí)驗(yàn)羊只主要有100只，大都是6～10月齡之間的羊只。在經(jīng)過布病虎紅凝集試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)之后進(jìn)行檢測(cè)均為陰性；隨機(jī)分為4組，每組為25只，分別為滴眼免疫組（A組）、灌服免疫組（B組）、自由飲水免疫組（C組）、對(duì)照組（D組）。被試驗(yàn)的羊只都要進(jìn)行耳標(biāo)標(biāo)記，要按照正常的聲場(chǎng)對(duì)羊只進(jìn)行隔離飼養(yǎng)和管理[1]。

1.2 實(shí)驗(yàn)器材

微量加樣器、林心肌、消毒器、消毒好的玻璃板、牙簽注射器、一次性手套、防護(hù)服和電冰箱。

1.3 試劑

病虎紅凝集抗原、陰陽(yáng)性血清購(gòu)自中國(guó)獸藥監(jiān)察所；布病試管凝集試驗(yàn)抗原、陽(yáng)性血清：中國(guó)獸藥監(jiān)察所。

2 試驗(yàn)方法

使用生理鹽水按照相關(guān)的說(shuō)明對(duì)布病疫苗進(jìn)行稀釋，然后按照預(yù)先設(shè)計(jì)好的內(nèi)容進(jìn)行分組，對(duì)A組的動(dòng)物實(shí)施滴眼免疫的方式，對(duì)于B組使用灌服的方式進(jìn)行免疫；將疫苗吸入到去掉針頭的注射器當(dāng)中，然后進(jìn)行灌服；對(duì)C組進(jìn)行自由飲水的免疫，對(duì)照組不進(jìn)行免疫處理，各組的羊只都要進(jìn)行隔離飼養(yǎng)。

表1 各個(gè)實(shí)驗(yàn)組試管凝集實(shí)驗(yàn)平均凝集效價(jià)

在進(jìn)行免疫后的30d、45d、60d、90d和120d以及150d，分別對(duì)試驗(yàn)的羊只進(jìn)行頸靜脈的采血處理，然后離心對(duì)血清進(jìn)行分離，在實(shí)驗(yàn)室中使用布病虎紅凝集試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)的方式，分別對(duì)試驗(yàn)羊的血清抗體水平進(jìn)行一定的檢驗(yàn)，具體的操作要按照相關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)來(lái)進(jìn)行[2]。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

本次試驗(yàn)采集的血清都是事先通過虎紅平板檢測(cè)的，除了對(duì)照組顯示的是陰性之外，剩余的各組都是陽(yáng)性。然后對(duì)各個(gè)組進(jìn)行試管凝集試驗(yàn)，對(duì)照組為陰性，其余組陽(yáng)性只數(shù)與虎紅平板結(jié)果數(shù)是保持一致的。

對(duì)經(jīng)過免疫的羊只在其30d、45d、60d、90d和120d以及150d進(jìn)行血清的采集，通過試管凝集實(shí)驗(yàn)可以對(duì)平均凝集效價(jià)進(jìn)行確定，然后進(jìn)行一定的對(duì)比之后可以發(fā)現(xiàn)，各個(gè)實(shí)驗(yàn)組的抗體活性率都在面以后的30d之后達(dá)到了頂峰，其中B組的抗體升得最快，且血清抗體也比較高，可以如表1所示：

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，實(shí)驗(yàn)最開始是采用的是虎紅平板對(duì)所有未免疫的羊只進(jìn)行檢測(cè)，這樣的結(jié)果就是全部為陰性，然后通過試管凝集實(shí)驗(yàn)進(jìn)行復(fù)檢，結(jié)果具有一致性。因?yàn)榛⒓t平板實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果判定更具有主觀性，因此需要結(jié)合虎紅平板的初檢和試管凝集實(shí)驗(yàn)的再次檢驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果主要是以試管凝集試驗(yàn)結(jié)果為主。對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析之后可以發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)羊使用滴眼免疫效率為84%，而使用注射器進(jìn)行灌服免疫的有效率為92%，直接將布病疫苗加水讓牛羊自由飲水的免疫方式的有效率在68%，而且對(duì)不同時(shí)期的平均凝集效價(jià)進(jìn)行觀察也可以看出，灌服免疫的平均凝集效價(jià)組稿，這就說(shuō)明采用一次性注射微進(jìn)行灌服免疫的效果為最佳，在人力允許的情況下可以進(jìn)行廣泛的使用。對(duì)于一次性注射器灌服免疫來(lái)說(shuō)，它最大的優(yōu)點(diǎn)就是可以減少不必要的浪費(fèi)現(xiàn)象，而且采用的是人工保定的方式，單只灌服，能夠讓的免疫動(dòng)物不出現(xiàn)漏免的情況，同時(shí)還能避免因?yàn)橐呙绶貌痪獾膯栴}而出現(xiàn)免疫效果的不同，同時(shí)在進(jìn)行免疫之后還能對(duì)注射器進(jìn)行集中規(guī)范的處理，避免布魯氏菌病疫苗對(duì)于環(huán)境的影響，能夠在最大程度上對(duì)人畜安全進(jìn)行有效保證。