不同檢測方法在EDTA依賴性假性血小板減少癥中的應(yīng)用效果比較

劉詠菊1 陳煒璽2

（1武警山西總隊醫(yī)院檢驗科，山西 太原 030006；2太原市中心醫(yī)院檢驗科，山西 太原 030006）

血常規(guī)檢查是臨床疾病診斷及療效評估的一項常見輔助手段，可讓醫(yī)師了解到患者血清中血細(xì)胞狀態(tài)、血細(xì)胞數(shù)量以及血小板計數(shù)等情況。其中，血小板計數(shù)檢測結(jié)果是臨床診斷止血性、血栓性疾病的主要依據(jù)。因此，準(zhǔn)確檢測血小板計數(shù)具有重要的意義。然而，在實際工作中我們可以發(fā)現(xiàn)，乙二胺四乙酸（EDTA）可使血液中血小板發(fā)生凝集，導(dǎo)致假性血小板減少現(xiàn)象，引起疾病誤診誤治[1]。為避免患者進(jìn)行不必要的檢查，尋找一種有效、準(zhǔn)確的檢測方法以對EDTA依賴性血小板減少癥進(jìn)行排查十分有必要。為此，本研究將對比手工草酸銨法、全血細(xì)胞分析法、儀器間接稀釋法在EDTA-PTCP檢測中的應(yīng)用效果，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集2016年3月至2018年3月到我院就診的37例EDTAPTCP患者的全血樣本作為實驗對象，其中有17例女性、20例男性，年齡19～52歲，平均年齡（43.82±5.39）歲。上述患者在血常規(guī)檢查中可見其血小板計數(shù)顯著減少，但血紅蛋白、白細(xì)胞計數(shù)以及肝腎功能、凝血功能檢查結(jié)果均正常，無出血傾向，最后經(jīng)外周血涂片檢查證實為EDTA-PTCP。

1.2 方法

1.2.1 試劑和儀器：日本希森美康（sysmex XT-1800i）全自動血液分析儀及其配套試劑、質(zhì)控品；1%草酸銨稀釋液（為我科檢測人員依據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》中的步驟自行配制）；采血管為EDTA-K2抗凝試管（美國BD公司）；日本奧林巴斯雙目顯微鏡。

1.2.2 檢測方法：①手工草酸銨法：抽取37例患者的肘靜脈血2 mL。在不同時間點(diǎn)5、10、20、30、60、120 min取適量血樣本將其置于0.38 mL的1%草酸銨稀釋液（不含EDTA）中，待其充分混勻后，放置在計數(shù)池內(nèi)，靜置10～15 min，待血小板完全下沉后，在1 h內(nèi)用顯微鏡進(jìn)行血小板計數(shù)。②全血細(xì)胞分析法：抽取37例患者的肘靜脈血2 mL，置于含有乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）的抗凝試管中并搖勻，在采集的2 h內(nèi)用sysmex-1000i全自動血液分析儀測定采集后5、10、20、30、60、120 min不同時間點(diǎn)的血小板計數(shù)水平。③儀器間接稀釋法：抽取患者的肘靜脈血2 mL于含有EDTA-K2的抗凝試管中，并在采集后不同時間點(diǎn)（5、10、20、30、60、120 min）吸取20 μL血樣本，并將其加入到血細(xì)胞分析儀稀釋液中，混勻，最后用sysmex-1000i全自動血液分析儀測定血小板計數(shù)水平。觀察上述3中檢測方法不同時間點(diǎn)（5、10、20、30、60、120 min）測定血小板計數(shù)的差異。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法：選用SPSS24.0軟件，計數(shù)數(shù)據(jù)以率（%）形式表示，用χ2檢驗；計量數(shù)據(jù)以（±s）表示，兩組組間比較用獨(dú)立樣本t檢驗，多組樣本比較則使用方差分析。P＜0.05，表示差異具統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

采集5 min內(nèi)，手工草酸銨法檢測未完成，無血小板計數(shù)結(jié)果，而全血細(xì)胞分析法和儀器間接稀釋法檢測的血小板計數(shù)結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；但在采集后10、20、30、60、120 min進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)，全血細(xì)胞分析法檢測的血小板計數(shù)結(jié)果明顯少于采集5 min，且與手工草酸銨法、儀器間接稀釋法有顯著性差異（P＜0.05）；手工草酸銨法與儀器間接稀釋法的血小板計數(shù)結(jié)果比較差異不明顯（P＞0.05），見表1。

表1 三種檢測方法復(fù)檢血小板的結(jié)果比較（±s，×109/L）

表1 三種檢測方法復(fù)檢血小板的結(jié)果比較（±s，×109/L）

注：與全血細(xì)胞分析法比較，*P＜0.05

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3 討 論

EDTA-PTCP主要是發(fā)生在體外且因使用EDTA抗凝劑而引起的血小板假性減少的現(xiàn)象，其本身不具有病理性意義，但也有可能見于某些嚴(yán)重性病癥中，如免疫系統(tǒng)疾病、癌癥等。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示[2]，在我國EDTA-PTCP的發(fā)生率占0.08%～0.25%，而且隨著EDTA抗凝劑的應(yīng)用越來越廣泛，其發(fā)生率呈逐年上升的趨勢。因此臨床對于EDTAPTCP的診治必須加以重視。目前臨床對于初步懷疑EDTA-PTCP的患者，均需重新檢測。本研究為提高EDTA-PTCP檢測的準(zhǔn)確性，探析手工草酸銨法、全血細(xì)胞分析法、儀器間接稀釋法的檢測效果，結(jié)果顯示，采集5 min內(nèi)，手工草酸銨法難以完成檢查，而全血細(xì)胞分析法和儀器間接稀釋法檢測血小板計數(shù)結(jié)果差異不明顯（P＞0.05），但在采集后10、20、30、60、120 min全血細(xì)胞分析法檢測的血小板計數(shù)結(jié)果明顯少于手工草酸銨法、儀器間接稀釋法（P＜0.05），且手工草酸銨法與儀器間接稀釋法的檢測結(jié)果的差異不顯著，與查有艷[3]的研究報道基本相符，提示三種檢測方法中，在采血后5min內(nèi)應(yīng)用儀器間接稀釋法復(fù)查EDTA-PTCP的準(zhǔn)確性較高。綜上所述，手工草酸銨法、儀器間接稀釋法檢測EDTA-PTCP效果相當(dāng)，均優(yōu)于全血細(xì)胞分析法，但儀器間接稀釋法操作簡單，能夠有效縮短檢測時間，降低實驗室成本，可將其作為本病檢測的常用手段之一。