不同培養基對非洲紫羅蘭組培苗生長及生根的影響

岑忠用　蘇江　謝彥軍　 鄧晰朝 　高麗霞

摘要 ? ?本文以非洲紫羅蘭上部嫩葉或側芽嫩葉誘導得到的無菌材料進行繼代培養和壯苗生根培養，探討外源激素對其不定芽分化、繼代增殖與不定根形成的影響，以期篩選出適宜的激素水平范圍，優化非洲紫羅蘭組織培養體系，提高其植株再生率。結果表明，不同配方的繼代培養基和生根培養基均對非洲紫羅蘭組培苗的植株高度、葉數、不定根數、葉綠素含量有一定的影響，增殖培養基1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L對非洲紫羅蘭增殖生長效果最好;生根培養基1/2 MS+NAA 0.05 mg/L+3%蔗糖對非洲紫羅蘭的壯苗生根促進作用最明顯。

關鍵詞 ? ?非洲紫羅蘭;培養基;組織培養;形態學指標;葉綠素

中圖分類號 ? ?S681.2 ? ? ? ?文獻標識碼 ? ?A

文章編號 ? 1007-5739（2019）13-0122-03 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 開放科學（資源服務）標識碼（OSID）

Effects ?of ?Different ?Medium ?on ?Growth ?and ?Rooting ?of ?Saintpaulia ?ionantha ?Tissue ?Culture ?Seedlings

CEN Zhong-yong ? ?SU Jiang ? ?XIE Yan-jun ? ?DENG Xi-chao ? ?GAO Li-xia

（School of Chemistry and Biological Engineering，Hechi University，Yizhou Guangxi 546300 ）

Abstract ? ?The paper subcultured and rooted the aseptic materials induced by the upper leaves or buds leaves of Saintpaulia ionantha，discussed the effects of exogenous hormones on the differentiation of adventitious buds and subculture multiplication and adventitious root initiation，in order to screen the suitable range of hormone levels，optimize the tissue culture system of Saintpaulia ionantha and improve the plant regeneration rate.The results showed that different subculture medium formulas and rooting medium formulas had certain effects on plant height，leaf number，adventitious root number and chlorophyll content of Saintpaulia ionantha tissue culture seedlings.The proliferation medium 1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L was best for the proliferation of Saintpaulia ionantha，the rooting medium 1/2 MS+NAA 0.05 mg/L+3% cane sugar had the most obvious effect on the rooting of Saintpaulia ionantha.

Key words ? ?Saintpaulia ionantha;medium;tissue culture;morphological index;chlorophyll

非洲紫羅蘭（Saintpaulia ionantha），是苦苣苔科非洲紫羅蘭屬多年生常綠草本花卉，原產于非洲東部熱帶的坦桑尼亞，因花容酷似紫羅蘭而得名[1]。其又名非洲堇、圣保羅花，因花色艷麗、品種繁多、具有極高的觀賞價值，有“室內花卉皇后”的美譽[2]。非洲紫羅蘭品種繁多，園藝品種逾2 000個;花形花色變化大，花色艷麗，有藍色、粉紅色、紅色、紫色、磚紅色、綠色及白色等不同色系。非洲紫羅蘭性喜半陰、溫暖、濕潤環境，生長適宜溫度為18～26 ℃，花期每次1～2個月;適宜在室內窗邊生長，不僅養護容易，而且花期很長，只要護理得當，在室溫 18～23 ℃范圍內都能開花，在許多國家已成為大多數家庭室內盆栽的常見植物[3]。非洲紫羅蘭株高一般為15～30 cm，全株表面長有絨毛;葉片基生，卵圓形或長圓狀心形，長6～7 cm，肉質，全緣，先端鈍;葉面暗綠色，葉背淺綠色，略帶紅暈;總狀花序，花序梗較長，高出葉叢;花單生或聚生，花徑2.0～3.5 cm，二唇狀，上唇2裂，下唇3裂，裂片橢圓形，蒴果有毛[4]。常規繁殖方法包括莖插、葉插和種子繁殖，這些方法受繁殖材料及場地的限制，繁殖速度較慢，很難進行大批量生產，短期內難以生產大量種苗滿足市場需求[5]。采用組培快繁技術進行非洲紫羅蘭快速繁殖，可縮短繁育周期，獲得大量成株并保持其優良性狀，是解決該矛盾的有效途徑之一[6]。

本試驗主要研究非洲紫羅蘭上部嫩葉或側芽嫩葉誘導得到的組培苗在繼代培養階段葉綠素含量以及在壯苗生根培養階段生根能力等生理特性的變化，旨在篩選出最佳激素配比的培養基，比較不同水平下激素對非洲紫羅蘭的生長及增殖效果，從而優化非洲紫羅蘭組織培養體系，提高其植株再生率，為規模化生產提供參考。

1 ? ?材料與方法

1.1 ? ?試驗材料

試驗材料為正常生長的非洲紫羅蘭上部嫩葉或側芽嫩葉誘導得到的無菌材料，基本培養基為MS培養基。

1.2 ? ?試驗方法

將非洲紫羅蘭上部嫩葉或者側芽嫩葉誘導得到的無菌材料分別接于以下6種增殖培養基進行繼代增殖培養：①MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;②MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L;③MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L;④1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;⑤1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L;⑥1/2 MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L。對增殖得到的鱗莖進行生根培養，在壯苗生根培養階段采用以下6種生根培養基進行培養：⑦1/2 MS+NAA 0.05 mg/L+3%蔗糖;⑧1/2 MS+IBA 0.2 mg/L+3%蔗糖;⑨1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+3%蔗糖;⑩1/2 MS+NAA 0.05 mg/L+1%蔗糖;{11}1/2 MS+IBA 0.2 mg/L+1%蔗糖;{12}1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+1%蔗糖。置于溫度（25±2）℃、光照1 200 lx、16 h/d條件下培養，并進行不定期觀察，記錄其發根時間，待各處理中的植株都有明顯的變化即可進行株高、葉數等形態學指標及葉綠素含量的測量。繼代增殖培養40 d后，分別測定其葉片的葉綠素含量;壯苗生根培養44 d后，分別測定其葉片的葉綠素含量。葉數、根數為肉眼直接觀察，株高用直尺測量，葉綠素含量的測定參照張憲政主編的《作物生理研究法》[7]中的丙酮乙醇混合法。

2 ? ?結果與分析

2.1 ? ?不同培養基對非洲紫羅蘭形態學指標的影響

2.1.1 ? ?繼代增殖階段。由表1可知，在繼代增殖培養43 d后，⑤號培養基的非洲紫羅蘭各項形態學指標最高，其中平均葉數達5.35張，平均株高則有0.570 cm，平均根數有2.15條，葉片嫩綠，不定根細長;④號培養基次之，但是生根能力比⑤號培養基好，平均根數達到了2.60條;①號培養基平均葉數和平均株高處于中等狀態，但是生根能力較差，僅有1.45條;③號培養基和⑥號培養基中平均葉數和平均株高相差不大，但⑥號培養基的生根能力在6種培養基中最好，達到了3.3條;②號培養基在本階段各形態指標均最低，平均株高只有0.360 cm，平均根數僅有1.10條。培養74 d以后發現，各種培養基的平均葉數與前一階段的平均葉數相差不大，②號培養基相差了1.10張，其他都在 1張以內。②號培養基的另外2個指標也有相當大的增長，平均根數由1.10條變為3.70條。④號培養基在本階段形態學指標最高，平均株高為0.730 cm，平均根數為7.35條，但在培養過程中植株伴有少量黃葉。⑤號培養基的各項指標增長不大。培養90 d后，各培養基的各項指標都有明顯的增長，如②號培養基平均葉數和平均根數均處于中等水平，而平均株高卻達到了1.345 cm（在本階段里面最高）;⑥號培養基的平均葉數和平均株高處于中等水平，但不定根平均達到9.40條（在6種培養基中最高）且在培養過程中葉片呈深墨綠色、較厚硬。綜合來講，④號培養基是最適的繼代增殖培養基，平均葉數為8.35張，平均株高為 0.930 cm，根數平均達到9.20條，3項指標均為中上程度。

2.1.2 ? ?壯苗生根培養階段。由表2可知，壯苗生根階段非洲紫羅蘭植株在⑦號培養基中發根時間最早，只需6 d，培養44 d后平均生根數達到8.866條，平均株高達到1.230 cm;⑧號培養基發根時間也相對較早，培養44 d后平均生根數為7.330條;⑨號培養基的發根時間與⑧號培養基相同，但培養44 d后平均發根數較⑧號培養基略多，為7.866條;⑩號培養基的發根時間最遲，需要11 d才開始發根，且平均生根數為同一時期內各培養基最低（僅5.933條）;{11}號培養基的發根時間也較早，需7 d，其平均生根數為同期第二，達8.133條;{12}號培養基的發根時間同⑧號、⑨號培養基，但其平均生根數較⑧號、⑨號培養基少，僅為6.200條。在培養44 d后平均根長最長的是⑨號培養基的植株，平均根長達到了1.120 cm;最短的是{12}號培養基中的植株，平均根長僅為0.613 cm。培養64 d后可以看到各個培養基的平均生根數除{11}號培養基外都有明顯提升，以⑨號培養基的最為明顯（達到了9.733條），甚至超過了第1階段平均生根數最多的⑦號培養基，而且其平均根長也為同期最長（達1.006 cm）;而{11}號培養基的平均生根數雖然呈下降趨勢但從總體上看是保持在一個平穩的生長速度，但其平均根長明顯下降（從1.006 cm下降到了0.726 cm），結合其生長狀況（葉片卷曲，顏色較其他深、呈墨綠色，且根少較短），推測原因可能為非洲紫羅蘭在該培養基生長過程中發生了變異;⑧號培養基同{11}號培養基一樣，平均根長由原來的0.986 cm降到了0.473 cm。在培養84 d時，各個培養基的平均生根數達到了3個階段的最大值，⑧號、⑨號、⑩號、{12}號培養基的平均生根數都達到了10條以上;⑦號培養基則處于一個相對較平穩的狀態，沒有明顯的下降;{11}號培養基則有明顯的增長趨勢。就平均根長來說，培養84 d時，⑦號培養基的平均根長最長，長達1.733 cm，較其在第2階段的平均根長有非常明顯的增長，增長了近1 cm。綜合3個培養時間段非洲紫羅蘭形態學指標數據可以看出，⑦號培養基在發根時間、平均生根數和平均根長3個方面都有優勢，雖然其變化趨勢不是規律的線性變化，但與其他培養基相比，⑦號培養基的生根效果較好。