某地區漢族人乙醛脫氫酶2基因Glu504Lys位點多態性與飲酒習慣的關系

杜 波 安敬威

（1 阜新市疾病預防控制中心，遼寧 阜新 123000；2 阜新市北控水務有限公司，遼寧 阜新 123000）

人體內的乙醛脫氫酶2（aldehyde dehydrogenase，ALDH2）的主要功能是將人攝入的乙醇所產生的有毒的乙醛代謝為無毒的乙酸，從而起到解毒的作用。然而由于其第12外顯子基因G替換為A，從而使野生型ALDH2失去活性。遼寧阜新地區處于半農半牧地區，過量飲酒產生的相關疾病在當地比較嚴重。本研究考察阜新地區漢族ALDH2基因多態性以及ALDH2基因型與飲酒習慣的關系，我們對遼寧阜新地區322例正常漢族人進行了檢測，對提高居民健康水平，預防因飲酒過量相關疾病提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 研究對象：遼寧阜新地區隨機抽取322例漢族人群，年齡20～65歲，平均年齡為（40.51±12.53）歲。其中男性志愿者139例，平均年齡為（42.09±10.84）歲]，女性志愿者183人，平均年齡為（37.62±18.17）歲。

1.2 血樣采集：全血樣品采集，采用真空枸椽酸鈉抗凝采血管采集靜脈血5 mL，采樣后立即-80 ℃保存。

1.3 基因多態性檢測

1.3.1 人基因組DNA提取：利用硅膜柱吸附法提取人基因組DNA，提取后的DNA用紫外分光光度法測定濃度后-80 ℃保存。

1.3.2 ALDH2基因擴增：應用PCR技術，擴增人ALDH2基因，引物序列為：ALDH24F 5'-GTCAACTGCTATGATGTGTTTGG-3'，ALDH24R 5'-CCACCAGCAGACCCTCAAG-3'。目的片段為173 bp。PCR擴增體系為50 μL，50 μL PCR體系含有：內含5 μL 10×緩沖液，2 μL模板DNA，0.5 μmol/L引物，0.25 mmol/L dNTP，2.5 mmol/L MgCl2，2 IUTaq酶。擴增后取PCR產物5 μL，2%瓊脂糖凝膠電泳1.2 h后紫外下觀察電泳條帶。

1.3.3 飲酒行為相關流調：調查主要內容有：每次飲酒體積（mL），酒品類型（白酒、紅酒、啤酒）、飲用頻率（次/月），本研究中定義飲用轉化為純乙醇＞600 mL/月為飲酒組。

1.4 統計分析：實驗數據采用SPSS16.0軟件進行分析，計數數據比較采用χ2檢驗，P<0.05認為差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 322例志愿者ALDH2基因變異情況：322例志愿者中，共檢出3種基因型，分別為野生純合型ALDH2*1/*1 211例，突變雜合型ALDH2*1/*2 78例，突變純合型ALDH2*2/*2 33例；ALDH2*1基因頻率為0.776，ALDH2*2基因頻率為0.224，ALDH2基因頻率符合Hardy-Weinberg平衡。

2.2 飲酒組和非飲酒組基因型頻率和等位基因頻率的比較：飲酒組的野生純合ALDH2*1/*1基因型比例高于非飲酒組，但差異沒有統計學意義（67.2%比64.3%，χ2=6.71，P=0.106）；飲酒組的ALDH2等位基因*1 基因頻率高于非飲酒組，但差異沒有統計學意義（0.671比0.882，χ2=2.090，P=0.159）。見表1。

2.3 男性飲酒組和非飲酒組基因型頻率和等位基因頻率的比較：對于322例志愿者，其中男性139例，對139例男性志愿者分析，男性飲酒組的野生純合ALDH2*1/*1基因型比例高于非飲酒組，但差異沒有統計學意義（57.6%比66.0%，χ2=0.976，P=0.447）；飲酒組的ALDH2等位基因*1基因頻率高于非飲酒組，但差異沒有統計學意義（0.489比0.266，χ2=2.051，P=0.164）。

2.4 女性飲酒組和非飲酒組基因型頻率和等位基因頻率的比較：對于322例志愿者，分析其中女性志愿者共183例，女性飲酒組的野生純合ALDH2*1/*1基因型比例顯著高于非飲酒組，差異具有統計學意義（86.7%比63.8%，χ2=0.617，P=0.022）；飲酒組的ALDH2等位基因*1基因頻率顯著高于非飲酒組，差異具有統計學意義（0.224比0.574，χ2=5.707，P=0.019）。

3 討 論

本研究發現，遼寧阜新地區漢族族人中ALDH2基因突變頻率（34.5%）低于中國南方人群（47.3%）[1]。統計顯示，ALDH2基因第487位的GA位點突變率存在明顯的地域差異[2]。普遍規律為中國南方人群等位基因頻率高于北方地區，本研究結果顯示，遼寧阜新地區等位基因*2基因頻率為0.224，低于中國南方地區，這與其他研究結果相似。乙醇在體內代謝需要乙醛代謝為乙酸的關鍵酶——乙醛脫氫酶，此酶將有毒的乙醛代謝為乙酸，從而起到解酒的作用。此酶由ALDH2基因編碼，之前研究顯示[2]，ALDH2基因第487位的GA位點容易發生突變，導致乙醛脫氫酶的失活。

WHO建議，成年男子每日飲酒量（折合成純乙醇）不能超過25 mL，成年女性每日飲酒量（折合成純乙醇）不能超過15 mL，突變型人群飲酒后由于酶的活性缺失，導致體內游離的乙醛無法代謝，使此類人群在即使很少量飲酒后，就會出現臉紅、頭暈、惡心等酒精中毒癥狀，這在客觀上限制了基因突變型人群的飲酒量，但如果此類人群認為“酒量是練出來的”，這將對其機體產生巨大傷害。所以，基因突變型人群不適合按照WHO建議的普通人每日飲酒量飲酒，否則此類人群將出現酒精中毒，進一步引起酒精性肝病、心血管疾病等飲酒相關疾病。相關研究顯示[3]，日本人、中國南方人和中國北方人ALDH2基因突變型分別為49.1%、42.5%和36%，這與我們在的研究結果（34.5%）是相一致的。

表2 飲酒組和非飲酒組基因型頻率和等位基因頻率比較

本研究結果顯示，322例志愿者中，飲酒組和非飲酒組ALDH2基因突變型比例并沒有顯著差異，但對322例志愿者中的183例女性亞組分析顯示，女性非飲酒組的突變型比例顯著低于飲酒組，差異具有統計學意義，其原因可能為，女性人群更注重身體健康，對飲酒引起的不是癥狀更為關注。對于119例男性志愿者，46.2%的男性志愿者為ALDH2基因突變型，但其飲酒量與野生型無顯著差異，這可能與男性志愿者的飲酒行為受到社會文化等環境因素影響有關，這說明，對于男性ALDH2基因突變型人群，更應該加強此類人群的飲酒行為的健康干預和健康指導。