外周血白細胞VCS參數在老年細菌性肺炎診斷中的應用價值

朱琳超 俞穎 汪浙炯

肺炎是指由細菌、真菌、支原體、衣原體等病原微生物，以及放射線、藥物過敏、免疫損傷等因素導致終末氣道、肺泡及肺間質引起的炎癥，其中最常見是細菌感染引起的細菌性肺炎[1]。老年人肺部細菌感染是主要死亡原因之一[2]。老年肺部感染患者的臨床癥狀不典型，而且大部分患者WBC并不升高，易誤診、漏診，影響及時治療[3]。因此，早期、及時對老年細菌性肺炎患者進行診斷與鑒別至關重要。VCS激光散射技術是血細胞分析儀對WBC進行分類的方法，以電阻抗原理檢測容量（volume，V）反映細胞體積，以高頻探針檢測電導（conductivity，C）反映細胞核內部結構，以激光檢測光散射（scatter，S）反映細胞質內顆粒特性，對WBC在接近原始狀態下進行分析，除了檢測常規血細胞參數外，還能提供定量的WBC體積、傳導率、激光散射率等VCS參數，在一定程度上能反映WBC的形態特征和內部結構[4-5]，這些參數是直接測得的電子信號，沒有單位[6]。有報道在感染性疾病中VCS參數能反映中性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞的形態學改變[7-8]。本研究通過觀察細菌性肺炎患者中性粒細胞和淋巴細胞VCS參數變化，找出對疾病診斷有幫助的參數，旨在發現對老年細菌性肺炎有診斷價值的生物標志物。

1 對象和方法

1.1 對象 收集2016年1月至2018年2月我院收治的細菌性肺炎老年患者300例（平均年齡＞60歲），男140 例，女 160 例，年齡 61～84（73.5±8.7）歲，其中年齡70歲以上的患者占85%。所有患者根據臨床癥狀、體征、病原學及胸部X線等檢查明確診斷為細菌性肺炎，于入院24h內檢測血常規和C反應蛋白（C-reaction protein，CRP），根據WBC水平分為 WBC≥10×109/L肺炎組134例和WBC＜10×109/L肺炎組166例；另選取同期本院健康體檢者220例作為健康對照組，男100例，女 120 例，年齡 60～75（68.3±7.9）歲。臨床和實驗室檢查排除感染性疾病、糖尿病、晚期腫瘤、使用激素和免疫抑制劑等因素，WBC和分類在正常范圍內。肺炎組和健康對照組性別、年齡比較差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究經我院倫理委員會批準，所有患者均知情同意。

1.2 方法 采用乙二胺四乙酸二鉀抗凝的非可替真空采血管于早上9:00前空腹采集2ml靜脈血，采用Beckman-Coulter Gen.S LH780全自動分析儀檢測外周血WBC VCS參數，于2h內完成檢測，收集中性粒細胞平均體積（neutrophils volume，NV）、中性粒細胞平均傳導率（neutrophils conductivity，NC）、中性粒細胞平均激光散射率（neutrophils light scatter，NS）、淋巴細胞平均體積（lymphocyte volume，LV）、淋巴細胞平均傳導率（lymphocyte conductivity，LC）、淋巴細胞平均激光散射率（lymphocyte light scatter，LS），以及各自平均分布寬度（NV-SD、NC-SD、NS-SD、LV-SD、LC-SD、LS-SD）。

1.3 統計學處理 采用SPSS 16.0統計軟件。正態分布的計量資料以表示，多組間比較采用單因素方差分析，方差齊性時兩兩比較采用LSD-t法，方差不齊性時兩兩比較采用Tamhane法。VCS參數與CRP的相關性分析采用Person相關。繪制ROC曲線評價各個指標對細菌性肺炎的診斷價值。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 肺炎患者與健康對照者中性粒細胞VCS參數的比較 WBC≥10×109/L肺炎組和WBC＜10×109/L肺炎組NV、NV-SD均明顯高于健康對照組，NC明顯低于健康對照組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）；WBC≥10×109/L肺炎組NV、NV-SD高于WBC＜10×109/L肺炎組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）；3 組間 NS、NC-SD、NS-SD比較差異均無統計學意義（均P＞0.05）；見表1。2.2 肺炎患者與健康對照者淋巴細胞VCS參數的比較WBC≥10×109/L肺炎組和WBC＜10×109/L肺炎組LV、LV-SD、LS-SD均明顯高于健康對照組，LC明顯低于健康對照組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）；3組間LS、LC-SD比較差異均無統計學意義（均P＞0.05）。WBC≥10×109/L肺炎組與WBC＜10×109/L肺炎組淋巴細胞各項VCS參數比較差異均無統計學意義（均P＞0.05）；見表 2。

2.3 肺炎患者中性粒細胞和淋巴細胞VCS參數與CRP的相關性 肺炎患者NV-SD、LV-SD與CRP均呈正相關（r=0.319、0.350，均P＜0.05），其余均無相關性，見表3。

表1 肺炎患者與健康對照者中性粒細胞VCS參數結果的比較

表2 肺炎患者與健康對照者淋巴細胞VCS參數結果的比較

表3 肺炎患者VCS參數與CRP之間的相關性

2.4 肺炎患者VCS參數的ROC曲線分析 繪制肺炎患者與健康對照組比較有統計學差異的VCS參數（NV、NC、NV-SD、LV、LC、LV-SD） 的 ROC 曲線。根據AUC可以得出NV、NV-SD、LV、LV-SD對于肺炎的診斷效能較好，其中NV-SD診斷價值最好。見圖1和表4。

圖1 肺炎患者NV、NC、NV-SD、LV、LC、LV-SD診斷的ROC曲線

表4 肺炎患者NV、NV-SD、LV、LV-SD的AUC、靈敏度、特異度和cut-off值

3 討論

細菌感染機體后，WBC作為機體免疫系統的一道重要防線，除數量發生變化外，其形態也伴隨著改變，如中性粒細胞核左移、中毒顆粒、空泡、包涵體，淋巴細胞體積變化、核染色質疏松等，均有助于診斷細菌感染[9-10]。血常規WBC和中性粒細胞升高是判斷細菌性感染的常用指標之一，但易受患者年齡、時間、運動、情緒、月經、妊娠等生理因素影響[11]。因此尋找一種或幾種在細菌性肺炎時能反應WBC形態學改變的指標，將對疾病的早期診斷和及時治療具有重要臨床意義，VCS技術與傳統手工形態學檢查相比，具有快速、準確、客觀等優點。

研究顯示典型的細菌性肺炎患者常有WBC升高[12]，但有一部分細菌性肺炎患者WBC并不升高，這與本次實驗結果一致，46%細菌性肺炎患者WBC增高，而54%的患者WBC無明顯變化。此外，血液病、惡性腫瘤、酒精中毒、服用兒茶酚胺類藥物或某些抗生素等，均可影響炎癥反應時WBC的變化。因此，影響WBC的因素較多，以它作為細菌感染的診斷指標有一定的局限性。而VCS參數能具體反映細胞內部的變化，比細胞計數更加敏感和特異。張靈玲等[13]研究發現，細菌感染患者中性粒細胞VCS參數有統計學差異，并且差異不受性別的影響。本研究分析300例細菌性肺炎患者中性粒細胞和淋巴細胞VCS參數，發現NV、NV-SD、LV、LV-SD顯著升高，說明細菌性肺炎患者中性粒細胞和淋巴細胞體積增大，體積差異性大。因為細菌感染時，中性粒細胞具有趨化運動和吞噬殺傷作用，出現核左移、吞噬細菌、空泡變性、包涵體、中毒顆粒等，引起中性粒細胞體積變化，VCS參數中的NV、NV-SD可以定量地檢測細胞體積的變化；淋巴細胞的數量在細菌感染時一般會受到抑制，但影響因素較多，VCS參數中的LV、LV-SD可以較直觀的反應細胞體積的變化。通過比較WBC≥10×109/L肺炎組和WBC＜10×109/L肺炎組，可以發現細菌性肺炎患者WBC不一定升高，但NV、NV-SD、LV、LV-SD有顯著性升高，說明中性粒細胞和淋巴細胞體積的變化比數量變化更加靈敏，有利于疾病的早期診斷。VCS與CRP相關性分析，發現NV-SD和LV-SD與CRP呈正相關，ROC曲線分析可以看出，用于指示細菌性肺炎最佳的指標是NV-SD，其靈敏度和特異度為0.839和0.882；其次是 LV-SD，其靈敏度和特異度為 0.857 和0.676；再次是NV和LV，因此提示NV-SD和LV-SD與CRP聯合觀察可以更好的提示細菌性肺炎。Zhou等[14]研究細菌感染的腫瘤患者外周血白細胞VCS參數發現NV、MS、LV、LS和NV-SD聯合診斷價值較高，靈敏度和特異度可達 0.758 和 0.6472。

綜上所述，中性粒細胞和淋巴細胞VCS參數能較好的反應細菌性肺炎時白細胞的形態學變化，對臨床診斷具有參考價值。而且VCS參數來源于血常規分析，不需要額外檢測，具有快速、經濟、簡便等優點，是一種新的診斷細菌感染的實驗室指標。