β族鏈球菌檢測方法的對比評價

辛潔，魏文婷，楊利鑫

（空軍航空醫學研究所附屬醫院 檢驗科，北京 100089）

0 引言

β族鏈球菌又名無乳鏈球菌（GBS），是一種革蘭氏陽性球菌和條件致病菌，是孕婦圍產期感染和新生兒感染的重要病原菌。孕婦圍產期感染GBS可致胎膜早破、早產、流產、產褥感染，并可導致新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥等[1]。因此，臨床實驗室必須加強對圍產期孕婦GBS篩查工作。本研究旨在通過對GBS的細菌培養法、免疫法和PCR法的五種檢測方法進行評估，為快速、準確地鑒定GBS感染診斷提供依據。

1 材料和方法

1.1 材料

（1）研究對象：我院2016年6月至12月的門診妊娠34-37周的孕婦200例（均為初產婦），孕周均通過B超和末次月經時間核查確認，近期無感染性疾病及抗菌藥物使用史。標本為同時采集5份生殖-直腸分泌物。

（2）儀器與試劑PCR擴增儀，熒光PCR試劑盒為廈門泰普生物科學有限公司。西門子全自動微生物鑒定及藥敏分析系統及其配套革蘭氏陽性細菌鑒定卡，CO2培養箱，層析法試劑盒由珠海華澳科技提供。乳膠法試劑盒由北京金沃生物工程技術有限公司提供。

1.2 方法

（1）混合血瓊脂培養法：拭子在選擇增菌培養基（GBS增菌肉湯）增菌后轉種到血平板上，在37℃有氧條件下培養18-24小時，根據細菌的形態和溶血特性，及革蘭氏染色、Camp試驗及全自動微生物分析儀鑒定菌種。

（2）哥倫比亞血瓊脂培養法：在35℃、5%CO2條件下避光孵育18-24小時，對中小灰白，有β溶血，用革蘭氏染色和觸酶試驗篩選，用全自動微生物分析儀鑒定菌種。

（3）膠乳凝集法：使用吸附了抗GBS莢膜多糖的抗體的膠乳混懸液與檢測物中的GBS莢膜多糖抗原結合，形成免疫復合物的檢測方法。

（4）免疫層析法：利用針對GBS的特異性單克隆抗體-標記物和固相化多克隆抗體來檢測標本中的GBS。

（5）熒光PCR檢測法：按試劑盒規定提取拭子中的細菌DNA，在稀釋50倍后制成PCR檢測模板進行測定。

1.3 統計學處理

采用SPSS 20.0統計學軟件進行統計分析采用t檢驗，用計數資料采用χ2檢驗，用%表示，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

表1 五組檢測結果對比表

2.1 兩種細菌培養法陽性檢出率比較

200例標本增菌后轉種血瓊脂平板和哥倫比亞瓊脂平板培養后的檢出率分別為：4.5%（9/200）和5.0%（10/200），二者差異無統計學意義（P>0.05）。

2.2 兩種免疫學檢查法陽性檢出率比較

膠乳凝集法和免疫層析法檢出率分別為：5.0%（10/200）和5.5%（11/200），二者差異無統計學意義（P>0.05）。

2.3 PCR與細菌培養法、免疫學檢查法比較

PCR檢測陽性15例，陽性檢出率為7.5%，與兩種細菌培養法、兩種免疫學檢查法陽性檢出率比較差異均有統計學意義（P<0.05）。

3 結論

B族鏈球菌寄居腸道和直腸，一般正常健康人群感染后并不致病，是條件致病菌。而孕婦作為特殊人群感染后會導致不良妊娠結局，其中40%-70%可在分娩中傳遞給新生兒[2-3]，導致敗血癥。由于產婦B族鏈球菌感染時，臨床癥狀不夠明顯，從而易被忽視，因此產前孕婦進行B族鏈球菌的檢測是十分重要，檢測陽性者可通過藥物治療，改善妊娠結局，使新生兒及孕產婦的健康得以保障[4-6]。

細菌培養法陰性預測值和準確度較高，是國內大多數醫院采用的首選檢測法，但細菌培養陽性率易受外界條件影響，例如：臨床檢測準確、快速的要求。免疫學方法靈敏度高于細菌培養法，簡單實用且成本相對較低，是一種快速定性試驗，更適用于社區醫院快速檢測。熒光PCR技術是通過體外擴增獲得特定的DNA片段，其優點快速、靈敏、特異性準確性高，并且在檢測過程中可進行全程監控[7-9]，具有更高的臨床實用性和優越性。本次研究顯示：對200例孕婦B族鏈球菌檢測，PCR準確率為100%（15/15），比細菌培養法和免疫檢測法有明顯的優勢，差異有統計學意義（P<0.05）[10]。

綜上所述，熒光PCR法檢測孕婦B族鏈球菌具有靈敏、準確、快速、陽性檢出率高的特點，為更快速、準確的鑒定B族鏈球菌，合理應用抗菌藥物提供可靠的診斷依據。