索骨丹提取工藝及抗氧化活性研究進展

鄧佩穎　張韞　楊倩倩　周丹　王西玉　劉飛

【摘 要】索骨丹具有巖白菜素、蒽醌、黃酮、兒茶素等多種藥理活性成分，對止血、抗病毒、抗炎、甲狀腺腫、抗氧化等均有較好的藥理作用，具有較高的臨床意義。本文主要以相關研究的中外文獻為基礎，對索骨丹的巖白菜素、總蒽醌、脂肪酸、酚類的提取工藝和抗氧化活性進行總結，為相關的研究人員提供一定的參照。

【關鍵詞】索骨丹;提取工藝;抗氧化活性

中圖分類號： TQ461 文獻標識碼： A文章編號： 2095-2457（2019）10-0188-002

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2019.10.081

Research Progress on Extraction Process and Anti-oxidation Activity of Rodgersia aesculifolia

DENG Pei-ying ZHANG Yun* YANG Qian-qian ZHOU Dan WANG Xi-yu LIU Fei

（School of Pharmacy，Xian Medical University，Xian Shaanxi 710021，China）

【Abstract】Rodgersia aesculifolia has a variety of pharmacological active components，such as bergenin，anthraquinone， flavonoids，catechin and so on.It has good pharmacological effects on hemostasis，antivirus，anti-inflammation，goiter，anti-oxidation.and has high clinical significance.In this paper，the extraction technology and antioxidant activity of bergenin， total anthraquinone，fatty acid and phenols were summarized on the basis of related literatures at China and foreign countries，so as to provide some references for related researchers.

【Key words】Rodgersia aesculifolia;Extraction;Anti-oxidation

1 索骨丹簡介

索骨丹為虎耳草科鬼燈檗屬多年生草本植物，又名慕荷，鬼燈檗，黃藥子（陜西）等，現分布于陜西、甘肅、寧夏、四川等多省區。其根莖粗壯，橫生，通常以其根莖入藥。性平，味苦澀，具有涼血止血，消腫解毒以及廣譜抗病毒的功能。臨床上在治療甲狀腺，咽喉腫痛，外傷出血，子宮脫垂，腹瀉，痢疾等病癥均有較好的療效[1]。其化學成分有巖白菜素、蒽醌、脂肪酸、酚類、黃酮、兒茶素等[2]，目前，現研究報道多是針對索骨丹的抗炎活性及其化學成分，而關于索骨丹的抗氧化活性研究相對較少，故本文主要針對索骨丹的提取純化工藝和抗氧化活性進行如下綜述。

2 索骨丹的提取工藝

2.1 巖白菜素的提取工藝

2.1.1 高效液相色譜法

胥道寶等[3]通過高效液相色譜法來測定索骨丹根中巖白菜素的含量，色譜柱：Kromasil ODS C18柱（250×4.6mm，5μm），流動相為甲醇：水（20：80），流速1.0mL/min，檢測波長為275nm，柱溫為室溫。在此色譜條件下，巖白菜素的分離效果較好，回收率達98.4%。沈舒文等[4]同樣也建立HPLC法來測定索骨丹膠囊中巖白菜素的含量，但其色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠柱色譜柱（5μm，4.6×150mm），流動相甲醇：水=17：83，實驗結果顯示巖白菜素在0.48～2.88μg時，與所呈現的峰面積具有良好的線性關系，使得平均回收率達到98.4%。前者在實驗中提取溶劑采用80%甲醇，提取較為完全且雜峰較少，使得實驗更加可靠準確。而后者具有操作簡單，穩定性良好，重現性較高，空白陰性無干擾等特點。

2.1.2 超聲法（輔助乙醇）

王曉梅等[5]利用超聲對索骨丹中巖白菜素進行提取，考慮乙醇濃度，提取時間，溫度和料液比4個因素對巖白菜素提取率的影響，其中以提取溫度對巖白菜素提取產率影響最為顯著，最佳提取條件為50%乙醇，提取溫度60℃，料液比1：14（g/mL），提取時間50min，提取率為12.78mg/g。

2.2 總蒽醌的提取工藝

王曉梅等[6]利用超聲波輔助法來提取索骨丹中的總蒽醌，乙醇溶液作為提取溶劑，并對乙醇濃度，提取溫度，時間，料液比進行探究，得到較佳提取工藝：60%乙醇，溫度40℃，提取時間20min，料液比1：16，提取2次，總蒽醌得率1.85mg/g。在研究索骨丹總蒽醌和鞣質對細胞因子的影響[7]時，利用超聲波輔助法對總蒽醌和鞣質分別進行提取，以80%乙醇，溫度45℃，提取時間30min，料液比1：10的條件提取兩次得到總蒽醌，以95%乙醇，溫度50℃，提取時間40min，料液比1：20的條件提取兩次得鞣質。

2.3 脂肪酸的提取工藝

張辰露等[8]采用乙醚索氏抽提法，以10g索骨丹原材料在索氏提取器中利用無水乙醚，回流萃取6h，并濃縮干燥至恒重，從中藥材索骨丹中得到脂肪油0.1686g，得出索骨丹中脂肪酸含量為1.686%。

2.4 酚類的提取工藝

孫婷等[9]利用微波提取法對索骨丹中的總酚進行提取，探討乙醇提取濃度，超聲波提取功率，料液比和提取時間對索骨丹總酚提取率的影響，得到最佳提取工藝為提取功率600W、乙醇50%、提取時間6min、料液比 1∶30，提取率為8.61%。閔紅等[10]在單因素實驗的基礎上用正交試驗進行多酚類化合物提取工藝的優選，從而得到較佳的提取工藝：60%甲醇中性溶液，料液比1：10，連續回流提取3次，每次30min。經研究表明，該條件下提取率最高，總多酚含量可達28.32%，提取率可達98%以上。

3 抗氧化活性研究

閆夢茹等[12]通過DPPH自由基清除實驗發現，索骨丹乙醇提取物的石油醚相粗提物、乙酸乙酯相粗提物及甲醇相粗提物均表現出一定的抗氧化活性。與陽性對照Vc相比，乙酸乙酯相和甲醇相表現的抗氧化作用較明顯。經結構鑒定表明具有抗氧化活性的化合物為沒食子酸、兒茶素、異槲皮素苷。通過測試不同濃度沒食子酸、兒茶素、和異槲皮素苷三種化合物對DPPH自由基的清除率，結合IC50值來判斷其抗氧化活性，3個化合物的抗氧化強度分別為：沒食子酸>兒茶素>異槲皮素苷。

王曉梅等[13]通過索骨丹還原力的測定實驗得出索骨丹三種溶劑的提取物均具有較強的還原能力，還原力均隨著濃度的增加而增強，其中醋酸乙酯提取物的還原力最強，水提取物次之，乙醇提取物最弱;通過索骨丹提取物對亞鐵離子的螯合能力測定，得出醋酸乙酯提取物和水提物螯合能力接近，乙醇提取物在濃度大于1.2mg/ml后，隨濃度的增大螯合能力迅速增強。當濃度為1.8mg/ml時，螯合率達75%。通過探討索骨丹提取物的抗氧化作用及體外對乳腺癌細胞生長的影響[14]、自氧化方法測定索骨丹提取物對超氧陰離子的清除能力以及用MTT法測定索骨丹對乳腺癌細胞的影響系列實驗得出結論：索骨丹水提取物、索骨丹鞣質及蔥醌在濃度0.5～3.0mg/mL范圍內對超氧陰離子的抑制作用隨濃度的增加而增強;索骨丹乙酸乙酯提取物對乳腺癌細胞的生長在經過48h和72h作用后最大抑制率可達57.9%和67.7%。結果表明，索骨丹提取物具有強的抗氧化活性并對乳腺癌細胞的生長繁殖有較強的抑制作用。

4 結語

索骨丹是我國傳統中藥，其化學成分巖白菜素、蒽醌、沒食子酸、黃酮、兒茶素等，有較強的抗氧化活性，毒性反應少，藥用價值高，具有廣泛的開發前景。雖黃酮類，兒茶素具有多種生物活性，臨床上已用于治療多種疾病，但仍需優化提取工藝，提高提取速率。由于體內氧化活性的研究還尚不夠深入，值得科研人員和醫藥工作者對其進行更加合理的開采和深入的探究，為能在臨床上進一步發揮作用提供強有力的理論基礎，使未來索骨丹可以更加廣泛地應用于疾病的治療。

【參考文獻】

[1]《全國中草藥匯編》編寫組.全國中草藥匯編（上冊）-2版[M].北京：人民衛生出版社，1996：678.

[2]閆夢茹，馬養民，王健，等.索骨丹化學成分的研究[J].中國實驗方劑學雜志，2016，22（3）：36-39.

[3]胥道寶，張轉平，等.HPLC法測定索骨丹根中巖白菜素含量[J].西北藥學雜志，2007，22（1）：6-7.

[4]沈舒文，王永清，宇文亞，等.HPLC法測定索骨丹膠囊有效成分巖白菜素的研究[J].陜西中醫學院學報，2007，30（4）：70-71.

[5]王曉梅，鄭濤，張曉梅，等.超聲法提取索骨丹中巖白菜素的工藝研究[J].應用化工，2012，41（4）：631-632，636.

[6]王曉梅，趙巖，拓雨，等.索骨丹總蒽醌提取工藝的研究[J].化學工程師，2013，（8）：11-13.

[7]王曉梅，趙巖，樊曉娜，等.索骨丹總蒽醌和鞣質對細胞因子的影響[J].化學與生物工程，2014，31（3）：35-37.

[8]張辰露，吳三橋，秦文娟，等.GC-MS法分析中藥索骨丹中脂肪酸成分[J].中國實驗方劑學雜志，2012，18（3）：100.

[9]孫婷，姚佳，肖婭萍.七葉鬼燈檠總酚微波輔助提取工藝優化及其DPPH自由基清除能力分析[J].中成藥，2014，36（2）：409-412.

[10]閔紅，范智超，張志琪.七葉鬼燈檠中多酚類化合物提取工藝研究和含量測定[J].西北林學院學報，2007，22（3）：138. [11]閆夢茹，馬養民，羅國平，等.索骨丹抗氧化活性成分篩選[J].現代中藥研究與實踐，2017，31（5）：26-29.

[12]王曉梅，徐秋萍，成巧娜，等.索骨丹提取物抑制黃嘌呤氧化酶活性及抗氧化作用[J].時珍國醫國藥，2012，23（11）：2769-2770.

[13]王曉梅，趙衛星，韓曉東，等.索骨丹提取物抗氧化及對乳腺癌細胞的抑制作用[J].氨基酸和生物資源，2015，37（3）：33-35.