姜黃素-色氨酸共無定型的制備及其在大鼠體內的藥動學研究

陸佳璐 鄧麗娜

中圖分類號 R944.9;R965 文獻標志碼 A 文章編號 1001-0408（2019）17-2348-07

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.17.09

摘 要 目的：制備姜黃素（CUR）-色氨酸（TRY）共無定型（Co-amorphous CUR-TRY），并研究其在大鼠體內的藥動學特征。方法：采用球磨法制備Co-amorphous CUR-TRY;利用差示掃描量熱分析法和粉末X射線衍射法對Co-amorphous CUR-TRY進行表征分析，并于漏槽和非漏槽條件下比較Co-amorphous CUR-TRY、CUR原料藥、CUR-TRY物理混合物的體外溶出率（溶出度）。取18只SD大鼠，隨機分為Co-amorphous CUR-TRY組（155.43 mg/kg）、CUR原料藥組（100 mg/kg）、CUR-TRY物理混合物組（155.43 mg/kg），每組6只，灌胃給藥1次，于給藥后0.167、0.33、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、8、10、12、24 h從各組大鼠眼眶靜脈叢取血約0.3 mL，采用超高效液相色譜-串聯質譜法測定大鼠血漿中CUR的濃度，并應用DAS 3.0軟件進行藥動學研究。結果：差示掃描量熱分析和粉末X射線衍射結果表明成功制備Co-amorphous CUR-TRY。漏槽條件下（120 min時），與CUR原料藥[CUR累積溶出率為（36.79±3.79）%]和CUR-TRY物理混合物[CUR累積溶出率為（33.12±0.68）%]比較，Co-amorphous CUR-TRY中CUR的累積溶出率[（90.37±2.52）%]顯著提高（P<0.01）。非漏槽條件下，與CUR原料藥和CUR-TRY物理混合物比較，Co-amorphous CUR-TRY中CUR具有較高的溶出度，并且維持長時間的超飽和程度。藥動學實驗結果顯示，與CUR原料藥組和CUR-TRY物理混合物組比較，Co-amorphous CUR-TRY組cmax、AUC0-24 h、AUC0-∞顯著增加（P<0.01），CUR的相對生物利用度分別提高了2.14、1.86倍（P<0.01）。結論：本研究制備的Co-amorphous CUR-TRY能有效提高CUR的體外溶出度及大鼠體內生物利用度。

關鍵詞 姜黃素;色氨酸;共無定型;超高效液相色譜-串聯質譜法;大鼠;藥動學;溶出度;生物利用度

Preparation of Co-amorphous Curcumin-tryptophan and Its Pharmacokinetic Study in Rats

LU Jialu，DENG Lina（Dept. of Pharmacy， Zhangjiagang Hospital Affiliated to Nanjing University of TCM， Jiangsu Zhangjiagang 215600， China）

ABSTRACT ? OBJECTIVE：To prepare Co-amorphous curcumin （CUR）-tryptophan （TRY） （Co-amorphous CUR-TRY）， and to study its pharmacokinetic characteristics in rats. METHODS： Co-amorphous CUR-TRY was prepared by ball milling method. differential scanning calorimetry （DSC） and powder X-ray diffraction （XRD） were used to characterize Co-amorphous CUR-TRY. The in vitro dissolution rate （dissolution） of Co-amorphous CUR-TRY， CUR and CUR-TRY physical mixture were compared under sink condition and non-sink condition. 18 SD rats were selected and randomly divided into Co-amorphous CUR-TRY group （155.43 mg/kg）， CUR raw material group （100 mg/kg）， CUR-TRY physical mixture group （155.43 mg/kg）， with 6 rats in each group. They were given relevant medicine intragastrically once. Each blood samples 0.3 mL were collected from orbital venous plexus 0.167， 0.33， 0.5， 0.75， 1， 1.5， 2， 4， 6， 8， 10， 12， 24 h after medication. UPLC-MS/MS was used to determine plasma concentration of CUR in rats. The pharmacokinetic study was performed by using DAS 3.0 software. RESULTS： DSC and XRD showed that Co-amorphous CUR-TRY was successfully prepared. Under sink condition （120 min）， compared with CUR raw material [cumulative dissolution rate of CUR is （36.79±3.79）%] and CUR-TRY physical mixture [cumulative dissolution rate of CUR is （33.12±0.68）%]， cumulative dissolution rate of CUR in Co-amorphous CUR-TRY （90.37±2.52）% was improved significantly （P<0.01）. Under non-sink condition， compared with CUR raw material and CUR-TRY physical mixture， CUR of Co-amorphous CUR-TRY exhibited ?dissolution and maintained supersaturation for a long time. Pharmacokinetic study showed that compared with CUR raw material group and CUR-TRY physical mixture group， cmax， AUC0-24 h and AUC0-∞ were increased significantly in Co-amorphous CUR-TRY group （P<0.01）; Relative bioavailability of CUR ?was improved by 2.14 and 1.86 fold （P<0.01）. CONCLUSIONS：Prepared Co-amorphous CUR-TRY can effectively improve in vitro dissolution and in vivo bioavailability in rats of CUR.

KEYWORDS ? Curcumin; Tryptophan; Co-amorphous; UPLC-MS/MS; Rats; Pharmacokinetics; Dissolution; Bioavailability

姜黃素（CUR）是從姜科植物姜黃（Curcumin longa L.）中提取的一種相對分子質量小的多酚類物質[1-2]，其藥理作用廣泛，主要用于抗炎、抗癌、降血脂等[3-8];但CUR的水溶性極低，溶解度僅為0.96 μg/mL，且口服生物利用度極差[9]。

共無定型是固體分散體的一種特殊形式，作為一種新型的藥物遞送系統，是由藥物與低分子量載體或者藥物與藥物兩個小分子物質組成的二元無定型系統[10-12]。共無定型不僅可以解決難溶性藥物的溶解度問題，還為藥物的聯合應用提供了新的思路。據報道，組成共無定型的兩組分的物質的量之比多為1 ∶ 1、1 ∶ 2、2 ∶ 1，其中1 ∶ 1最為常用，且在此比例下兩組分混溶性良好，可達到分子水平的均勻混合，相互作用更強，有助于提高共無定型的穩定性[13-15]。共無定型常用的制備方法有球磨法、淬火冷卻法、溶劑法等[16-18]，將藥物晶體轉變成無定型狀態，能增加難溶性藥物的溶解度和溶出表現;另外，共無定型制劑可以產生超飽和行為，增強藥物的胃腸道吸收[19]。在超飽和體系中，溶液中的藥物濃度高于其平衡溶解度，使得在溶液狀態下有更多的游離藥物可供機體吸收[20]。

色氨酸（TRY）是重要的營養劑，有助于動物體內血漿蛋白的更新，促使核黃素發揮作用，還有助于促進煙酸及血紅素的合成等，常用于共無定型的制備[21]。因此，本研究選擇TRY為配體，將CUR與TRY按1 ∶ 1（物質的量之比）結合制成CUR-TRY共無定型（Co-amorphous CUR-TRY），并采用差示掃描量熱分析法和粉末X射線衍射法對制備的Co-amorphous CUR-TRY進行表征及體外溶出評價，以期穩定CUR的無定型狀態，增強CUR的溶出表現，達到提高CUR生物利用度的目的。

1 材料

1.1 儀器

2695高效液相色譜儀、TQD超高效液相色譜三重四級桿質譜聯用儀系統（美國Waters公司）;CPA 225D電子分析天平（南京以馬內利儀器設備有限公司）;XP/XS微量分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）;CL21 R高速離心機（美國Thermo Fisher公司）;D/max 2500粉末X射線衍射儀（日本Rigaku公司）;200F3差示掃描量熱儀（德國Netzsch公司）;pHS-25酸度計（上海雷磁儀表廠）;ZRS-8GD智能溶出試驗儀（天津市天大天發科技有限公司）;MX-S1100渦旋混合儀（美國賽洛捷克公司）;Centrivap離心濃縮儀（美國Labconco公司）。

1.2 藥品與試劑

CUR原料藥（批號：R08S8S43416，純度：98%）、TRY原料藥（批號：J23M6R3，純度：99%）、維拉帕米（VER，內標，批號：Y05J6C2，純度：98%）均購自上海源葉科技有限公司;CUR對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110823-201405，純度：98.9%）;聚山梨酯80、鹽酸、乙酸乙酯、氫氧化鈉、磷酸二氫鉀均為分析純;乙腈為色譜純;水為超純水。

1.3 動物

SPF級SD大鼠，♂，體質量約（220±20） g，購自南京市江寧區青龍山動物繁殖場，動物生產許可證號為SCXK（蘇）2017-0001。

2 方法與結果

2.1 Co-amorphous CUR-TRY的制備及表征分析

2.1.1 Co-amorphous CUR-TRY的制備 取適量CUR原料藥和TRY（物質的量之比為1 ∶ 1）進行物理混合，得CUR-TRY物理混合物;再取2 g CUR-TRY物理混合物置于250 mL的球磨罐中，分別依次加入直徑為8 mm的瑪瑙球15個、直徑為6 mm的瑪瑙球25個、直徑為4 mm的瑪瑙球50個進行球磨，即得Co-amorphous CUR- TRY。為了防止樣品升溫，每研磨30 min后，將球磨罐置于冰浴中冷卻10 min，球磨總時間為240 min，然后置于干燥器中保存，備用。另稱取2 g CUR原料藥，同上述方法制備球磨CUR。

2.1.2 Co-amorphous CUR-TRY的表征分析 ①差示掃描量熱分析。分別取CUR原料藥、TRY原料藥、球磨CUR、CUR-TRY物理混合物、Co-amorphous CUR-TRY適量（約5～10 mg）置于鋁坩堝中，按測試條件（氮氣流速為50 mL/min;升溫速率為10 ℃/min;升溫范圍為25～350 ℃）進行差示掃描量熱分析。差示掃描量熱分析圖見圖1。

由圖1可知，CUR原料藥的熔點峰在181.9 ℃處，TRY原料藥的熔點峰在290.3 ℃處;球磨CUR的熔點峰仍然存在，表明通過球磨法無法得到無定型CUR;CUR-TRY物理混合物中存在CUR的熔點峰，且在239.9～254.7 ℃存在吸熱峰，表明CUR-TRY物理混合物可能發生低共熔現象;在Co-amorphous CUR-TRY中，出現單一的玻璃化轉變溫度（71.5 ℃處），且在122.4 ℃處出現明顯的放熱峰，表明Co-amorphous CUR-TRY發生重結晶，同時CUR出現微弱的吸熱峰，TRY的熔點峰消失，因此，初步判斷CUR和TRY以無定型形式存在。

②粉末X射線衍射。分別取CUR原料藥、TRY原料藥、球磨CUR、CUR-TRY物理混合物、Co-amorphous CUR- TRY適量置于載玻片上，鋪平，放入粉末X射線衍射儀中進行檢測，檢測條件為Cu靶（40 kV，40 mA）、步長0.02°、掃描速度2°/min、掃描范圍3°～40°（2 θ）。粉末X射線衍射圖見圖2。

由圖2可知，CUR原料藥在7.8°、8.7°、14.4°、15.8°、17.2°、21.0°、23.2°、23.6°、24.6°、25.5°、26.6°、28.1°處有較強的特征晶體衍射峰，TRY原料藥在4.9°、9.8°、14.8°、19.8°、24.8°、29.6°、35.1°處有較強的特征晶體衍射峰，球磨CUR的CUR晶體衍射峰仍然存在，CUR-TRY物理混合物存在CUR和TRY特征晶體衍射峰，而在Co-amorphous CUR-TRY中，CUR和TRY的特征晶體衍射峰全部消失，說明CUR和TRY以無定型形式存在。

2.2 CUR的含量測定

2.2.1 色譜條件 色譜柱：Kromasil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流動相：乙腈-0.5%磷酸水溶液（60 ∶ 40， ? ? ?V/V）;流速：1 mL/min;柱溫：35 ℃;進樣量：10 μL;檢測波長：425 nm。

2.2.2 溶液的制備 ①CUR對照品溶液。精密稱取CUR對照品2.082 mg，置于10 mL的棕色量瓶中，甲醇超聲溶解，定容至刻度，搖勻，即得質量濃度為208.2 ? ? ?μg/mL 的CUR對照品溶液。②供試品溶液。精密稱取Co-amorphous CUR-TRY適量，置于50 mL量瓶中，甲醇超聲（功率：400 W，頻率：20 kHz）溶解，定容至刻度，搖勻，即得（其中CUR的質量濃度為52.22 μg/mL）。

2.2.3 專屬性試驗 取CUR對照品溶液、供試品溶液各10 μL，按“2.2.1”項下色譜條件進樣分析，記錄色譜圖。結果，Co-amorphous CUR-TRY中無其他雜質干擾，以CUR峰計理論板數>2 000，表明該方法的專屬性良好。高效液相色譜圖見圖3。

2.2.4 線性關系考察 精密吸取CUR對照品溶液適量，分別稀釋0、2、4、8、16、32、64倍，按“2.2.1”項下色譜條件進樣分析，記錄峰面積。以CUR對照品質量濃度為橫坐標（x）、峰面積為縱坐標（y）進行線性回歸。結果，回歸方程為y=83 480x+82 499（R2=0.999 9），CUR線性范圍為3.25～208.20 μg/mL。

2.2.5 精密度試驗 取“2.2.4”項下低、中、高質量濃度（3.25、52.05、104.10 μg/mL）的CUR對照品溶液，按“2.2.1”項下色譜條件，連續進樣6次，記錄峰面積。結果，CUR低、中、高質量濃度的峰面積的RSD分別為2.05%、1.22%、1.14%（n=6）。

2.2.6 穩定性試驗 取“2.2.2”項下的供試品溶液，于室溫下分別放置0、2、4、8、12、24 h后，按“2.2.1”項下色譜條件進樣分析，記錄峰面積。結果，CUR峰面積的RSD為1.68%（n=6）。

2.2.7 重復性試驗 按“2.2.2”項下方法平行制備6份Co-amorphous CUR-TRY供試品溶液，按“2.2.1”項下色譜條件進樣分析，記錄峰面積并計算含量。結果，CUR的平均含量為96.05%，RSD為1.57%（n=6）。

2.2.8 加樣回收率試驗 稱取6份已知含量的Co-amorphous CUR-TRY適量，分別加入等量的CUR對照品，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，按“2.2.1”項下色譜條件進樣分析。結果，Co-amorphous CUR-TRY中CUR的平均回收率為95.66%，RSD為1.37%（n=6）。

2.3 漏槽條件下Co-amorphous CUR-TRY的體外溶出試驗

為了考察不同樣品的累積溶出率，精密稱取CUR原料藥（10 mg）、CUR-TRY物理混合物（15.54 mg ，CUR與TRY的物質的量之比為1 ∶ 1， 其中CUR 10 mg）、Co- amorphous CUR-TRY（15.54 mg，其中CUR 10 mg），按2015年版《中國藥典》（四部）附錄ⅩC溶出度測定法第二法有關規定進行測量[22]，溶出介質為含0.5%聚山梨酯80的磷酸鹽緩沖液（pH 6.8），溶出介質體積為900 mL，溫度為37 ℃，轉速為100 r/min，平行3份，分別于5、15、30、45、60、90、120 min時取樣5 mL（隨即補足等溫度等量的溶出介質），0.45 μm微孔濾膜濾過，按“2.2.1”項下色譜條件進樣分析，記錄峰面積并計算各時間點CUR的質量濃度及累積溶出率[累積溶出率=CUR溶出質量/投入量×100%，CUR溶出質量=當前取樣點CUR的質量濃度×介質體積+之前取樣點CUR的質量濃度×取樣量]，然后繪制漏槽條件下CUR的體外溶出曲線。采用SPSS 24.0軟件進行統計學分析，通過單因素方差分析比較多組間的差異，t檢驗評估兩組間的差異。P<0.05表示差異有統計學意義。漏槽條件下CUR的體外溶出曲線見圖4。

由圖4可知，在漏槽條件下，與CUR原料藥比較，CUR-TRY物理混合物中CUR累積溶出率稍有提高，但無顯著性差異。在120 min時，與CUR原料藥[CUR累積溶出率為（36.79±3.79）%]和CUR-TRY物理混合物[CUR累積溶出率為（33.12±0.68）%]比較，Co-amorphous CUR-TRY中CUR的累積溶出率[（90.37±2.52）%]顯著提高（P<0.01）。

2.4 非漏槽條件下Co-amorphous CUR-TRY的體外溶出試驗

為了考察Co-amorphous CUR-TRY的超飽和行為，精密稱取CUR原料藥（100 mg）、CUR-TRY物理混合物（155.4 mg，CUR與TRY的物質的量之比為1 ∶ 1，其中CUR 100 mg）、Co-amorphous CUR-TRY（155.4 mg，其中CUR 100 mg），按2015年版《中國藥典》（四部）附錄ⅩC溶出度測定法第二法有關規定進行測量[22]，溶出介質為含0.5%聚山梨酯80的磷酸鹽緩沖液（pH 6.8），溶出介質體積為200 mL，溫度為37 °C，轉速為100 r/min，平行3份，分別于0.083、0.167、0.25、0.33、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、8、12、24 h時取樣2 mL（隨即補足等溫度等量的溶出介質），0.45 μm微孔濾膜濾過，甲醇稀釋1倍后，按“2.2.1”項下色譜條件進樣分析，記錄峰面積并計算各時間點CUR的溶出度，然后繪制非漏槽條件下CUR的體外溶出曲線。非漏槽條件下CUR的體外溶出曲線見圖5。

由圖5可知，在非漏槽條件下，CUR原料藥與CUR-TRY物理混合物的體外溶出曲線相似;與CUR原料藥和CUR-TRY物理混合物比較，Co-amorphous CUR-TRY中CUR具有較高的溶出度，并且維持長時間的超飽和程度。在4 h時，Co-amorphous CUR-TRY中CUR的溶出度（134.81 μg/mL）是CUR原料藥（59.74 ? ? ?μg/mL）的2.26倍;4 h后Co-amorphous CUR-TRY中CUR的溶出度開始緩慢下降，但在24 h時，Co-amorphous CUR-TRY中CUR的溶出度仍高于CUR原料藥與CUR-TRY物理混合物。

2.5 Co-amorphous CUR-TRY的藥動學研究

2.5.1 分組與給藥 取18只♂SD大鼠，隨機分為CUR原料藥組（100 mg/kg，按人臨床用藥劑量換算而得[18]，下同）、CUR-TRY物理混合物組（155.43 mg/kg）、Co-amorphous CUR-TRY組（155.43 mg/kg），每組6只，灌胃給藥1次。給藥前12 h禁食不禁水，實驗期間自由飲水。于給藥后0.167、0.33、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、8、10、12、24 h經大鼠眼眶靜脈叢取血約0.3 mL，置于1.5 mL肝素化離心管中，5 000 r/min離心10 min，取上清液于-20 ℃冷凍保存，備用。

2.5.2 血漿樣品的處理 取血漿樣品100 μL，置于1.5 mL離心管中，分別加入10 μL甲醇及10 μL VER溶液，于渦旋儀上渦旋3 min，然后加入乙酸乙酯1 mL，再渦旋5 min， 14 000 r/min離心10 min，吸取上清液800 μL至新的離心管中，離心濃縮至溶劑完全揮干，加入100 μL流動相復溶，渦旋5 min，14 000 r/min離心10 min，取上清液進樣分析。

2.5.3 色譜及質譜條件 ①色譜條件。色譜柱：Waters ACQUITY UPLC BEH C18（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）;流動相：0.4%甲酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脫（0～1 min：70%→30%A;1～2 min：30%A;2～3 min：30%→70%A;3～4 min：70%A）;柱溫：40 ℃;流速：0.3 mL/min;進樣量：5 μL。②質譜條件。采用正離子模式，CUR質荷比（m/z）：369.0→176.9，VER m/z：455.0→165.0;錐孔電壓分別為32、56 V;碰撞能量分別為22、30 eV。

2.5.4 溶液的制備 ①CUR對照品溶液。精密稱取CUR對照品適量，置于10 mL量瓶中，甲醇超聲溶解，并定容至刻度，搖勻，配制成質量濃度為183.7 μg/mL的貯備液，于4 ℃下保存。精密吸取貯備液適量，用甲醇稀釋成質量濃度為1.79、3.59、7.16、14.35、28.70、57.41、114.81、229.63、459.25、918.50、1 837 ng/mL的對照品系列溶液。②VER溶液：精密稱取VER對照品適量，置于10 mL量瓶中，配制成質量濃度為101.2 μg/mL內標貯備液，于4 ℃下保存。精密吸取內標貯備液適量，用甲醇稀釋成質量濃度為101.2 ng/mL的VER溶液。

2.5.5 專屬性考察 精密吸取空白血漿、空白血漿+CUR對照品溶液、大鼠灌胃給藥1 h后的血漿樣品，按“2.5.2”項下方法處理，按“2.5.3”項下色譜及質譜條件進樣分析，記錄色譜圖。結果，CUR與VER互不干擾，且血漿中的內源性物質對CUR的測定也沒有干擾。超高效液相色譜-串聯質譜圖見圖6。

2.5.6 線性關系考察 取100 μL空白血漿，分別加入CUR對照品系列溶液10 μL，按“2.5.2”項下方法處理，按“2.5.3”項下色譜及質譜條件進樣分析，記錄峰面積。以CUR質量濃度為橫坐標（x），CUR與VER的峰面積比為縱坐標（y）進行線性回歸。結果，回歸方程為y=0.000 1x-0.001 8（R2=0.991 8），CUR的檢測質量濃度線性范圍為1.79～1 837 ng/mL。

2.5.7 精密度試驗 取100 μL空白血漿，分別制備低、中、高（28.70、114.81、459.25 ng/mL）3個質量濃度的CUR血漿樣品6份，按“2.5.2”項下方法處理，按“2.5.3”項下色譜及質譜條件進樣分析，每個質量濃度同日內連續測定3次，考察日內精密度;另每天測定1次，連續測定6 d，考察日間精密度。結果，CUR低、中、高3個質量濃度樣品日內RSD分別為6.73%、5.25%、4.35%（n=6），日間RSD分別為13.24%、6.13%、5.87%（n=6）。

2.5.8 準確度試驗 取100 μL空白血漿，分別制備低、中、高（28.70、114.81、459.25 ng/mL）3個質量濃度的CUR的質控樣品，按“2.5.2”項下方法處理，按“2.5.3”項下色譜及質譜條件進樣分析，記錄峰面積并計算對應質量濃度。以測得質量濃度與真實質量濃度的比值計算準確度。結果，CUR低、中、高質量濃度的準確度分別為85.51%、91.33%、87.56%，RSD分別為7.83%、12.46%、10.47%（n=6）。

2.5.9 穩定性試驗 取100 μL空白血漿，分別制備低、中、高（28.70、114.81、459.25 ng/mL）3個質量濃度的CUR的質控樣品，每個濃度6份，分別進行以下處理：室溫放置12 h、-20 ℃凍存14 d后解凍、-20 ℃至室溫反復凍融3次，然后按“2.5.2”項下方法處理，按“2.5.3”項下色譜及質譜條件進樣分析，記錄峰面積。結果，室溫放置12 h后CUR峰面積的RSD為4.71%（n=6），-20 ℃凍存14 d后CUR峰面積的RSD為3.88%（n=6），-20 ℃至室溫反復凍融3次后CUR峰面積的RSD為3.52%（n=6）。

2.5.10 重復性試驗 取100 μL空白血漿，加入質量濃度為114.81 ng/mL的CUR對照品溶液，按“2.5.2”項下方法處理，平行制備6份，按“2.5.3”項下色譜及質譜條件進樣分析，記錄峰面積。結果，CUR峰面積的RSD為4.37%（n=6），表明處理方法的重復性良好。

2.5.11 基質效應 取100 μL空白血漿，分別制備低、中、高（28.70、114.81、459.25 ng/mL）3個質量濃度的CUR的質控樣品，按“2.5.2”項下方法處理，按“2.5.3”項下色譜及質譜條件進樣分析。每個濃度進行6樣本分析，記錄峰面積，并計算CUR峰面積與內標峰面積的比值A1;取100 μL流動相代替空白血漿，按上述方法操作，得CUR峰面積與內標峰面積的比值A2。基質效應公式為A1/A2×100%。結果，CUR的基質效應為92.38%～98.30%，RSD為4.08%～7.53%（n=6）。

2.5.12 藥動學分析 取“2.5.1”項下各時間點血漿樣品，按“2.5.2”項下方法處理，按“2.5.3”項下色譜及質譜條件進樣分析，并計算各時間點對應的CUR血藥濃度。采用DAS 3.0數據處理軟件，選擇非房室模型計算藥動學參數。采用SPSS 24.0軟件進行統計分析，結果以x±s表示，組間比較采用單因素方差分析，若服從正態分布，則采用t檢驗;若不服從正態分布，則采用Wilcox秩和檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。大鼠體內CUR的藥-時曲線見圖7，CUR在各組大鼠血漿中的藥動學參數見表1。

由表1可知，CUR原料藥組與CUR-TRY物理混合物組的藥動學參數無顯著性差異。與CUR原料藥組和CUR-TRY物理混合物組比較，Co-amorphous CUR-TRY組cmax、AUC0-24 h、AUC0-∞顯著增加（P<0.01），CUR的相對生物利用度分別提高了2.14、1.86倍（P<0.01）。

3 討論

將藥物通過特定的方法由晶型轉變為無定型狀態，可以提高難溶性藥物的溶出率和溶出度[13]。向無定型藥物中加入聚合物，將藥物以無定型態分散在載體材料中，制備成藥物-聚合物固體分散體，可提高難溶性藥物的溶出度。但藥物-聚合物固體分散體往往存在載藥量低、吸濕性強、穩定性差、藥物與聚合物混溶性差、胃腸道毒性等問題[23-25]。共無定型是將藥物和小分子物質或者兩種藥物通過合適的方法制備得到的無定型單相體系，與藥物-聚合物固體分散體相比，無明顯的吸濕性，具有物理穩定性好、載藥量高、混溶性良好等特點[10]。

在本研究中，通過球磨法成功制備了Co-amorphous CUR-TRY，并采用差示掃描量熱分析和粉末X射線衍射對制備的Co-amorphous CUR-TRY進行表征分析，結果證實本研究制備的Co-amorphous CUR-TRY符合要求。在漏槽和非漏槽條件下進行Co-amorphous CUR-TRY體外溶出試驗，結果與CUR原料藥比較，Co- amorphous CUR-TRY有更高的溶出率且溶出度能維持長時間超飽和狀態。另外，超飽和狀態有助于提高難溶性藥物的遞送，在超飽和體系中，溶液中藥物的濃度高于其溶解度，使更多的游離藥物能夠被胃腸道吸收，且維持超飽和時間越長，藥物吸收越好[19，26]。藥動學研究結果也表明，在Co-amorphous CUR-TRY組中，與CUR原料藥比較CUR的相對生物利用度顯著提高。

綜上所述，本研究制備的Co-amorphous CUR-TRY與CUR原料藥比較能夠有效地改善CUR的體外溶出度及體內生物利用度，有助于擴展其臨床應用。

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（收稿日期：2019-04-16 修回日期：2019-05-10）

（編輯：唐曉蓮）