在瑞氏染色中用蒸餾水代替磷酸鹽緩沖液的實(shí)際應(yīng)用

劉興林 劉敏

摘要：在血液常規(guī)檢驗(yàn)中，瑞氏染色的應(yīng)用非常廣泛，而其中所需要的磷酸鹽緩沖液在基層配制是比較困難的，而用新鮮的蒸餾水可以代替。這樣就可以解決基層開展血液常規(guī)檢驗(yàn)的困難。同時(shí)也可以節(jié)約成本。

關(guān)鍵詞：瑞氏染色;蒸餾水;磷酸鹽緩沖液

一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

在基層應(yīng)用瑞氏染色時(shí)，由于配制磷酸鹽緩沖液所要用的化學(xué)試劑的用量不大，而購買成本較大，加上配制時(shí)需要分析天平，而基層實(shí)驗(yàn)室基本沒有這些設(shè)備，所以，不能配制磷酸鹽緩沖液，而蒸餾水可以用簡單的設(shè)備就可以獲取，所以通過用蒸餾水代替磷酸鹽緩沖液對(duì)血片做染色，也可以獲得較理想的實(shí)驗(yàn)效果。

二.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：

1.所需設(shè)備和器材：水浴箱，顯微鏡，采血針，推玻片，載玻片。

2.試劑：瑞氏染液，蒸餾水。

3.方法：在室溫（18℃--35℃）條件下。對(duì)每批新進(jìn)的瑞氏染液進(jìn)行預(yù)染。

3.1推制三張血片（需厚薄適于，頭體尾分明，長度合適），并編號(hào)：1﹑2﹑3.待血膜完全干透后，用蠟筆固定血膜兩端，滴加適量的瑞氏染液（并開始計(jì)時(shí)），使染液能覆蓋整個(gè)血膜為宜，保留染液濕潤，染色一分鐘，用口徑大致相同的滴管滴加蒸餾水，1號(hào)片滴加等量的蒸餾水，2號(hào)片滴加兩倍的蒸餾水，3號(hào)片滴加三倍的蒸餾水，每片進(jìn)行混勻。

3.2染色三分鐘時(shí)，用顯微鏡（10×）對(duì)染色進(jìn)行觀察，在顯微鏡下，可以觀察到細(xì)胞的著色的過程，當(dāng)血片上的有核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞核都基本染好后記錄時(shí)間。

3.3用流水沖洗掉血膜上的染液，注意不要把血膜沖掉。

3.4染好的血片，待干后，用油鏡（100×）對(duì)染色情況進(jìn)行觀察分析，通過對(duì)三張血片的染色情況分析，選擇細(xì)胞著色好，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核染色效果好的血片，作為這批瑞氏染液在染色時(shí)染液和蒸餾水用量的比例關(guān)系的參考依據(jù)。

三.結(jié)果分析：

在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，用水浴箱控制實(shí)驗(yàn)的溫度，保證實(shí)驗(yàn)過程在比較恒定的溫度下進(jìn)行，以保證實(shí)驗(yàn)的可靠性。通過用蒸餾水代替磷酸鹽緩沖液進(jìn)行瑞氏染色，不但可以達(dá)到染色的良好效果，節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本，同時(shí)可以為基層檢驗(yàn)工作人員開展血液常規(guī)檢驗(yàn)做出一定的貢獻(xiàn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]劉成玉，臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)（人衛(wèi)版），2003;5（2）：29.

[2]安艷，趙平，臨床檢驗(yàn)（人衛(wèi)版），2013;5（2）：160-166.

作者簡介：

劉興林（1965.1-），男，漢族，貴州貴陽市人，高級(jí)實(shí)驗(yàn)師，主要從事臨床檢驗(yàn)和血液學(xué)檢驗(yàn)教學(xué)工作。