重樓多糖提取工藝的優(yōu)化

錢蕾 陳陽

【摘要】：采用熱水浸提法提取重樓多糖，用硫酸-蒽酮顯色法進(jìn)行含量測定。設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，探討了固液比、提取溫度和提取時間對重樓多糖得率的影響及最佳提取工藝。結(jié)果表明：影響重樓多糖得率的最顯著因素是提取時間，最優(yōu)提取條件是固液比1：30、提取溫度60 ℃、提取時間2.5 h。在此條件下，重樓多糖得率為13.91%。

【關(guān)鍵詞】：重樓多糖 提取工藝 正交試驗(yàn) 多糖得率

重樓，又名“蚤休”，屬華中珍稀瀕危植物【1】，廣泛分布于云南、四川等地，以蚤休之名始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》【2】，味苦、微寒，具清熱解毒、消腫止痛功效，民間多用于治療毒蛇咬傷、流行性腮腺炎，也用于驚風(fēng)抽搐。其主要化學(xué)成分有甾體皂苷、黃酮以及多糖，其中多糖具有降血壓、抗氧化及免疫調(diào)節(jié)等活性，因此日益成為中藥材評價指標(biāo)之一。前期研究表明重樓多糖具有較好的體外活性，對其提取工藝的研究報道較少，故本實(shí)驗(yàn)通過熱水浸提法提取重樓多糖，設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提取工藝，優(yōu)選最佳提取條件，為重樓多糖在醫(yī)藥及保健領(lǐng)域的開發(fā)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1儀器、試劑與材料

1.1 儀器

小型高速粉碎機(jī)WK-2000A （青州市精誠醫(yī)藥裝備制造有限公司） ?SHB-ⅢS循環(huán)水式多用真空泵 （鄭州長城科工貿(mào)有限公司） 酶標(biāo)儀 （美國Bio-TeK公司） 離心機(jī)SIGMA4K15

1.2 試劑與材料

重樓（安國藥源商貿(mào)有限公司） 葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品 （色譜純， 美國Sigma-Aldrich公司）

所用試劑均為分析純，水為去離子水 三氯甲烷、正丁醇、無水乙醇

2方法與結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

采用改良蒽酮硫酸法， 以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品， 濃度為橫坐標(biāo)， 吸光值為縱坐標(biāo)， 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線， 得線性回歸方程：Y=3.6927X-0.0067，R2=0.9987。

2.2 單因素考察

稱取5份重樓粉末2g，分別按固液比1：20、1：30、1：40、1：50、1：60加入純水，70℃提取2h，提取液補(bǔ)足減失重量，離心、抽濾，稀釋至適當(dāng)濃度用改良蒽酮硫酸法630nm測吸光度，結(jié)果提取率先增大后減小，1：30最大。

稱取5份重樓粉末2g，加80mL純水，分別40、50、60、70、80℃提取2h，同法測吸光度，結(jié)果提取率先增大后減小，60℃最大。

稱取5份重樓粉末2g，加80mL純水，70℃分別提取1、1.5、2、2.5、3h，同法測吸光度，結(jié)果提取率先增大后減小，2.5h最大。

3 正交試驗(yàn)

結(jié)合單因素試驗(yàn)結(jié)果，設(shè)計(jì)三因素三水平正交試驗(yàn)，分別進(jìn)行9組實(shí)驗(yàn)。結(jié)合方差分析，對多糖得率影響最大的是提取時間，最佳提取條件為，固液比1：30、提取溫度60℃、提取時間2.5h，此條件下多糖得率為13.91%。

4 結(jié)論

通過單因素分析，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，提取時間對多糖得率影響最大，PC<0.01，因素C具有極顯著性差異。通過本文研究發(fā)現(xiàn)：重樓多糖的最佳提取條件是，固液比1：30、提取溫度60℃、提取時間2.5h。在此條件下，重樓多糖得率為13.91%。該研究結(jié)果提高了重樓多糖的提取效率，優(yōu)化了提取工藝，為重樓多糖的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

【參考文獻(xiàn)】：

【1】葉漪，梁娟.七葉一枝花的研究與開發(fā)利用[J].中國野生植物資源，2018，37（02）：73-75，78.

【2】關(guān)書博，李可強(qiáng)，張振秋.重樓中薯蕷皂苷元兩種提取方法比較研究[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2017，19（11）：60-62.