重樓多糖提取工藝的優(yōu)化

錢蕾 陳陽

【摘要】：采用熱水浸提法提取重樓多糖，用硫酸-蒽酮顯色法進行含量測定。設計正交試驗，探討了固液比、提取溫度和提取時間對重樓多糖得率的影響及最佳提取工藝。結果表明：影響重樓多糖得率的最顯著因素是提取時間，最優(yōu)提取條件是固液比1：30、提取溫度60 ℃、提取時間2.5 h。在此條件下，重樓多糖得率為13.91%。

【關鍵詞】：重樓多糖 提取工藝 正交試驗 多糖得率

重樓，又名“蚤休”，屬華中珍稀瀕危植物【1】，廣泛分布于云南、四川等地，以蚤休之名始載于《神農本草經》【2】，味苦、微寒，具清熱解毒、消腫止痛功效，民間多用于治療毒蛇咬傷、流行性腮腺炎，也用于驚風抽搐。其主要化學成分有甾體皂苷、黃酮以及多糖，其中多糖具有降血壓、抗氧化及免疫調節(jié)等活性，因此日益成為中藥材評價指標之一。前期研究表明重樓多糖具有較好的體外活性，對其提取工藝的研究報道較少，故本實驗通過熱水浸提法提取重樓多糖，設計正交實驗優(yōu)化提取工藝，優(yōu)選最佳提取條件，為重樓多糖在醫(yī)藥及保健領域的開發(fā)應用提供科學依據。

1儀器、試劑與材料

1.1 儀器

小型高速粉碎機WK-2000A （青州市精誠醫(yī)藥裝備制造有限公司） ?SHB-ⅢS循環(huán)水式多用真空泵 （鄭州長城科工貿有限公司） 酶標儀 （美國Bio-TeK公司） 離心機SIGMA4K15

1.2 試劑與材料

重樓（安國藥源商貿有限公司） 葡聚糖標準品 （色譜純， 美國Sigma-Aldrich公司）

所用試劑均為分析純，水為去離子水 三氯甲烷、正丁醇、無水乙醇

2方法與結果

2.1 標準曲線的繪制

采用改良蒽酮硫酸法， 以葡萄糖為標準品， 濃度為橫坐標， 吸光值為縱坐標， 繪制標準曲線， 得線性回歸方程：Y=3.6927X-0.0067，R2=0.9987。

2.2 單因素考察

稱取5份重樓粉末2g，分別按固液比1：20、1：30、1：40、1：50、1：60加入純水，70℃提取2h，提取液補足減失重量，離心、抽濾，稀釋至適當濃度用改良蒽酮硫酸法630nm測吸光度，結果提取率先增大后減小，1：30最大。

稱取5份重樓粉末2g，加80mL純水，分別40、50、60、70、80℃提取2h，同法測吸光度，結果提取率先增大后減小，60℃最大。

稱取5份重樓粉末2g，加80mL純水，70℃分別提取1、1.5、2、2.5、3h，同法測吸光度，結果提取率先增大后減小，2.5h最大。

3 正交試驗

結合單因素試驗結果，設計三因素三水平正交試驗，分別進行9組實驗。結合方差分析，對多糖得率影響最大的是提取時間，最佳提取條件為，固液比1：30、提取溫度60℃、提取時間2.5h，此條件下多糖得率為13.91%。

4 結論

通過單因素分析，設計正交試驗，提取時間對多糖得率影響最大，PC<0.01，因素C具有極顯著性差異。通過本文研究發(fā)現：重樓多糖的最佳提取條件是，固液比1：30、提取溫度60℃、提取時間2.5h。在此條件下，重樓多糖得率為13.91%。該研究結果提高了重樓多糖的提取效率，優(yōu)化了提取工藝，為重樓多糖的開發(fā)利用提供科學依據。

【參考文獻】：

【1】葉漪，梁娟.七葉一枝花的研究與開發(fā)利用[J].中國野生植物資源，2018，37（02）：73-75，78.

【2】關書博，李可強，張振秋.重樓中薯蕷皂苷元兩種提取方法比較研究[J].遼寧中醫(yī)藥大學學報，2017，19（11）：60-62.