高效液相色譜和超高效液相色譜法測定乳制品中三聚氰胺含量的對比

摘要：目的 建立測定三聚氰胺含量的超高效液相色譜（UPLC）法，并與高效液相色譜（HPLC）法的測定結果進行比對。方法 HPLC條件為Agilent Zorbax SB_C18柱（250 mm × 4.6 mm ，5μm）以離子對試劑緩沖溶液與乙腈為流動相（95：5）;流速1.0mL/min;UPLC條件為 Acquity UPLC BEH C18柱（2.1mm×100mm，1.7μm）;以離子對試劑緩沖溶液與乙腈為流動相（95：5）;流速0.5mL/min。結果 兩種方法所得含量測定結果一致。HPLC法和UPLC法回收率分別為92.9% （RSD=0.84，n=6）和95.3%（RSD=0.48，n=6）。結論 UPLC法與HPLC法相比在具備準確可靠、重復性好的同時，更加快速、靈敏、并且大大減少了有機溶劑的消耗，因此可以成功替代HPLC法測定三聚氰胺的含量。

關鍵詞：超高效液相色譜法、高效液相色譜法、三聚氰胺、含量測定、比對

1? 引言

三聚氰胺（英文名Melamine），簡稱三胺，又名蜜胺、氰尿酰胺。分子式C3N3H6，分子量126.12。白色結晶粉末，無味，相對密度1570kg/m3。微溶于水（3.1g/L常溫），可溶于甲醇、甲醛、乙酸、熱乙二醇、甘油、吡啶等，不溶于丙酮、醚類、對身體有害，不可用于食品加工或食品添加物。[1，2]

但由于目前食品檢測中測定蛋白質的凱氏定氮法是通過測定樣品中氮原子含量來間接推算出蛋白質含量的，而此方法無法識別氮的來源，蛋白質的平均含氮量為16%，而是三聚氰胺含氮量高達66.67%，少量添加即可大大提高產品的含氮量，不法商人借此提升食品檢測蛋白質含量指標，從而通過檢驗機構的檢測[3]。

而對于三聚氰胺的測定方法有很多，例如液相色譜法、氣相色譜-質譜法、毛細管電泳法、分光光度法、酶聯免疫法（ELISA）等，其中毛細管電泳法和分光光度法靈敏度低，只可滿足一般檢測要求;氣相色譜-質譜法需要衍生化步驟，操作繁瑣;ELISA則只適用于大批樣快速篩選檢測，若為陽性需進一步確證[4]?！?br>