王曉霞 李靜

[摘要]目的 觀察甘草及甘草提取物對小鼠免疫保護的作用。方法 本實驗設對照組、甘草低、高劑量組、甘草提取物低、高劑量組,共5組。甘草低、高劑量組分別以甘草100、300g/kg?BW,甘草提取物低、高劑量組分別以甘草提取物20mg、50mg/kg?BW進行小鼠灌胃,對照組以純化水替代,連續30天后。觀察對小鼠遲發型變態反應、血清溶血素、溶血空斑數、脾淋巴細胞轉化和NK細胞活性的影響。結果 甘草及甘草提取物各劑量組小鼠的足跖腫脹度、NK細胞活性與對照組比較,均顯著升高,具有統計學差異(P<0.05);甘草提取物高劑量組小鼠的淋巴細胞增值數、血清半數溶血值(HC50)與對照組比較,顯著升高,有統計學差異(P<0.05),其他實驗組小鼠均無顯著差異(P>0.05)。表明甘草及甘草提取物均能一定程度增強小鼠免疫力。
[關鍵詞]甘草、甘草提取物、NK細胞、免疫
甘草為豆科植物甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch.、脹果甘草 Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草 Glycyrrhiza glabra L.的干燥根和根莖,春、秋季采挖,除去須根,曬干而得[1]。甘草和中益氣,有調補勞損內傷、脾氣虛弱、元陽不足、肺氣衰虛之功效,其甘溫平補,可增強免疫功能。在甘草提取物當中,含有的有效成分種類較多,能夠發揮出多重免疫調節的效果。甘草提取物能夠對免疫細胞進行激活,并且對免疫反應進行增強[2]。本實驗觀察甘草及甘草經過提取后所得甘草提取物對小鼠免疫的影響,比較提取工序是否影響甘草免疫作用的發揮。
1 材料與方法
1.1受試物 甘草購自張仲景大藥房;甘草提取物以甘草飲片加10倍水煎煮提取3次,每次2h,過濾、干燥得粉末,1克提取物相當于6.1g甘草飲片。
1.2動物 健康KM種小鼠,單一性別,體重18~22g,由新鄉醫學院實驗動物中心提供。
1.3儀器 電子天平、分析天平、酶標儀、96孔細胞培養板、離心機、游標卡尺等
1.4實驗分組 100只KM小鼠隨機分成兩個組,一組進行遲發型變態反應、血清溶血素實驗,另外一組進行小鼠脾淋巴細胞轉化實驗、NK細胞活性實驗。每組分別設對照組、甘草低、高劑量組、甘草提取物低、高劑量組。
2 方法
甘草低、高劑量組分別以甘草100、300mg/kg?BW,甘草提取物低、高劑量組分別以甘草提取物20mg、50mg/kg?BW進行小鼠灌胃,對照組以去離子水替代,連續灌胃30天。處死小鼠進行足趾腫脹度、半數溶血值(HC50)、COA誘導脾淋巴細胞增殖、溶血空斑數和NK細胞活性檢測。方法按照中國衛生部《保健食品檢驗與評價技術規范》2003版中規定操作。
數據處理 采用檢驗的統計方法進行數據處理。
3結果
3.1對小鼠細胞免疫的影響
灌胃小鼠受試物30天后,甘草及甘草提取物各劑量組小鼠的足跖腫脹度與對照組比較,均顯著升高,具有統計學差異(P<0.05);甘草提取物高劑量組小鼠的淋巴細胞增值數與對照組比較,顯著升高,有統計學差異(P<0.05),其他實驗組小鼠均無顯著差異(P>0.05)。結果見表1
3.2對小鼠半數溶血值(HC50)、溶血空斑數和NK細胞活性的影響
灌胃小鼠受試物30天后,與對照組比較,甘草提取物高劑量組小鼠血清半數溶血值(HC50)顯著升高,差異有統計學意義(P<0.05),剩余其他實驗組小鼠血清半數溶血值(HC50)、溶血空斑數與對照組比較,差異均無顯著性(P>0.05)。甘草及甘草提取物各劑量組小鼠的NK細胞活性與對照組比較,均顯著升高,具有統計學差異(P<0.05)。結果見表2
4討論
本實驗結果顯示,甘草及甘草提取物各劑量組小鼠的足跖腫脹度、NK細胞活性與對照組比較,均顯著升高,具有統計學差異(P<0.05);甘草提取物高劑量組小鼠的淋巴細胞增值數、血清半數溶血值(HC50)與對照組比較,顯著升高,有統計學差異(P<0.05),其他實驗組小鼠均無顯著差異(P>0.05)。表明甘草及甘草提取物均能一定程度增強小鼠免疫力。甘草提取物為甘草經過水提取、干燥而得粉末,本實驗甘草和甘草提取物實驗劑量折合藥材飲片相當,實驗結果甘草提取物高劑量組對小鼠淋巴細胞增值數、血清半數溶血值(HC50)有明顯影響,而對應劑量甘草飲片高劑量組缺沒有影響。一定程度上說明,甘草經過提取并無降低其藥效作用。
引用文獻
1.《中華人民共和國藥典》2015版一部,P86
2.方鑒.甘草及其有效成分對免疫系統調節作用探究[B].海峽藥學,2017年,29( 8): 28-30.