皖南黃兔血清生化指標的檢測與分析

張朝霞，丁海生，汪 勇，程廣龍，趙小偉，馬榮幸，趙輝玲，黃冬維*

（1安徽省農業科學院畜牧獸醫研究所，畜禽產品安全工程安徽省重點實驗室，合肥230031；2安徽省義華農牧科技有限公司，池州245100）

我國是家兔養殖、兔肉生產加工和消費大國。肉兔在我國家兔生產中占有非常重要的地位，占中國家兔現存欄數的絕大多數［1］。兔肉的營養特點是“三高三低”，即屬于高蛋白、高賴氨酸、高磷脂、低脂肪、低膽固醇和低熱量的肉類，且兔肉蛋白質為完全蛋白質，磷脂和不飽和脂肪酸含量較高［2］，對患有動脈硬化、冠心病、高血壓等的人群具有很好的保健作用。因此，我國居民對兔肉的消費需求呈不斷上升的趨勢。皖南黃兔主要養殖于安徽池州、黃山等皖南山區，是安徽省義華農牧科技有限公司與安徽省農業科學院聯合開展科技攻關，通過邊選育邊推廣的繁育措施，培育形成的背毛黃色、腹部少許白毛、獨具特色的中小型肉兔群體，其突出特點是耐粗飼、抗病力強、肉品質好、營養價值高，無膻味，深受消費者青睞。

血液是動物體內環境的重要組成部分，血液生化水平是反映和影響家畜營養滿足程度、新陳代謝狀況、體內外環境平衡狀況、機體生產性能和健康狀況的綜合因素［3-5］，也可以間接反映動物性食品的營養價值。本研究通過測定皖南黃兔的血清生化指標，旨在揭示其生物學特性、種質特性以及生長發育特性，以全面了解皖南黃兔不同發育階段的營養需求，為品種選育及飼養工作提供科學的理論依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選擇4周齡、8周齡和12周齡健康的皖南黃兔各12只（公母各半），禁食12 h后，于次日早晨用真空采血管（不含抗凝劑）采集試驗兔耳緣靜脈血液4 mL，4℃冷藏過夜，2 500 r/min離心10 min，小心吸取上層血清，分裝到1.5 mL滅菌離心管，-20℃保存備用。

1.2 生化指標測定

使用羅氏生化分析儀（c501）對血清生化指標進行檢測，測定指標及具體方法如下：血糖（GLU）采用葡萄糖氧化酶-過氧化物酶偶聯法，膽固醇（CHOL）采用膽固醇氧化酶-過氧化物酶偶聯法，肌酐（CREA）采用苦味酸法，甘油三酯（TG）采用磷酸甘油氧化酶-過氧化物酶偶聯法，尿素（UREA）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）和天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）均采用酶學速率法進行測定，總蛋白（TP）采用雙縮脲法，白蛋白（ALB）采用溴甲酚綠法。

1.3 統計方法

采用Excel 2010軟件及SAS 9.1軟件統計數據并進行單因素方差分析，采用Duncan法進行多重比較，結果用“平均數±標準差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 不同周齡皖南黃兔血糖、血脂指標分析

由表1可知，4周齡公兔血清中GLU含量顯著高于8周齡母兔和12周齡公、母兔的血清中GLU含量，且各周齡公兔與母兔血清中GLU含量無明顯差異。4周齡公兔和母兔血清中CHOL含量均顯著高于8周齡和12周齡公母兔CHOL含量，且4周齡公兔血清中CHOL含量顯著高于4周齡母兔血清中CHOL含量，而8周齡和12周齡兔CHOL含量無明顯差異。血清中TG含量在不同周齡及性別的皖南黃兔間均無差異。

表1 不同周齡皖南黃兔血糖和血脂生化指標比較Table 1 The comparison of blood glucose and lipids of Wannan yellow rabbits at differentweeks

2.2 不同周齡皖南黃兔血清蛋白及含氮代謝物分析

如表2所示，4周齡公兔和母兔血清中TP含量均顯著低于8周齡和12周齡公兔和母兔血清中TP含量，且4周齡和8周齡兔血清中TP含量在不同性別間存在顯著差異，而12周齡公兔與母兔間無明顯差異。4周齡公兔和母兔血清中ALB含量均顯著低于8周齡兔和12周齡公兔血清中ALB含量，而8周齡和12周齡兔血清中ALB含量無明顯差異，且各周齡公母兔之間血清中ALB含量差異不顯著。4周齡和8周齡兔血清中CREA含量顯著低于12周齡兔，而4周齡和8周齡兔血清中CREA含量無明顯差異，且各周齡公母兔之間血清中CREA含量差異不顯著。4周齡公兔血清中UREA含量顯著高于4周齡母兔及其他周齡公兔和母兔，而8周齡和12周齡公兔和母兔血清中UREA含量無明顯差異。

表2 不同周齡皖南黃兔血清蛋白及含氮代謝物水平分析Table 2 Analyses of serum protein and metabolites containing nitrogen of W annan yellow rabbits at different weeks

2.3 不同周齡皖南黃兔血清肝功能相關酶分析

對不同周齡、性別皖南黃兔血清中ALT和AST分析發現，4周齡公兔血清中ALT含量顯著低于8周齡和12周齡皖南黃兔，而4周齡母兔的血清中ALT含量顯著低于8周齡公兔和12周齡母兔。8周齡和12周齡兔血清中ALT含量無明顯差異，且各周齡公母兔之間血清中ALT含量差異不顯著。血清中AST含量在不同周齡及性別的皖南黃兔間均無明顯差異（表3）。

表3 不同周齡皖南黃兔肝功能相關酶水平分析Table 3 Analyses of the liver-associated enzyme of W annan yellow rabbits at different weeks

3 討論

血液中含有許多與動物生命活動密切相關的生化成份，它們的含量變化不僅可以反映動物機體的健康狀況，作為動物許多疾病診斷的重要依據，而且可以反映不同品種、性別、年齡動物的生理特征［6-7］。血液生化指標的波動范圍是各種動物特有的生物學特性參數［7］。本研究通過對血清中血糖和膽固醇指標測定發現，皖南黃兔血清中GLU和CHOL含量在4周齡時最高。血糖是能量代謝中最主要的功能物質，表明皖南黃兔年齡較小時以能量利用為主。因此，在皖南黃兔周齡較小時，飼料中應適當添加葡萄糖以保證能量供應。CHOL具有重要的生理作用，而過量攝入CHOL則會影響人類健康。本研究表明，年齡可以影響血清中GLU和CHOL含量，這與Dolka等［8］研究結果一致。血液膽固醇含量與肌肉膽固醇含量呈極顯著正相關［9］，因此，血液膽固醇含量也是評價肉質的指標之一。本研究中8周齡和12周齡皖南黃兔血清低膽固醇含量說明該品種肉質優良。

血清中TP和ALB含量是反映動物體內蛋白質和氨基酸代謝正常與否的指標，在一定程度上代表了動物對蛋白質的消化吸收程度及機體對蛋白質的合成代謝狀況［10-11］，TP和ALB也是反映肝臟合成功能的主要指標［12］。本研究表明，隨著皖南黃兔生長發育，血清中TP和ALB含量均升高，說明皖南黃兔周齡較大時以蛋白利用為主，機體蛋白質的吸收和代謝增強，飼料營養充足。性別只影響4周齡和8周齡皖南黃兔血清中TP含量，不影響血清中ALB含量。CREA是肌肉收縮時的能量來源和儲存形式，尹秀玲等［13］研究發現，塞北兔血清中的CREA含量要顯著高于獺兔（P＜0.05），這可能是由于塞北兔是大型肉兔，能量消耗比較大所致。本研究中，12周齡皖南黃兔血清中CREA含量顯著高于4周齡和8周齡皖南黃兔血清中CREA，說明隨著周齡的增大，肌肉更發達，能量消耗增大，性別對皖南黃兔血清中CREA含量無影響。UREA是動物體內蛋白氮代謝主要終產物，能較為準確的反映體內蛋白代謝水平。臨床上，血清尿素氮是衡量腎功能的重要指標，由肝臟合成經腎臟排出，故也能反映機體肝腎機能的狀態［14］。4周齡公兔血清中UREA高，表明其蛋白質的分解速率較快，4周齡母兔與其他周齡公母兔血清中UREA含量無差異，說明機體代謝機能和肝腎機能狀態穩定。

ALT和AST在氨基酸的分解與合成中起重要作用，與生長發育速度和生產性能有較強的相關性［15］。本研究中4周齡、8周齡和12周齡皖南黃兔血清中AST的含量無顯著差異，而皖南黃兔血清中ALT含量隨著周齡的增大而增加，可能與皖南黃兔隨著周齡增長生長代謝越來越旺盛有關。性別不影響皖南黃兔血清中ALT和AST的含量。

血清生化指標不僅能反映不同周齡和性別皖南黃兔的生長發育、生命活動和新陳代謝等基本情況特征，同時也體現出機體健康狀況與表型之間的相關性。Nazifi等［16］研究表明，性別顯著影響動物血液生化指標。本研究表明，性別主要影響4周齡皖南黃兔TP、CHOL、UREA和8周齡TP水平，對其他指標無顯著影響。周齡主要影響皖南黃兔GLU、CHOL、UREA、TP、ALB、CREA和ALT等指標，且從本研究結果可以看出，家兔周齡較小時以能量利用為主，而周齡較大時以蛋白利用為主。因此，在選育過程中要根據生長發育階段特點科學飼喂，充分發揮皖南黃兔遺傳特性。