李云海 李潤菊 陳麗華



摘要? ? 為了培育出健壯的紫皮石斛試管種苗,本試驗以經過叢芽誘導培養的試管苗為材料,在MS培養基中添加0.4 mg/L 6-BA的情況下,設置不同濃度的NAA,以篩選出適宜壯苗的NAA濃度。結果表明,在MS+6-BA 0.4 mg/L+NAA 2.0 mg/L培養基條件下,即NAA濃度為2.0 mg/L時,紫皮石斛試管苗的壯苗效果最佳。
關鍵詞? ? 紫皮石斛;組織培養;壯苗;NAA濃度
中圖分類號? ? S567.23+9? ? ? ? 文獻標識碼? ? A
文章編號? ?1007-5739(2019)15-0065-01
紫皮石斛(Dendrobium devonianum Paxt.)是蘭科石斛屬中以齒瓣石斛為代表的一類植物,因其莖為紫色而得名。紫皮石斛具有滋陰清熱、益胃生津,潤肺止咳和增強免疫力等功效。石斛為常用中醫藥材,以鐵皮石斛的藥用價值最高,紫皮石斛次之[1]。但與鐵皮石斛相比,紫皮石斛更容易生長,產量較高,多糖含量高,可達到鐵皮石斛的60%。
近年來,云南省保山、臨滄、德宏、思茅等山區的林下人工或半人工栽培石斛已成為了當地農民脫貧致富的重要產業之一,其中所用品種多數為紫皮石斛,因而對紫皮石斛優質種苗的需求量較大[2]。有研究報道,在石斛試管苗壯苗與生根培養試驗中,培養基的激素配比必須適當,才能達到較好的壯苗效果[3]。為了培育出紫皮石斛健壯的試管種苗以提高其移栽成活率,本試驗采用經過叢芽誘導培養的試管苗為材料,在MS中添加0.4 mg/L 6-BA的前提下,設置不同濃度的NAA進行對比,擬從中篩選出適宜培育壯苗的NAA濃度,為實驗室或工廠化紫皮石斛試管育苗提供參考。
1? ? 材料與方法
1.1? ? 試驗設計
試驗共設4個處理,各處理的培養基配方為MS+0.4 mg/L 6-BA+(1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L)NAA+蔗糖30 g/L+瓊脂6 g/L(pH值5.8),即各處理NAA的濃度分別為1.0 mg/L、1.5 mg/L、2.0 mg/L、2.5 mg/L。
1.2? ? 試驗實施
把同一批經過叢芽誘導后且長勢相當的紫皮石斛試管苗切分成3~4苗的小叢,然后接種到4個不同處理的壯苗培養基上,每個處理接種4瓶,每瓶接種4小叢。培養溫度為23 ℃左右,光照強度1 500~2 000 lx,光照時間12 h/d。培養50 d后,測定各處理試管苗叢的株高、莖粗、葉片數、葉寬等生理指標,并進行生物統計學分析[4]。
2? ? 結果與分析
2.1? ? 不同處理對植株高度的影響
由表1可知,紫皮石斛的平均株高隨NAA濃度的增長呈現先升高后降低的趨勢,且在濃度為2.0 mg/L時平均株高達到峰值(5.83 cm)。經方差分析可知,濃度為2.0 mg/L處理與濃度為1.0、1.5、2.5 mg/L處理的株高差異達到極顯著水平,濃度為1.0、1.5、2.5 mg/L處理之間的株高差異不顯著。說明當NAA濃度為2.0 mg/L時,最適合紫皮石斛試管苗的株高生長。
2.2? ? 不同處理對植株葉片數的影響
由表2可知,各處理植株的平均葉片數隨NAA濃度的增長呈先上升后下降的趨勢,在濃度為2.0 mg/L時平均葉片數最大。進行單因素方差分析和多重比較后可得出,濃度為2.0 mg/L處理與濃度為1.0、2.5 mg/L處理之間的差異達到極顯著水平,與濃度為1.5 mg/L處理之間差異不顯著。說明NAA濃度為2.0 mg/L時,最適合紫皮石斛試管苗葉片數的增加。
2.3? ? 不同處理對植株葉寬的影響
由表3可知,各處理的平均葉寬隨著NAA濃度的增加呈先升高后降低的趨勢,且在NAA濃度為2.0 mg/L時平均葉寬達到峰值(0.58 cm)。方差分析顯示,濃度為2.0 mg/L處理與濃度為1.0、2.5 mg/L處理之間的差異達到極顯著水平,與濃度為1.5 mg/L處理之間差異不顯著。由此說明,NAA濃度為2.0 mg/L時,最適合紫皮石斛試管苗植株葉片的生長。
2.4? ? 不同處理對植株莖粗的影響
由表4可知,當NAA濃度為2.0 mg/L時,平均莖粗達到最大值。但經方差分析得出,各處理間的差異不顯著,說(下轉第68頁)
明NAA在這一區段的濃度對紫皮石斛試管苗的植株莖粗的影響差異不大。雖然各處理濃度之間的影響差異不顯著,但從植株外觀看,各處理紫皮石斛試管苗的莖粗比剛接種進入的起始苗粗壯,所以仍可認為達到了較好的壯苗效果。
3? ? 結論與討論
試驗結果表明,在MS中添加0.4 mg/L 6-BA的情況下,NAA的濃度為2.0 mg/L時,對紫皮石斛試管苗的壯苗效果最好,具體體現在對試管苗株高、葉片數、葉片寬度等方面具有顯著促進作用。總體表現為,隨著NAA濃度的升高,上述4項生理指標都呈現出先增加后降低的趨勢,說明適宜濃度的NAA有利于紫皮石斛試管苗的壯苗培養,濃度過高或過低都達不到理想的壯苗效果[5-6]。
4? ? 參考文獻
[1] 中國人民藥典委員會.中國藥典(一部)[M].北京:人民衛生出版社,1985:75.
[2] 起建凌,楊生超,盧迎春.龍陵縣紫皮石斛產業化發展研究[J].云南農業大學學報(社會科學版),2013(4):1-5.
[3] 饒雪梅,趙仁發,劉暢慶,等.鐵皮石解試管苗壯苗生根培養探究[J].北京農業,2013,6(2):37-38.
[4] 李云海,陳麗華,張志豪.不同濃度NAA對紫皮石斛試管苗生根的影響[J].現代農業科技,2018(4):80.
[5] 祁永瓊,陳志遠,李開云,等.紫皮石斛組培技術的優化研究[J].北方園藝,2012(5):139-142.
[6] 劉會清,張愛香,常美花,等.紫皮石斛蘭組織培養體系的建立[J].北方園藝,2007(10):192-193.