沸石粉和酵母細胞壁對仔雞黃曲霉毒素感染的防治作用

李 新，劉傳輝，李 凌

（商丘市畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測檢驗中心，河南商丘 476100）

黃曲霉毒素是由曲霉屬真菌產(chǎn)生的一類真菌毒素，可在家禽飼料中檢出。黃曲霉毒素的主要形式有B1、B2、G1和G2，其中黃曲霉毒素B1（AFB1）是原料和飼料中最常見的毒素（王磊等，2010）。飼料黃曲霉毒素污染會造成肉雞養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟損失，包括生長、飼料轉化率降低、死亡率增加、腿部問題和對胴體品質(zhì)的影響（石達友等，2011）。黃曲霉毒素在家禽中會引起代謝變化，并與肝臟損傷、消化酶活性降低和免疫抑制有關，同時黃曲霉毒素會影響肝臟相關基因的表達（呂武興等，2013）。隨著全球糧食短缺和國際農(nóng)產(chǎn)品貿(mào)易的增加，霉菌毒素污染已成為全球動物生產(chǎn)亟待解決的問題。Binder等（2007）進行的一項調(diào)查顯示，亞太地區(qū)超過1/3的谷物被霉菌毒素污染。沸石粉和改良的酵母細胞壁用于吸附黃曲霉毒素在反芻動物體內(nèi)的效果存在差異（Kutz等，2009）。酵母細胞壁的葡聚糖部分是其活性成分，可以與真菌毒素分子相互作用（Yiannikouris等，2004）。作者假設，不同類型的吸附劑對飼料中的黃曲霉B1脫毒效果不同，可以防治雞的黃曲霉病，因此，本研究旨在評估兩種吸附劑沸石粉與沸石粉+酵母細胞壁預防肉雞黃曲霉毒素的效果。

1 材料與方法

1.1 試驗日糧與分組 試驗將550只1 d肉仔雞隨機分為11組，每組5個重復，每個重復10只雞。11個處理中包括3個沒有添加吸附劑的日糧（含0、1和 2 mg/kg黃曲霉毒素 B1），8個處理組日糧含1或2 mg/kg黃曲霉毒素B1，添加沸石粉或沸石粉+酵母細胞壁（購自諾偉司）。試驗共進行21 d，雞只自由采食和飲水，基礎日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.2 日糧分析與采樣 試驗各組日糧采用HPLC法對黃曲霉毒素B1含量進行定量分析，每天記錄肉雞死亡和淘汰數(shù)量，試驗結束后分析肉雞采食量、體增重、料重比和死亡率。

1.3 樣品分析 試驗結束后，每個重復隨機選擇4只雞，頸靜脈采血，分離血清。之后對雞只進行屠宰，收集肝臟，參考Hoerr（2003）的研究方法對肝臟進行病變評分。血清樣品用于分析葡萄糖、尿素氮、白蛋白、總蛋白、球蛋白、鈉、鉀、氯含量，以及谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶和谷氨酰轉移酶的活性。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS軟件多因素方差分析，日糧黃曲霉毒素B1水平和吸附劑種類及水平為主效應，采用Tukey法進行多重比較，同時研究主效應之間對各指標影響的交互作用，P＜0.05為差異顯著。

2 結果與分析

2.1 日糧黃曲霉毒素B1含量分析 由表2可知，本試驗分析了日糧中橘霉素、T2毒素、嘔吐毒素、赭曲霉毒素A、伏馬毒素、玉米赤霉烯酮和黃曲霉毒素B1，其中T2毒素的檢測量在1 mg/kg以下，橘霉素、T2毒素、嘔吐毒素、伏馬毒素、玉米赤霉烯酮含量在0.5 mg/kg以下，而赭曲霉毒素A含量在0.05 mg/kg以下（數(shù)據(jù)未列出），試驗檢測的黃曲霉毒素B1含量與設計值無顯著差異。

2.2 吸附劑對感染黃曲霉毒素B1肉雞生長性能的影響 由表3可知，在21 d的試驗期間，對照組、1和2 mg/kg黃曲霉毒素B1組采食量分別是1046、919和 753 g，增重分別是 817、732和 642 g，均顯著高于其他組（P＜0.05）。2 mg/kg黃曲霉毒素B1組肉雞較對照組采食量只有72%，增重只有78%。隨著日糧黃曲霉毒素B1含量的增加，死亡率相應升高，其中對照組、1和2 mg/kg黃曲霉毒素B1組死亡率分別是4%、12%和28%（P＜0.05）。各組對肉雞試驗21 d料重比的影響無顯著差異（P＞0.05）。黃曲霉毒素B1和吸附劑水平對肉雞采食量和增重影響表現(xiàn)為顯著交互效應（P ＜ 0.05）。

表2 各處理黃曲霉毒素B1含量

表3 吸附劑對感染黃曲霉毒素B1肉雞?生長性能的影響

2.3 吸附劑對感染黃曲霉毒素B1肉雞肝臟重量和病變評分的影響 由表4可知，隨著日糧黃曲霉毒素B1含量的增加，肉雞肝臟相對重量也表現(xiàn)為增加。2 mg/kg黃曲霉毒素B1組肉雞肝臟重量是對照組的1.6倍（P＜0.05）。2 mg/kg黃曲霉毒素B1組添加沸石粉顯著降低了肝臟重量（P＜0.05），但沸石粉+酵母細胞壁組顯著提高了肝臟體重（P＜0.05）。0.2%較0.1%吸附劑組有降低肝臟重量的趨勢（P=0.07）。肉雞飼料2 mg/kg黃曲霉毒素B1日糧較對照組和其他組顯著提高了肝臟病變評分（P＜0.05）。1和2 mg/kg黃曲霉毒素B1組添加0.2%沸石粉與對照組對肝臟病變評分的影響無顯著差異（P＞0.05），較2 mg/kg黃曲霉毒素B1組不添加吸附劑顯著降低了肝臟病變評分（P＜0.05）。

表4 吸附劑對感染黃曲霉毒素B1肉雞肝臟重量和病變評分的影響

2.4 吸附劑對感染黃曲霉毒素B1肉雞血清代謝物含量的影響 由表5可知，與對照組相比，隨著日糧黃曲霉毒素B1含量的升高，血清葡萄糖、白蛋白、總蛋白、球蛋白、堿性磷酸酶、鈣和磷含量顯著降低（P＜0.05），各組對血清谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、谷氨酰轉移酶、磷酸肌酸激酶、尿素氮、鈉和氯含量的影響無顯著差異（P＞0.05）。黃曲霉毒素B1和吸附劑添加水平對血清堿性磷酸酶和鉀水平的影響表現(xiàn)為顯著交互作用（P＜0.05）。與沸石粉+酵母細胞壁組相比，沸石粉組顯著提高了血清白蛋白、總蛋白、球蛋白、堿性磷酸酶、葡萄糖、鉀、鈣和尿素氮含量（P＜0.05）。

3 討論

霉菌毒素污染對畜牧業(yè)會造成很大的經(jīng)濟損失，同時毒素污染也是一個食品安全問題，因為霉菌毒素會殘留在肉、蛋和奶中。家禽中霉菌毒素最顯著的經(jīng)濟成本是降低生長速度，提高死亡率，這在本試驗結果中也得到證實。黃曲霉毒素B1對飼料轉化率的影響可能是由于霉菌毒素影響適口性，排斥飼料采食，這可能是一種機體的自我保護機制（Rauber等，2007）。本試驗結果發(fā)現(xiàn)，沸石粉可以緩解黃曲霉毒素B1對采食量的抑制，使1 mg/kg黃曲霉毒素B1組采食量可以恢復到對照組的90%，但對2 mg/kg黃曲霉毒素B1組采食量無顯著影響。沸石粉+酵母細胞壁對黃曲霉污染日糧特別是高劑量污染組的脫毒效果不明顯，可能與酵母細胞壁對毒素結合的飽和度或束縛能力有限，以及酵母細胞壁的濃度和劑量有關，這與Kutz等（2009）在奶牛上的研究結果一致。其發(fā)現(xiàn)112和170 μg/kg黃曲霉B1污染日糧中添加0.5%沸石粉+酵母細胞壁對牛奶中殘留的黃曲霉毒素B1含量無顯著影響。

肝臟是黃曲霉毒素B1解毒的主要器官，也是主要的靶器官。采食黃曲霉毒素B1達到2 mg/kg的家禽肝臟呈蒼白色，肝臟相對重量增加一倍，因為受損肝臟合成和分泌功能蛋白較少（Miazzo等，2000）。慢性霉菌毒素中毒可以通過確定血清生化指標的變化來判定（Oguz等，2000）。采食黃曲霉毒素B1污染日糧的家禽血糖濃度降低，這可能是與飼料攝入量減少，或與碳水化合物利用有關酶活性降低有關。Fernandez等（1994）研究發(fā)現(xiàn)，2.5 mg/kg 黃曲霉毒素B1日糧組使蛋雞血漿谷丙轉氨酶活性下降36%。本研究結果發(fā)現(xiàn)，肉雞采食含黃曲霉毒素B1的飼料，其血清總蛋白、白蛋白和球蛋白（蛋白質(zhì)合成指標）的濃度降低。血清生化指標結果與生長數(shù)據(jù)的變化基本一致，而吸附劑部分恢復了與黃曲霉毒素B1污染相關的血清生化指標。在兩個黃曲霉毒素B1污染水平下，沸石粉比沸石粉+酵母細胞壁更有效地恢復受損血清生化指標。此外，在恢復白蛋白、總蛋白和球蛋白合成方面，高水平的吸附劑比低水平吸附劑更有效，這表明，作為黃曲霉毒素感染的一個指標，血清生化指標更為敏感，可用作臨床診斷的一個重要指標。

表5 吸附劑對感染黃曲霉毒素B1肉雞血清代謝物含量的影響

4 結論

日糧黃曲霉B1毒素污染顯著降低了肉雞采食量、體增重，導致高死亡率，同時導致肉雞肝臟增大，肝功能受損，血清蛋白、鈣、磷含量和堿性磷酸酶活性降低。在本試驗條件下，沸石粉和沸石粉+酵母細胞壁均能有效緩解低黃曲霉毒素B1污染水平（1 mg/kg）的負面影響，且沸石粉對2 mg/kg 黃曲霉毒素B1的緩解作用強于酵母細胞壁。