超聲聯合AKR1B10在甲狀腺結節良惡性鑒別中的應用

彭旭紅 李佳 張健

【摘 要】：目的：探討超聲聯合AKR1B10在甲狀腺良惡性結節鑒別中的作用。方法：利用超聲診斷甲狀腺結節的良惡性特征;用免疫組織化學檢測36例甲狀腺病理組織中AKR1B10的表達水平（表達評分）;分析36例甲狀腺結節患者的超聲檢查與AKR1B10表達評分聯合診斷甲狀腺結節性質，以病理診斷結果為金標準，評價超聲檢查、AKR1B10檢測及聯合診斷甲狀腺結節良惡性的應用價值。結果：單用超聲診斷甲狀腺癌的準確率分別是75%（27/36）;單用腫瘤標志物AKR1B10診斷甲狀腺腫瘤的準確率為75%（27/36）;超聲聯合腫瘤標志物AKR1B10檢查診斷甲狀腺腫瘤的準確率為97.20%（35/36），顯著高于單獨超聲或單獨AKR1B10檢測。結論：超聲聯合腫瘤標志物AKR1B10檢查可提高甲狀腺腫瘤診斷的準確度、特異性，AKR1B10有望作為分子標志物，為甲狀腺乳頭狀癌的臨床診斷和治療提新思路。

【關鍵詞】：甲狀腺腫瘤;超聲;AKR1B10

【中圖分類號】R876【文獻標識碼】B【文章編號】1672-3783（2019）10-03--01

當代社會由于環境問題和生活壓力越來越大，甲狀腺結節發生率越來越高。甲狀腺結節是指在甲狀腺內的腫塊，包括增生性結節性甲狀腺腫、甲狀腺良性腫瘤、甲狀腺囊腫、甲狀腺癌等。甲狀腺癌發病率呈逐漸上升趨勢，甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid carcinoma， PTC）是最常見的病理類型。甲狀腺良惡性鑒別是甲狀腺結節治療的關鍵，診斷的金標準是病理組織診斷。病理活檢之前判斷甲狀腺良惡性對發現結節后的下一步診療非常重要。超聲醫學診斷在甲狀腺良惡性鑒別中具有重要的作用。另外，腫瘤標志物在實體腫瘤診斷方面具有重要的臨床意義，目前沒有甲狀腺癌腫瘤標志物應用到臨床，因此甲狀腺乳頭狀癌特異性腫瘤標志物的確立，以及可靠、可行的檢測手段的建立，對臨床提高確診率，改善甲狀腺癌的治療具有重要意義。

醛酮還原酶1B10（aldo-Keto reductase family 1 B10， AKR1B10）是醛酮還原酶超家族成員，在胃腸道正常上皮細胞內高表達，在胃腸道腫瘤組織中低表達;在多種非胃腸道實體腫瘤如乳腺癌、肝細胞癌、吸煙導致的非小細胞肺癌等腫瘤組織中高表達。我們前期研究發現AKR1B10是在甲狀腺癌組織中高表達，與淋巴結轉移正相關。AKR1B10是經溶酶體非經典途徑分泌的分泌性蛋白，是潛在的腫瘤血清標記物及防治靶標。AKR1B10在甲狀腺結節良惡性鑒別以及能否作為甲狀腺癌血清標志物未有文獻報道。因此，本研究探討AKR1B10在甲狀腺結節良惡性鑒別中的意義，并分析其聯合超聲鑒別甲狀腺結節良惡性的應用價值，為臨床診斷提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2013年1月至2015年7月到郴州市第一人民醫院就診的36例甲狀腺結節患者的病理組織樣本，其中良性甲狀腺結節（結節性甲狀腺腫、甲狀腺濾泡性腺瘤）15例，甲狀腺乳頭狀癌21例。納入標準：（1）患者未接受針對甲狀腺的治療;（2）有病理診斷結果;（3）有超聲診斷結果。

1.2 AKR1B10免疫組化方法及結果評判

將用福爾馬林浸泡的甲狀腺組織包埋在蠟塊中，用切片機切成組織薄片，經烤干、脫蠟、脫水后;用3%H2O2滅活組織中內源性過氧化物酶，用pH為6.0的枸櫞酸緩沖液修復抗原抗原;用BSA封閉30 min。用兔抗AKR1B10抗體（實驗室自己制備）孵育過夜，用1：1000的羊抗兔二抗37 ℃孵育1小時;然后用DAB顯色，用蘇木素復染，最后封片，顯微鏡觀察AKR1B10的染色情況。

每張切片于高倍鏡（40×）下選取5個相應病理組織視野，每個視野采用染色強度（無色為0分，淡黃色1分，深黃色2分，黃褐色3分）和染色面積（0-5%為0分，5-10%為1分，10-50%為2分，50%以上為3分）雙重指標綜合判斷陽性表達情況，兩項指標評分相乘，結果<2為計為“-”，2～3計為“+”，4～5計為“++”，6分以上計為“+++”。為降低人為誤差，由兩人分別在鏡下評分，結果取二人打分的平均值，對評分差異較大的結果，請示病理科專家會診。

1.3 超聲診斷方法

選用飛利浦IU22超聲診斷儀，探頭頻率為9-12 MHz?；颊唧w位為仰臥位，使其頭部向下、肩膀抬高，確保甲狀腺與結節的充分暴露。對患者實施彩色超聲檢查，對甲狀腺結節的成分、性狀、回聲、邊緣、強回聲以及甲狀腺周邊及內部血流情況等進行評分（見表1），再進行甲狀腺結節超聲分級（TI-RADS）評分，評分≥4分超聲診斷為惡性。

1.4 觀察指標

對比病理診斷結果，分析評價超聲檢查、AKR1B10檢測及二者聯合診斷甲狀腺結節良惡性的應用價值。以病理診斷結果為金標準，評估三種診斷方法的準確度、敏感度、特異度、陽性預測值、陰性預測值。

1.5 統計學方法

采用SPSS 18.0軟件進行數據分析。其中AKR1B10在不同甲狀腺病理組織中的表達差異采用卡方檢驗，當理論頻數小于1時，采用Fisher確切概率法;AKR1B10表達水平與臨床病理參數之間的關系采用相關性分析。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 AKR1B10在甲狀腺乳頭狀癌中的表達

AKR1B10在PTC組織內主要表達于乳頭狀細胞的胞漿內，不均勻分布，細胞染色深淺不一（圖1）。

A～D分別表示AKR1B10在甲狀腺癌組織免疫組化評分的四個等級，依次是（A）、+（B）、++（C）和+++（D），染色強度逐漸增強

2.2 AKR1B10在甲狀腺不同病理組織中的表達

AKR1B10在正常甲狀腺組織、結節性甲狀腺腫組織、甲狀腺濾泡性腺瘤中不表達或低表達（圖2A-C），在甲狀腺乳頭狀癌中表達較高（圖2D）。

正常甲狀腺組織（A），結節性甲狀腺腫（B），甲狀腺濾泡性腺瘤（C），甲狀腺乳頭狀癌（D）的免疫組化染色結果。

2.3 AKR1B10表達水平在甲狀腺乳頭狀癌及甲狀腺良性病變中的差異分析

AKR1B10在甲狀腺乳頭狀癌陽性表達率最高（88.0%），在橋本甲狀腺炎內的陽性表達率次之（82.5%），在結節性甲狀腺腫、甲狀腺濾泡性腺瘤、癌旁組織和甲狀腺正常組織內低表達（陽性率分別為22.5%、32.5%、28.6%、38.5%）。PTC與橋本甲狀腺炎的比較不具有統計學差異（χ2=0.218 ，p>0.05），與結節性甲狀腺腫、甲狀腺濾泡性腺瘤、PTC癌旁組織、正常甲狀腺組織比較，差別均有顯著性（p<0.05）。

2.4 單用及聯合超聲及腫瘤標志物AKR1B10檢查診斷甲狀腺腫瘤的結果

單用超聲診斷甲狀腺腫瘤的準確率為75%（27/36），單用腫瘤標志物AKR1B10診斷甲狀腺腫瘤的準確率為75%（27/36），超聲聯合腫瘤標志物AKR1B10檢查診斷甲狀腺腫瘤的準確率為97.20%（35/36），見表2。

2.5 單用及聯合腫瘤標志物AKR1B10及超聲檢查對腫瘤的診斷效果評價

單用超聲診斷甲狀腺腫瘤的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值 分別是90.48%、53.33%、73.08%、80.00%，單用腫瘤標志物AKR1B10診斷甲狀腺腫瘤的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值分別是85.71%、60.00%、75.00%、75%，超聲聯合腫瘤標志物AKR1B10檢查診斷甲狀腺腫瘤的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值分別是100%、93.33%、95.5%、100%，見表3。

3 討論

本研究對比分析了超聲、腫瘤標志物AKR1B10檢查以及聯合超聲與腫瘤標志物AKR1B10檢查診斷甲狀腺結節良惡性的應用價值，結果顯示聯合兩種方法診斷的準確度、特異性顯著高于超聲和AKR1B10檢測。由此提示，在甲狀腺結節良惡性診斷中，聯合超聲與腫瘤標志物AKR1B10檢查可發揮較高的應用價值，有助于提高臨床診斷的準確性。下一步我們將研究AKR1B10作為甲狀腺癌血清標志物的可能性，并開發血清診斷試劑盒，將血清AKR1B10濃度聯合超聲檢查應用到甲狀腺良惡性結節診斷與鑒別診斷中，提高甲狀腺癌臨床診斷靈敏度、特異度和準確度。

參考文獻

韓婧，康驊：甲狀腺癌的發病現狀及影響因素[J].實用預防醫學，2018，25（07）：894-897.

雷蓓：超聲新技術在甲狀腺良惡性結節診斷中的價值[J].影像研究與醫學應用，2019， 3（06）：99-100.