木犀草素的測定與分析

黃酮類化合物在植物界分布很廣，是一類重要的天然有機化合物，約20%的植物都含有黃酮類化合物，例如銀杏葉中富含蘆丁，山楂中槲皮素含量較高，木犀草素是白毛夏枯草或青蘭的有效成分。常見的黃酮類物質有蘆丁、槲皮素、桑色素，木犀草素等。

1、木犀草素的介紹

木犀草素為黃色針狀結晶，熔點228℃～230℃，分子式為C15H10O6，分子量為286.24，木犀草素化學名為3，4，5，7-四羥基黃酮。因最初從木犀草科木犀草屬草本植物木犀草的葉、莖、枝中分離出而得名，是一種天然色素組分。可溶于甲醇、乙醇、乙醚等有機溶劑及堿性溶液，微溶于熱水，溶于濃硫酸生成鋅鹽，呈暗紅黃色。木犀草素分子因存在酚羥基，故其水溶液呈微弱酸性，木犀草素能與鐵、鎂、鈣、銅、鋁、鋯等金屬離子生成帶色絡合物，是一種重要黃酮化合物，在自然界以糖甙型或游離型存在。木犀草素在自然界分布廣泛，目前發現主要存在于金銀花、菊花、荊芥、白毛夏枯草、洋薊、紫蘇屬、黃芩屬等天然藥物和芹菜、甜椒、辣椒、落花生等蔬菜果實中，其它如橄欖油和紅酒及野鳳仙花、百里香草、唇形科植物筋骨草等也含有木犀草素。

2、木犀草素生理功能

（1）抗氧化：體內存在許多清除自由基和抑制自由基物質，使體內自由基生成和消除維持相對平衡。以木犀草素等為代表黃酮類化合物具有自由基清除劑作用，它主要通過酚羥基與自由基反應生成較穩半醌式自由基，從而終止自由基鏈式反應。

（2）抑菌：一定濃度木犀草素可抑制葡萄球菌、枯草桿菌、啤酒酵母和大腸桿菌生長，對卡他菌、白色念珠菌、變形桿菌也有抑制作用，可用作食品防腐保鮮劑。

（3）抗炎：木犀草素具有抗炎癥作用，炎癥發生與體內T細胞、B細胞、NK細胞、巨噬細胞等密切相關，木犀草素等黃酮類化合物抗炎主要通過影響細胞分泌過程、有絲分裂基細胞間相互作用及減少殺傷性T細胞產生而起效。

（4）抗腫瘤：木犀草素誘導腫瘤細胞凋亡作用主要是通過靶向調節細胞生長中信號轉遞、基因表達、酶活化或抑制而實現，有較廣抗癌譜。木犀草索抗腫瘤機制，既可直接作用于腫瘤細胞干擾細胞代謝，抑制細胞生長，誘導或增敏細胞凋亡;還可通過增強機體免疫功能，發揮抗腫瘤作用，是一種非常有前途的潛在抗腫瘤藥物，可減少結腸癌和卵巢癌發病率。

3、黃酮類化合物的分析方法

紫外光譜是分析黃酮化合物的重要手段，該方法樣品需要量少，用特殊試劑使黃酮母核上一個或幾個官能團發生反應，大大增加了從紫外光譜上得到的結構信息的數量。大多數黃酮類化合物的紫外光譜有兩個主要吸收峰組成，其中之一出現在240-280nm范圍內（帶Ⅱ），另一個在300-400nm范圍內（帶Ⅰ）。一般來說帶Ⅱ是A環苯酰系統引起，而帶Ⅰ則是B環肉桂酰系統引起。將果茶樣品經由乙醚浸泡除雜，用甲醇索式抽提，并以蘆丁為對照品，采用吸光光度法測定總黃酮的含量。

分光光度法，以蘆丁為標準品，通過三氯化鋁等衍生體系，分別在412nm和499nm處測定枳具子總黃酮含量。采用光譜法在抗壞血酸存在下直接檢測槲皮素，通過優化溶劑、pH 、波長等實驗條件，大大提高了槲皮素的檢測限。基于NaOH 堿性介質中鐵氰化鉀可以直接氧化蘆丁和桑色素產生化學發光，建立了高效液相色譜分離柱，采用化學發光法測定桑葉中蘆丁和桑色素含量，取得了很好的效果。采用電化學檢測毛細管電泳法同時測定了蘆丁和槲皮素，研究了緩沖液濃度、注射時間、檢測電位對測定的影響，并成功用于中草藥中蘆丁和槲皮素的測定。采用β-環糊精修飾區帶毛細管電泳-內標定量法分析槐花和槐米中蘆丁和槲皮素。在優化實驗條件下，蘆丁和槲皮素在7min內得到基線分離。該方法分析實際樣品對槐花和槐米的藥用開發具有重要的參考價值。各種分析方法都發揮了積極的作用，但仍然存在一定問題。一般來說，光譜法雖然簡單，但靈敏度不夠高，容易受到有色物質的干擾;色譜法在多組分分離上具有很大優勢，但是色譜柱的制備一般比較麻煩，而且儀器操作復雜，成本較高。鑒于黃酮類化合物的分子結構中具有電活性基團-酚羥基，特別是B環上的酚羥基，易脫氫失去電子被還原，適宜采用電化學方法進行檢測。該方法成本低、操作簡便、響應迅速、靈敏度高。關于黃酮類的電化學研究正成為人們關注的熱點。以滴汞電極為工作電極，應用線性掃描和循環伏安法研究了蘆丁的電化學行為，以滴汞線性掃描法測定甘草內黃酮的含量，靈敏度及準確度均明顯提高，結果令人滿意。當然，電化學法也存在一些不足，最主要的電極的重復性和穩定性有待提高。尤其是汞電極法，其電極毒性已經使該方法應用逐漸減少。盡管如此，通過采用新材料對電極表面進行修飾，改善電極的穩定性、重復性，提高電極的靈敏度、選擇性，在現有方法的基礎上，化學修飾電極必將發揮重要的作用。

黃酮類化合物在治療各種疾病，改善飲食結構、提高生活質量方面發揮了越來越大的作用。因此，對天然產物和藥品中黃酮類物質的檢測具有很大的實際意義，人們正積極進行這方面的研究。

作者簡介：范娜，出生于1986年5月1日，山東省壽光市人，大學本科，主要研究方向是化工。