中藥鴨公樹子化學(xué)成分研究

1.湘潭醫(yī)衛(wèi)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南 湘潭 411102；2.南方醫(yī)科大學(xué)，廣東 廣州 510515

鴨公樹子為樟科植物鴨公樹(NeolitseachuiiMerr.)成熟的種子。鴨公樹主要分布于長江以南各大省區(qū)，其中以廣東省、廣西省、云南省、湖南省、江西省較為多見。傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為鴨公樹子的功效為行氣止痛、利水消腫，臨床常用于治療胃脘脹痛、腹部水腫[1]。尚未見道有關(guān)鴨公樹子化學(xué)成分的研究報道，其有效的活性成分、作用機(jī)制還不清楚。為了更好地開發(fā)利用鴨公樹子藥材，本研究以干燥處理后的鴨公樹子為材料，經(jīng)過乙醇提取、系統(tǒng)溶劑萃取、柱層析對鴨公樹子藥材的化學(xué)成分進(jìn)行分離及結(jié)構(gòu)鑒定，共分離和鑒定出7個化合物，分別為球松素(化合物1)、銀松素(化合物2)、槲皮素(化合物3)、山柰酚(化合物4)、β-谷甾醇(化合物5)、苯甲酸(化合物6)、對羥基苯甲醛(化合物7)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 DPX-400核磁共振儀(瑞典Bruker公司)；APEX Ⅱ型傅立葉變換離子回旋質(zhì)譜儀(美國賽默飛公司)；X4顯微熔點(diǎn)測定儀(天津廣普光學(xué)儀器有限公司)；RE-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠生產(chǎn))；YZF-6250型真空干燥箱(上海姚氏儀器設(shè)備有限公司)；BPG-9030BH型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海和呈儀器制造有限公司)；SZF-2005B型循環(huán)水式多用真空泵(鞏義市英華儀器有限公司)；J-HH-2A型精密數(shù)顯恒溫水浴鍋(陸冠森生物科技上海有限公司)。

1.2 試劑 柱層析填料Toyopearl HW-40(日本TOSOH公司)；PharmadexLH-20安瑪硅膠H(青島海洋化工廠100-200目)；薄層層析硅膠G(島海洋化工廠)，所用化學(xué)試劑均為分析純(天津市化學(xué)試劑三廠)。

1.3 藥材 研究所用的鴨公樹子藥材采自湖南省郴州市汝城縣，經(jīng)廣東省藥品食品檢驗(yàn)研究院王華主任中藥師鑒定為樟科植物鴨公樹(NeolitseachuiiMerr.)的種子。藥材標(biāo)本保存于南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院中藥標(biāo)本室。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取分離 取干燥鴨公樹子藥材5.0 kg，95%乙醇連續(xù)回流提取2次，第1次加乙醇10倍量回流2 h，第2次加乙醇5倍量回流2 h，分別過濾，合并濾液，濃縮至稠膏至無醇味，稱其重量為398.2 g，依次以石油醚、乙酸乙酯萃取，分別的到石油醚部位(38.4 g)，乙酸乙酯部位(224.6 g)。將乙酸乙酯部位回收溶劑，濃縮，利用硅膠、聚酰胺、Sephadex LH-20等柱層析及制備薄層層析等方法對各部位進(jìn)行分離純化得單體化合物。從鴨公樹子乙酸乙酯部位中共分離得到7個化合物，利用傳統(tǒng)的化學(xué)鑒定法結(jié)合各種光譜技術(shù)鑒定了7個化合物的結(jié)構(gòu)。

2.2 結(jié)果 化合物1～7結(jié)構(gòu)(a.球松素、b.銀松素、c.槲皮素、d.山柰酚、e.β-谷甾醇、f.苯甲酸、g.對羥基苯甲醛),如圖1所示。

化合物2：無色晶體，分子式為C14H12O2，易溶于丙酮。UV(365 nm)顯天藍(lán)色熒光，F(xiàn)eCl3-K3[ Fe(CN)6] 反應(yīng)顯藍(lán)色。EI-MS(m/z)：296(M+)。1H-NMR(Acetone-d6)δ：7.52(2H，d，J=7.3 Hz，H-2′，6′)，7.41(2H，d，J=7.4 Hz，H-3′，5′)，7.11(1H，t，J=7.3 Hz，H-4′)，6.42(2H， d，J=2.0 Hz，H-2，6)，6.29(1H，t，J=2.0 Hz，H-4)。6.93(1H，t，J=6.5 Hz，H-8)。13C-NMR(Acetone-d6)δ：139.5(C-1)，104.3(C-2，6)，158.2(C-3，5)，101.5(C-4)，128.6(C-7)，129.0(C-8)，136.8(C-1′)，128.1(C-2′，6′)，127.1(C-3′，5′)， 127.5(C-4′)，以上數(shù)據(jù)與與報道的銀松素數(shù)據(jù)[ 4]基本一致，鑒定為銀松素。

化合物3：黃色晶體，分子式為C15H10O7，mp312～314 ℃，易溶于甲醇，F(xiàn)eCl3反應(yīng)為陽性，鹽酸-鎂粉(Mg-Hcl)反應(yīng)顯紅色。EI-MS(m/z)：302(M+)。1H-NMR(CDCl3)δ：12.10(1H，s，5-OH)，6.15(1H， d， J=2.4 Hz，H-6)，6.44(1H，d，J=2.4 Hz，H-8)，7.80(1H，d，J=2.5 Hz， H-2′)， 6.90(1H，d，J=8.5 Hz，H-5′)，7.59(H，dd，J=8.5，2.5 Hz，H-6′)。13C-NMR(CDCl3)δ：126.8(C-1)，146.6(C-2)，137.1(C-3)，176.3(C-4)，156.2(C-5)，98.9(C-6)，164.9(C-7)，95.3(C-8)，164.0(C-9)，104.1(C-10)，123.2(C-1′)，114.8(C-2′)，146.1(C-3′，4′)，115.8(C-5′)，122.2(C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5-6]報道基本一致，鑒定為槲皮素。

化合物4：淡黃色粉末，分子式為C15H10O6，mp.274～277 ℃，易溶于甲醇和乙醇。鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽性， 三氯化鐵反應(yīng)陽性， 濃硫酸-α萘酚(Molish)反應(yīng)陰性。EI-MS(m/z)：286(M+)。1H-NM R(DMSO-d6)δ：6.16(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，6.36(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.90 (2H，d，J=8.9 Hz， H-3′，5′)，8.09(2H，d，J=8.9 Hz，H-2′，6′)，5.11(1H，d，J=7.2Hz，H-1′)。13C-NMR(DMSO-d6)δ：148.3(C-2)，135.8(C-3)，179.2(C-4)，161.5(C-5)，99.1(C-6)，165.8(C-7)，94.3(C-8)，126.8(C-1′)，104.3(C-4′)，129.1(C-2′，6′)，114.9(C-3′，5′)。以上光譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7-8]報道的山柰酚基本一致，故鑒定為山柰酚。

化合物5：白色粉末，分子式為C29H50O，mp.138～140 ℃，易溶于丙酮。硫酸-茴香醛反應(yīng)顯紫色。EI-MS(m/z)：414.7(M+)。1H-NM R(CDCl3)δ：3.47(1H，m，H-3)，5.32(1H，m，H-6)，0.63(3H，s，H-18)，1.01 (3H，s，H-19)，0.95(3H，d，J=6.3 Hz，H-21)，0.83(3H，d，J=6.3 Hz，H-27)，0.86(3H，t，J=7.2Hz，H-29)。13C-NMR(CDCl3)δ：36.9(C-1)，31.3(C-2)，71.7(C-3)，42.1(C-4)，141.1(C-5)，121.9(C-6)，31.3(C-7)，31.7(C-8)，49.8(C-9)，36.2(C-10)， 20.4(C-11)，40.2(C-12)，42.1(C-13)，57.2 (C-14)，22.9(C-15)，27.8(C-16)，55.9(C-17)，11.9(C-18)，19.6(C-19)，36.3 (C-20)，18.4(C-21)，34.6(C-22)，25.9(C-23)，46.1(C-24)，28.8(C-28)，12.1(C-29)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9-10]報道的β-谷甾醇數(shù)據(jù)一致，故鑒定化合物5為β-谷甾醇。

化合物6：白色針狀晶結(jié)晶，分子式為C6H5COOH，mp.120～123 ℃，易溶于乙醇和乙醚。EI-MS(m/z)：122(M+)。1H-NMR(Me2CO-d6)δ：7.44(2H，t，J=7.5 Hz，H-3，5)，7.99(2H，d，J=7.5 Hz，H-2，6)，7.65(1H，t，J=7.5 Hz，H-4)。13C-NMR(Me2CO-d6)δ：129.8(C-1)，128.5(C-3，5)，134.9(C-4)，140.1(C-2，6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11-12]報道的苯甲酸一致，故鑒定化合物6為苯甲酸。

化合物7：油狀液體，分子式為C7H6O2，淡黃色，有氣味。1H-NM R(CD3OD)δ：7.77(2H，d，J=9.0 Hz，H-2，6)，6.96(2H，d，J=8.5 Hz，H-3，5)，9.82(1H，s，H-7)。13C-NMR(CD3OD)δ：130.1(C-1)，117.3(C-3，5)，133.2(C-2，6)，165.0(C-4)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13-14]報道的對羥基苯甲醛一致，故鑒定化合物7為對羥基苯甲醛。

3 結(jié)論和討論

研究從中藥鴨公樹子乙酸乙酯部位分離得到7個單體化合物，經(jīng)分析化合物結(jié)構(gòu)類型，其主要為黃酮類、二苯乙烯類、芳香族類、甾體類等；在分離得到的單體化合物中，化合物1、3、4為黃酮類化合物，化合物2為二苯乙烯類化合物，化合物5為甾體類化合物，化合物6和7為小分子芳香族類化合物，所有化合物1～7均為首次從鴨公樹子中分離得到。

現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，球松素能減輕脂多糖對細(xì)胞的損傷，抑制干細(xì)胞成脂分化，對消化性潰瘍疾病(胃潰瘍、十二指腸潰瘍)的防治具有積極的意義[15]。本研究可為進(jìn)一步闡明鴨公樹子藥材藥效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)和建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供一定參考，同時也為鴨公樹子藥材資源的開發(fā)利用提供科學(xué)的依據(jù)。