葡萄糖氧化酶對白羽肉雞生產性能、養分代謝及腸道組織形態的影響

崔細鵬，王 敏，彭 宇

（廣東溢多利生物科技股份有限公司，廣東 珠海 519060）

葡萄糖氧化酶（GOD）是一種利用分子氧催化葡萄糖，氧化生成葡萄糖酸，同時產生過氧化氫的需氧脫氫酶。GOD 應用于動物飼料中，具有降低動物腸道pH、抑制有害菌增殖、促進消化等作用，是一種“綠色”、安全的飼料添加劑。研究表明，添加GOD 100 和200 g·t-1可顯著提高櫻桃谷鴨的平均日增重，降低料重比[1]。而在斷奶仔豬日糧中添加GOD 120～300 U·kg-1對仔豬平均日增重、平均日采食量及料重比均無顯著影響，但顯著改變了仔豬的血清生化指標[2]。由此可知，GOD 作為一種新型飼料酶制劑具有耗氧、殺菌等方面作用，可以提高飼料的養分消化率，維持動物腸道菌群的平衡，降低腹瀉率，提高飼料轉化率，可在一定程度上替代抗生素、益生菌和酸化劑。本研究擬在白羽肉仔雞日糧中添加不同濃度水平的GOD，以考察其對黃羽肉雞生產性能、養分代謝和腸道組織結構的影響。

1 材料與方法

1.1 酶制劑

試驗用GOD為粉狀固體，酶活1 000 U·g-1，由廣東溢多利生物科技股份有限公司提供。GOD 酶活定義為：在37 ℃、pH 6.0的條件下，每min內從過量底物中降解釋放1 μmol 產物所需的酶量定義為1個酶活力單位，即1 U。

1.2 試驗動物與設計

試驗在廣東溢多利生物科技股份有限公司產學研試驗基地進行。選取200 只遺傳背景、批次相同、體重接近的健康1日齡羅斯308白羽肉仔雞（公母混合雛），采用單因子試驗設計，隨機分為4 個試驗組，每個試驗組5 個重復，每個重復10 只（公母各半）。試驗分為前期（1～21 d）和后期（22～42 d）兩個階段，每階段后期進行代謝實驗。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎日糧，試驗組分別在基礎日糧中添加GOD 50、100 和200 U·kg-1。日糧組成及營養水平見表1。

1.3 飼養管理

試驗雞舍為全封閉式，采用3 層立式籠養。進雞前對雞舍設備進行消毒。人工控制光照，試驗期紅外燈供暖，舍內溫度控制：1～3 日齡35 ℃，4～7日齡33 ℃，8～14 日齡30 ℃，15 日齡～試驗結束25 ℃。雞自由采食和飲水，清理糞盤1 次·d-1。飼養期間帶雞噴霧消毒2 次·周-1，按行規免疫程序進行免疫接種。

表1 基礎日糧組成及營養水平

1.4 測定指標與方法

1.4.1 生長性能的測定

分別在試驗開始第1 天和第21、42 天8：00 對各組雞空腹稱重（禁食12 h，僅供飲水），同時稱量各重復剩余飼料重。每日觀察雞只健康狀況，統計死亡率。計算各個階段的平均日采食量、平均日增重、耗料增重比和死亡率。

1.4.2 養分利用率和表觀代謝能的測定

通過外源指示劑法分別于17～21 日齡和38～42日齡進行代謝試驗。分別在14 日齡和35 日齡8：00飼喂加入二氧化鈦（分析純）0.3%的試驗日糧，預飼3 d，期間觀察雞只采食情況，并于17和38日齡8：00 開始收糞，每隔4 h 收糞1 次，收糞3 次·d-1。以組為單位，把每次收集的糞樣混合均勻，挑除其中的羽毛、皮屑等，按糞便量的10%加入濃度為10%的硫酸溶液，混勻放入-20 ℃冰箱保存備用。于21 和42 日齡8：00 結束收糞，收糞期共計4 d。糞樣自然解凍后放置于65 ℃烘箱中烘至恒重，回潮24 h后為風干樣，粉碎過40目篩，混合均勻，裝入樣品袋中密封干燥保存，待測定用。

測定飼料與糞中外源指示劑二氧化鈦的含量，飼料和糞樣中水分、粗蛋白質、粗脂肪、總鈣、總磷和總能含量參照GB/T 6435-2006 飼料中水分和其他揮發性物質含量的測定、GB/T 6436-2002飼料中鈣的測定、GB/T 6437-2002 飼料中總磷的測定分光光度法[3]。計算公式見式1～2。

式中：A1、A2分別代表飼料和糞干物質中總能或營養物質含量；B1、B2分別代表飼料和糞中指示劑的含量[3]。

1.4.3 腸道pH

試驗第43 天，從各組的每個重復分別隨機選取1 只接近改組平均體重的肉雞，頸動脈放血處死，取出十二指腸、空腸和回腸，準確稱量各腸段食糜重量。取各段食糜用1：10 的稀釋比例加入去離子水，用小型振蕩器（250 次·min-1）振蕩混合5 min，測定pH。

1.4.4 腸段組織結構觀察

剝離出十二指腸、空腸、回腸，各自截取中段約3 cm 的腸道組織，用冰冷的生理鹽水緩緩沖洗，浸入pH 7.4的福爾馬林溶液中，用于制作石蠟切片。在光學顯微鏡下觀察，每個切片隨機抽取5個非連續性視野，每個視野統計3組數據，絨毛長度是指絨毛頂端到絨毛基部的長度，隱窩深度是指腸腺底部到兩絨毛之間基部開口處的距離。

1.5 統計分析

試驗數據采用SPSS 16.0 軟件的One-Way ANOVA 方法進行單因素方差分析，Duncan's 法進行多重比較，結果以“平均值±標準誤”表示。

2 結果與分析

2.1 不同添加水平GOD對肉雞生長性能的影響

不同添加水平GOD 對肉雞生長性能的影響見表2。

由表2 可知，添加GOD 對各組肉雞死淘率無影響，試驗期各組肉雞成活率均為100%。與對照組相比，日糧中添加GOD 100 和200 U·kg-1顯著提高肉雞1～21、22～42 和1～42 d平均日增重（P＜0.05）。日糧添加GOD對肉雞1～21 d平均日采食量無顯著影響（P＞0.05），但添加GOD 100 和200 U·kg-1顯著增加22～42 d 平均日采食量（P＜0.05），添加GOD 200 U·kg-1顯著增加1～42 d 平均日采食量（P＜0.05）。日糧中添加GOD 對肉雞22～42 d 耗料增重比無顯著影響（P＞0.05），但添加GOD 100 和200 U·kg-1顯著降低1～21和1～42 d耗料增重比。

2.2 不同添加水平GOD 對肉雞養分代謝利用率和表觀代謝能的影響

不同添加水平的GOD 對肉雞養分代謝利用率和表觀代謝能的影響見表3。

由表3可知，1～21 d添加GOD顯著提高肉雞干物質和表觀代謝能的利用率（P＜0.05），添加GOD 100 和200 U·kg-1顯著提高粗蛋白質的表觀利用率（P＜0.05）。GOD 對1～21d肉雞鈣和磷的利用率無顯著影響（P＞0.05）。22～42 d，添加GOD 100 和200 U·kg-1顯著增加肉雞干物質、粗蛋白質和表觀代謝能利用率（P＜0.05），添加GOD 200 U·kg-1顯著增加鈣的表觀利用率（P＜0.05）。

表2 不同添加水平的GOD對肉雞生產性能的影響

表3 不同添加水平GOD對肉雞養分利用率和表觀代謝能的影響

2.3 不同添加水平葡萄糖氧化酶對肉雞腸道pH 的影響

不同添加水平GOD 對肉雞腸道食糜pH 的影響見表4。

由表4 可知，添加GOD 對肉雞十二指腸和空腸食糜pH 無顯著影響（P＞0.05），但添加200 U·kg-1GOD顯著降低了肉雞回腸食糜pH（P＜0.05）。

2.4 不同添加量的葡萄糖氧化酶對肉雞腸道組織結構的影響

不同添加水平GOD 對肉雞腸道組織形態的影響見表5、圖1～3。

由表5、圖1～3 可知，肉雞日糧中添加GOD 對十二指腸、空腸和回腸的絨毛高度、隱窩深度、絨毛高度/隱窩深度均無顯著影響（P＞0.05）。

表4 不同添加水平GOD對肉雞腸道食糜pH的影響

表5 不同添加水平GOD對肉雞腸道組織形態的影響

圖1 不同添加水平GOD對十二指腸腸道形態的影響

圖2 不同添加水平GOD對空腸腸道形態的影響

圖3 不同添加水平GOD對回腸腸道形態的影響

3 討論

GOD 在動物胃腸道消化酶作用下產生的葡萄糖酸和過氧化氫能通過消耗腸道中的氧氣，通過改善動物腸道微生態平衡和腸道形態，提高動物消化能力，促進動物生長。目前GOD 對黃雞、豬和肉鴨生長性能的影響已有研究，未見在白羽肉雞上報道[1-2,4]。白羽肉雞生長周期短，飼養密度高，因此GOD 能否通過提高營養物質消化率，改善腸道環境和形態來提高肉雞生長性能需要進一步研究。

3.1 添加不同水平的GOD 劑對白羽肉仔雞生產性能的影響

龐家滿等研究結果表明，GOD 制劑對黃羽肉雞的日增重和料重比有顯著影響，添加葡萄糖氧化酶制劑對黃羽肉雞的干物質、有機物質、粗蛋白質、粗脂肪的消化代謝有顯著影響（P＜0.05）[4]。GOD 在動物胃腸道酶解產生的葡萄糖酸可以提升胃的酸性環境、激活胃蛋白酶活性，以及酶解產生的少量過氧化氫和消耗腸道中的氧氣，能有效抑制有害菌、促進有益菌生長、改善動物腸道微生態平衡和腸道形態，從而改善動物腸道健康和消化能力，提高動物對飼料營養物質消化和吸收，促進動物生長。

3.2 不同添加水平的GOD 對肉雞養分代謝利用率和表觀代謝能的影響

養分表觀消化率是衡量飼料營養價值的重要指標。消化率受飼料本身的性質、加工和飼喂方法、動物種類與年齡、測定分析方法等因素影響。GOD在胃腸道內發揮酸化劑的作用，能夠激活胃蛋白酶，加快飼料中粗蛋白質的消化。本試驗發現，飼糧中添加GOD 能夠顯著提高肉雞對干物質、粗蛋白質和總能的消化率，與前人研究結果一致[5]。說明飼糧中添加GOD 能夠提高肉雞對飼糧養分的消化吸收，從而提高生長性能。

3.3 不同添加水平的GOD 對肉雞腸道組織結構的影響

小腸黏膜的上皮絨毛高度和隱窩深度與腸黏膜的吸收能力存在很大的關聯，絨毛變短、隱窩變深說明絨毛萎縮，吸收能力下降絨毛的高度與隱窩深度比值越大說明腸上皮表面積越大，消化和吸收能力越強[6]。本試驗發現，飼料中添加GOD可降低肉雞腸道pH，與對照組相比，3個試驗組十二指腸pH降低2.03%、2.34%、3.75%，差異不顯著（P＞0.05），空腸pH 降低1.43%、2.86%、4.13%，差異不顯著（P＞0.05），回腸pH降低2.47%、5.07%、9.18%，其中處理3 組的回腸pH 與對照組差異顯著（P＜0.05）。試驗各組的十二指腸和空腸的絨毛高度、隱窩深度、絨毛高度/隱窩深度均差異不顯著（P＞0.05），且腸黏膜均結構完整，腸絨毛及隱窩均發育良好，未發現葡萄糖氧化酶對肉雞腸道組織有影響。

4 結論

肉雞日糧中添加GOD 100～200 U·kg-1能顯著降低回腸食糜pH，提高干物質、粗蛋白質、鈣和表觀代謝能利用率，從而提高肉雞生產性能。