乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測

李涓 魏世杰

【摘 要】目的：探討對乙型病毒性肝炎（以下簡稱“乙肝”）行外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測的意義。方法：選取140例乙肝患者及61例體檢志愿者為研究對象，采取流式細(xì)胞儀對研究對象外周血T淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行檢測，分析檢測結(jié)果。結(jié)果：急性乙肝患者在CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+上同體檢志愿者無顯著差異（P>0.05），而慢性乙肝、肝炎肝硬化及慢性重癥肝炎在各項指標(biāo)上均較體檢志愿者低，其中以肝炎肝硬化指標(biāo)降低明顯。結(jié)論：對乙肝患者，行外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測可為乙肝病型判斷提供有利參考。

【關(guān)鍵詞】乙型病毒性肝炎;外周血T淋巴細(xì)胞亞群;檢測

【中圖分類號】R512.6【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號】1005-0019（2019）23-0-02

乙肝是常見的疾病，該病的主要特征為多種免疫反應(yīng)異常，患者的預(yù)后常比較差[1]。針對乙肝疾病，多項研究表明疾病同宿主免疫應(yīng)答、病毒變異存在密切聯(lián)系，尤其是外周血T淋巴細(xì)胞亞群同疾病發(fā)生及發(fā)展關(guān)聯(lián)緊密，為此針對乙肝患者，檢測外周血T淋巴細(xì)胞亞群對疾病診斷有很大幫助[2]。在本研究中，具體探討了對乙肝患者，使用流式細(xì)胞儀檢測外周血T淋巴細(xì)胞亞群對疾病判斷的價值，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年2月-2019年5月本院收治的106例乙肝患者及同期到本院進(jìn)行健康體檢的61例志愿者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有患者均符合《病毒性肝炎防治指南》[3]中關(guān)于乙肝的診斷標(biāo)準(zhǔn)。（2）患者具有良好的交流溝通能力。（3）患者臨床資料完整并均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并惡性腫瘤疾病的患者。（2）患血液系統(tǒng)疾病及免疫系統(tǒng)疾病的患者。106例乙肝患者中，包括男性60例，女性46例;年齡22～71歲，平均（48.2±2.3）歲;疾病類型：急性乙肝21例，慢性乙肝46例，肝炎肝硬化30例，慢性重癥肝炎9例。健康體檢志愿者中男38例，女23例;年齡23～72歲，平均（47.9±2.2）歲。

1.2 方法 對所有研究對象均行外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測，主要是應(yīng)用BD流式細(xì)胞儀檢測，方法如下。

1.2.1 試劑與儀器 三色標(biāo)記單抗CD3+、CD4+、CD8+分別同F(xiàn)ITC、PE、PerCP熒光素結(jié)合;含beads的TrueCount管;10×FACS溶血素;CaliBRITE beads;FACS Calibur流式細(xì)胞儀。

1.2.2 檢測方法 （1）標(biāo)本處理。采取規(guī)范的方式，抽取患者2ml的肘靜脈血液，將血液置入裝有抗凝劑的試管中，標(biāo)本采集后在6h內(nèi)完成檢測。選取含beads的TrueCount管，其中分別加入100μl的抗體、50μl抗凝全血，振蕩3s后避光靜置15min。向管中加入450μl濃度為1×9的溶血素，同樣振蕩3s后在避光環(huán)境下靜置15min，之后分析數(shù)據(jù)。（2）數(shù)據(jù)分析及處理。借助CaliBRITE beads、FACS Calibur流失細(xì)胞儀分析處理后的標(biāo)本，進(jìn)行CD3+、CD4+、CD8+絕對值計算。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS20.0軟件做統(tǒng)計學(xué)結(jié)果分析，計量資料用表示，使用t檢驗，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

急性乙肝在CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+各指標(biāo)上同體檢志愿者并無顯著差異（P>0.05），慢性乙肝、肝炎肝硬化及慢性重癥肝炎在CD3+、CD4+、CD8+上均較體檢志愿者低，其中肝炎肝硬化患者各指標(biāo)降低最明顯，詳見表1。

3 討論

乙肝是一種由乙型肝炎病毒所致傳染病，患者的臨床表現(xiàn)通常為食欲減退、惡心嘔吐、腹部不適等，隨著疾病的進(jìn)展，部分患者可進(jìn)展成肝硬化，甚至還可能進(jìn)展為肝癌，為此及時的檢出乙肝疾病非常關(guān)鍵[4]。

研究結(jié)果顯示，在乙肝發(fā)生及發(fā)展中，外周血T淋巴細(xì)胞亞群同乙肝存在很大聯(lián)系。CD3+細(xì)胞代表總T淋巴細(xì)胞;CD4+在機(jī)體免疫應(yīng)答上起到輔助及誘導(dǎo)作用，啟動超敏反應(yīng)及誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化，在乙肝患者中，患者CD3+、CD4+指標(biāo)水平明顯降低[5]。CD8+是一種具有清除感染肝細(xì)胞作用的細(xì)胞，正常人群中CD8+的存在可用于清除病毒感染，因此該項指標(biāo)一般比較高，而乙肝患者中該指標(biāo)則會降低。根據(jù)外周血T淋巴細(xì)胞亞群變化，提示臨床中可以通過檢測這一指標(biāo)作為診斷及鑒別乙肝嚴(yán)重程度的重要手段。本研究中，選取了乙肝患者及體檢志愿者作為研究對象，均行外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測，結(jié)果顯示在CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+各指標(biāo)上急性乙肝同體檢志愿者無顯著差異，其他乙肝患者各指標(biāo)降低，其中以肝炎肝硬化降低明顯，這提示行外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測對乙肝診斷及鑒別有重要幫助，但關(guān)于急性肝炎行該項檢測效果并不理想，因此需采取更有效的方法進(jìn)行檢測。

參考文獻(xiàn)

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