金屬硫蛋白1 E、糖類抗原153表達與乳腺癌患者臨床特征及預后的關系

胡艷瑞，王世磊

濮陽市人民醫院普通外科，河南濮陽457000

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤，具有很強的異質性，盡管大多數乳腺癌患者經過手術、放化療等治療后可達到根治性的效果，但仍有部分患者預后不佳，5年生存率較低[1]。有研究認為，有無遠處轉移和有無擴散是乳腺癌患者預后的影響因素[2]。目前，臨床對于乳腺癌的診斷主要通過病理和免疫組化分析，但是，近年來，血清生物學標志物已成為惡性腫瘤診斷和治療的重要輔助指標。通過檢測血清生物學標志物還可找到乳腺癌的潛在治療靶點，有利于對乳腺癌的治療[3]。金屬硫蛋白（metallothionein，MT）是一類具有特定金屬結合能力的、高度保守的蛋白質，由MT1E、MT1G和MT1X等亞基構成。其中，MT1E存在于腫瘤細胞的細胞質和細胞核中，其在血清中的表達水平與多種惡性腫瘤有關，可能參與靶向調控基因的表達[4]。 糖 類 抗 原153（carbohydrate antigen 153，CA153）是存在于乳腺細胞上皮表面糖蛋白的變異體[5]，是一種腫瘤相關抗原，在乳腺癌、肝癌、肺癌、胃癌中均有表達。本研究探討了MT1E、CA153在乳腺癌患者血清中的表達水平及與乳腺癌患者臨床特征和預后的關系，現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2013年1月至2017年1月濮陽市人民醫院收治的128例乳腺癌患者為觀察組。納入標準：①經病理學檢查確診；②均為女性；③術前未接受過放化療等抗腫瘤治療；④非急診手術患者。排除標準：①合并病毒性肝炎、血液系統疾病、免疫系統疾病等；②合并其他部位惡性腫瘤。另外，選取130例同期于本院行健康體檢的女性為對照組。觀察組患者的年齡為28～68歲，平均年齡為（55.41±9.87）歲。對照組受試者的年齡為29～65歲，平均年齡為（54.16±10.22）歲。兩組受試者的年齡比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經過醫院醫學倫理委員會審核批準，所有受試者均對本研究知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

抽取全部受試者的清晨空腹靜脈血，分離血清，離心速度為3000 r/min，離心時間為10 min，離心半徑為8 cm，凍存于-80℃冰箱中保存待測。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗檢測全部受試者血清中MT1E和CA153的表達水平。ChemiDoc MP化學發光儀購自美國Bio-rad公司，酶聯免疫吸附測定試劑盒購自亞諾法生技股份有限公司。操作步驟嚴格按照試劑盒說明書的步驟進行。使用試劑盒中的標準品制作質控曲線。陽性判定標準：MT1E≥0.85 ng/ml為陽性，CA153＞30 U/ml為陽性。

1.3 觀察指標及隨訪

觀察并比較兩組受試者血清中MT1E、CA153的表達水平，分析乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的陽性表達率與乳腺癌患者臨床特征的關系，對全部乳腺癌患者進行隨訪。術后每半年進行一次門診隨訪，隨訪截止時間為2018年6月，隨訪內容包括病史詢問、體格檢查、實驗室檢查、影像學檢查等。

1.4 統計學方法

采用SPSS 19.0軟件對數據進行統計分析，計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以例數和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；采用Kaplan-Meier法繪制生存曲線，組間比較采用Log-rank檢驗；影響因素分析采用Cox比例風險回歸模型。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清中MT1E、CA153表達水平的比較

觀察組患者血清中MT1E的表達水平為（1.22±0.51）ng/ml，明顯高于對照組患者的（0.46±0.13）ng/ml，差異有統計學意義（t=16.457，P＜0.01）；觀察組患者血清中CA153的表達水平為（28.81±5.22）U/ml，明顯高于對照組患者的（10.10±4.01）U/ml，差異有統計學意義（t=32.315，P＜0.01）。

2.2 不同臨床特征乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的陽性表達情況

TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的陽性表達率均明顯高于TNM分期為Ⅰ～Ⅱ期的乳腺癌患者，差異均有統計學意義（χ2=12.621、21.321，P＜0.01）；有淋巴結轉移的乳腺癌患者血清中MT1E的陽性表達率明顯高于無淋巴結轉移的乳腺癌患者，差異有統計學意義（χ2=27.275，P＜0.01）。不同年齡、腫瘤直徑、病理類型、雌激素受體狀態、孕激素受體狀態、分化程度乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的陽性表達率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；不同淋巴結轉移情況乳腺癌患者血清中CA153的陽性表達率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。（表1）

2.3 MT1E、CA153陽性表達乳腺癌患者的生存情況

MT1E陽性表達乳腺癌患者的中位生存時間為51.19個月（95%CI：46.660～55.727），短于 MT1E陰性表達乳腺癌患者的57.31個月（95%CI：53.855～60.764），差異有統計學意義（χ2=4.558，P＜0.05）；CA153陽性表達乳腺癌患者的中位生存時間為 50.22個 月（95%CI：45.331～54.702），短于CA153陰性表達乳腺癌患者的57.54個月（95%CI：54.178～60.892），差異有統計學意義（χ2=7.606，P＜0.05）。（圖1、圖2）

2.4 乳腺癌患者預后影響因素的Cox比例風險回歸分析

以淋巴結轉移、TNM分期、雌激素受體狀態、分化程度、MT1E表達、CA153表達作為自變量，以總生存時間作為因變量進行Cox比例風險回歸模型分析，結果顯示，有淋巴結轉移、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、分化程度為中低分化、MT1E陽性表達、CA153陽性表達均是乳腺癌患者預后不良的獨立危險因素（P＜0.05），雌激素受體陽性是乳腺癌患者預后良好的獨立保護因素（P＜0.05）。（表2）

表1 不同臨床特征乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的陽性表達情況（n=128）

圖1 MT1E陽性表達（n=92）和陰性表達（n=36）乳腺癌患者的生存曲線

圖2 CA153陽性表達（n=85）和陰性表達（n=43）乳腺癌患者的生存曲線

表2 乳腺癌患者預后影響因素的Cox比例風險回歸分析（n=128）

3 討論

乳腺癌是臨床常見的惡性腫瘤，其發生、發展是多種因素共同作用的結果，大多數早期乳腺癌患者術后可獲得根治性的治療效果，術后再輔以放療、化療，多數患者可獲得良好的預后[6]。部分患者術后易發生遠處轉移和擴散，治療效果較差，生存時間較短[7]。病理組織活檢是診斷和評估病情的金標準，但其對患者造成的創傷較大，可導致腫瘤進展[8]。鉬靶X線攝影檢查等影像學檢查無法對腫瘤進行確診，且可能對患者機體造成放射性損傷，進而促進腫瘤的進展[9]。血清生物學標志物是目前診斷和治療惡性腫瘤的重要輔助指標，與病理學檢查相比，具有檢測方便、結果客觀、創傷小等優勢[10]。通過檢測血清生物學標志物，還可發現潛在的治療靶點，為惡性腫瘤的治療提供新的思路[11]。

金屬硫蛋白含有61～68個氨基酸殘基，蛋白質結構中含有兩個金屬結合域，具有特定的金屬結合能力[12]。有研究認為，MT在不同腫瘤組織中的表達水平不同，可作為腫瘤的一種輔助性診斷指標[13]。MT1E屬于MT1蛋白，在腫瘤細胞中呈陽性表達，尤其在腫瘤細胞的細胞質和細胞核中含量較高。有研究發現，MT1E可作為調控因子直接參與靶向基因的表達，MT1E在乳腺癌患者血清中的表達水平較高，與乳腺癌的發生和發展密切相關[14-15]。CA153是存在于乳腺細胞上皮表面糖蛋白的變異體，在乳腺癌中的表達水平較高[16]。有研究證實，CA153是乳腺癌診斷的特異性標志物[17]。本研究發現，乳腺癌患者血清中的MT1E和CA153水平明顯高于健康女性，這一結果與相關研究結果類似[18-19]。血清MT1E和CA153水平可作為乳腺癌的輔助診斷指標。本研究對不同TNM分期乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的陽性表達率進行了比較，結果發現，TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的陽性表達率均明顯高于TNM分期為Ⅰ～Ⅱ期的乳腺癌患者，提示乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的陽性表達率可能與TNM分期有關。本研究還發現，有淋巴結轉移的乳腺癌患者血清中MT1E的陽性表達率明顯高于無淋巴結轉移的乳腺癌患者，提示乳腺癌患者血清中MT1E的陽性表達率可能與淋巴結轉移情況有關。

通過長期的隨訪發現，MT1E和CA153陽性表達乳腺癌患者的中位生存時間均短于MT1E和CA153陰性表達的乳腺癌患者，提示乳腺癌患者血清中MT1E和CA153的陽性表達情況與患者的預后可能有關，且MT1E、CA153陽性表達乳腺癌患者的中位生存時間更短。分析其原因可能是由于血清中MT1E、CA153陽性表達的乳腺癌患者往往已發展至乳腺癌晚期，且發生了淋巴結轉移，因此，MT1E、CA153陽性表達的乳腺癌患者預后更差。

本研究中，Cox比例風險回歸分析結果顯示，有淋巴結轉移、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、分化程度為中低分化、MT1E陽性表達、CA153陽性表達均是乳腺癌患者預后不良的獨立危險因素（P＜0.05），雌激素受體陽性是乳腺癌患者預后良好的獨立保護因素（P＜0.05），提示MT1E、CA153可作為臨床評估乳腺癌患者病情和預后的輔助指標。

綜上所述，乳腺癌患者血清中MT1E和CA153的表達水平較高，有淋巴結轉移、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、分化程度為中低分化、MT1E陽性表達、CA153陽性表達是乳腺癌患者預后不良的獨立危險因素，雌激素受體陽性是乳腺癌患者預后良好的獨立保護因素。但是，本研究納入的樣本量較少，未對乳腺癌患者進行分類研究，在今后的臨床工作中應注意積累樣本，探討三陰性乳腺癌等特殊類型乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的陽性表達情況。