高譽欣 張晟寧 王浩
摘? 要:目的對比不同飼養環境對Wistar大鼠血常規和血生化數據的影響。方法用獸用全自動血液細胞分析儀和全自動生化分析儀測不同飼養環境下大鼠的血常規與血液生化數據。結果普通開放環境飼養的大鼠與IVC屏障環境飼養的大鼠血常規六項數據中(HB、RBC、WBC、中性、淋巴、單核)WBC 差異及其顯著(P <0.01),其余幾項數據差異無顯著性(P >0.05);生化九項數據中,TP、ALB、UREA、TC差異有顯著性(P <0.05),ALT、AST、Crea、Glu、TG差異無顯著性(P >0.05)。結論不同飼養環境對大鼠血常規與血生化數據有一定影響。
關鍵詞:飼養環境;Wistar大鼠;血常規;血生化
實驗動物結果受多種因素的不同影響,主要是遺傳因素和環境因素的綜合結果。其中環境可分為外環境和內環境。外環境是指實驗動物設施以外的環境。內環境是指實驗動物的生活環境。實驗動物一生都生活在一個人工控制的環境下,失去了較為廣泛的適應環境的能力。影響實驗動物的環境因素主要有以下幾點:物理因素、化學因素、生物因素和人為因素。本次試驗旨在研究不同飼養環境對實驗動物血常規和血生化數據的影響。
1? 材料和方法
1.1? 動物來源
成年(8~10周齡)wistar雄性大鼠20只。由濟南朋悅實驗動物繁育有限公司提供【SCXK(魯)2014 0007】。
1.2? 飼養環境
普通開放環境與屏障環境? 【SYXK(魯)2018 0007】。
1.3? 主要試驗儀器及試劑
1.3.1? 主要試驗儀器
BC-2800Vet 獸用全自動血液細胞分析儀,BS-190全自動生化分析儀,臺式低速自動平衡離心機
1.3.2? 主要試劑
試劑:均購自深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司。
血常規:獸用血液細胞分析儀用溶血劑,Lot:2015101501;獸用清洗液,Lot:2015102401;獸用血液細胞分析儀用稀釋液,Lot:2015091201。
血生化:谷丙轉氨酶ALT,Lot:140116004,IFCC法;谷草轉氨酶 AST,140215026,IFCC法;總蛋白TP,Lot:140815023,雙縮脲法;白蛋白ALB,Lot:140916001,溴甲酚綠法;尿素氮UREA,Lot:141316003,紫外-谷氨酸脫氫酶法;肌酐CREA,Lot:141016003,改良Jaff法;葡萄糖Glu,Lot:141516003,葡萄糖氧化酶法;總膽固醇TC,Lot:141616003,氧化酶法;甘油三酯TG,Lot:141716002,氧化酶法。
1.4? 試驗方法
1.4.1? 將大鼠隨機分為兩組,每組10只,單籠單只飼養。第一組在屏障環境內飼養,水、飼料、墊料、籠具高壓滅菌處理,每3d更換一次墊料;第二組在普通開放式環境下飼養,水、飼料、墊料、籠具不經過高壓滅菌處理直接使用,每5d更換一次墊料。
1.4.2? 飼養四周以后,將大鼠禁食16小時(不禁水)
1.4.3? 標記并稱重大鼠。根據體重腹腔注射1%戊巴比妥鈉麻醉,腹主動脈取血,EDTA-Na2抗凝測血常規。另取一管血液,40分鐘后,3000轉離心10分鐘,吸取上層血清,備做血生化檢測。
1.5? 統計方法
雙因素方差分析法
2? 結果
2.1? 血常規
HB? P值 0.570;RBC? P值 0.903;WBC? P值 0.000;
中性粒細胞P值0.581;淋巴細胞P值0.169;單核粒細胞P值0.957
2.2血生化
ALT? P值0.545;AST? P值0.975;TP? P值0.002;ALB? P值0.002;UREA? P值0.020;
Crea? P值0.904;Glu? P值0.858;TC? P值0.018;TG? P值0.676
3討論
3.1? 實驗動物被稱為生命科學領域中的活試劑,即是生命科學的研究對象,又是科學研究的載體,其各項生理數據、生化指標的準確性對生命科學研究具有重要意義。
3.2? 本實驗對不同飼養環境下Wistar大鼠的血常規、血液生化值進行了對比,結果顯示普通開放環境飼養的大鼠與屏障環境飼養的大鼠血常規六項數據中(HB、RBC、WBC、中性、淋巴、單核)WBC 差異及其顯著(P <0.01),其余幾項數據差異無顯著性(P >0.05);生化九項數據中,TP、ALB、UREA、TC差異有顯著性(P <0.05),ALT、AST、Crea、Glu、TG差異無顯著性(P >0.05)。
3.3實驗進行到第三周開始,普通飼養環境下的各只大鼠,頸部、頭部陸續出現抓傷,被毛脫落,皮膚裸露,嚴重的有出血等現象。加之血常規中白細胞均值高于潔凈環境白細胞均值,差異極其顯著(P <0.01),懷疑是由于普通環境內細菌等微生物數量過高引起。因此在實驗中應嚴格按照要求在符合實驗的環境中飼養實驗動物,以排除非實驗因素的影響,使實驗結果更加客觀準確。