動物衛生與流行病學中心的實踐報告

蘇華彬

時間飛逝，在過去的一個多月的實習時間里，有三個不同的實踐感悟，分別是：單位與學校的區別，外派工作的體驗，實驗方法總結。這三個方面是我這次實踐真真切切體會到的有感己悟，亦是我這段不同人生經歷的最寶貴的記憶。

（一）單位與學校

2019年5月20日，從學校懷著忐忑與激動的心情乘著大巴來到中國動物衛生與流行病學中心，這是我第二次來到這個地方。第一次我是被我們單虎教授派過來為他的一個項目蓋章簽字，因為當時只是在前面的辦公樓瀏覽，覺得這個地方很有園林之美的韻味。

這次我隨老師前往后面的實驗樓，給我的感覺就是現代化與園林藝術的融合，在我們學校的話，園林藝術與現代高樓是涇渭分明的，在這建筑方面各有千秋。進入實驗樓，大家一起開了個短暫的會議，然后老師帶我們來到了我們實踐的目的地動物產品安全檢測室。這里的第一感覺特別像我們做藥物化學實踐的實驗室，老師帶我們參觀了所有的實驗儀器，這里的實驗條件比我們學校強太多了，像那種超高速低溫離心機我在學校見過兩臺，而且也有些年份了，但是在這里的儀器室我就見到了四臺，最老型號的和我們學校最新型號的是完全一樣的，這既給我了深深的震撼也讓我有點為學校感到悲哀。

其后師姐領我們去宿舍安頓好行李物品。宿舍分為兩個部分：前廳，臥室，衛生間。師姐說可以在前廳做飯吃（在過去的一個多月中我們沒有做過），衛生間不大，但是可以解決除洗澡外的生活問題，臥室是標準的八人間宿舍但是只有四個人住，很寬敞。在學校我們的宿舍是六人間，房間左面是一排桌子，右面是上下床，里面有一個小陽臺可以晾曬衣服，相較來說動衛中心的宿舍更大更方便，學校的宿舍小巧精致溫馨。中午去食堂吃飯，這里的早餐和中餐都是以自助的形式自由拿取，我這胖了5斤的肉就是這么吃出來的。

下午科室的老師做實驗，我們在一旁觀看學習。晚上我們坐著公交車去最近的超市采購東西，在學校的話，宿舍周圍就可以買到所有物品，在生活方面這里不如學校便利。在單位感覺比在學校學習輕松很多，但是在輕松的同時意味著相對單調的生活，這里的生活就像三點一線的高中，我們在宿舍、食堂和實驗室中來回穿梭，在學校你可以感受各種各樣的校園活動，可以是動聽的歌聲，可以是炫酷的舞姿，可以是讀書辯論，這些在這里都沒有，相對單調但是能讓人更專注的投入到工作，目的不相同，方式不相同，結果亦然不會相同。

（二）外派工作的體驗

6月5日上午，我們跟隨老師做完上午的實驗步驟，然后老師對我和我同學說，這次因為人手不夠，不得已將你倆派出去采集做實驗的樣品，我去青海，另一個去湖北，于是我倆懷著忐忑的心情，跟隨各自的帶隊老師于6月10日出發。

6月10日下午2時45分登上去青海的飛機，6月10日下午6時10分到達西寧的機場。由當地的農業廳接機到了西寧市的一家酒店安頓行李，在路上我感到頭有輕微的發脹感，不知是有高原反應還是暈車，當地的農業廳人員接待吃了頓晚飯，我看到在傍晚8時30分的時候太陽才漸漸西下，這也許是高海拔或是西部的原因吧，在飯桌上都是一群老江湖，在不經意間就在套話，我這涉事未深的少年最好的應對方式就是少說話多吃飯。

高海拔地區比平原地區最大的區別就是缺少氧氣，喝了兩杯實在推不掉的酒我就不喝了，主要是怕出現危險。晚上9時30分，我和帶隊的老師來到我的房間準備第二天采樣所需要的物品，然后說好第二天的分工之后，10時40分，老師回到自己的房間休息，我向去湖北的同學詢相關的情況，11時14分時我說了一聲：明天酒醒了回我。

第二天7時10分，從睡夢中起來，看了看手機，6時14分時他回了我一句：昨晚啥都不知道了。作為兩名還未畢業的大學生，這次行動確實是對我們的一份磨煉！在省農業廳的前輩們可能學校傳授的書面知識不如我們記得熟，但是在社會上的摸爬滾打所磨練出來為人處事能力遠超過我們，大學能教我在社會上謀生的技能，我們與他們相差的是謀生的智慧，這是我們要一生學習的東西。

簡單洗漱后，來到樓下，與老師一起吃的早餐并在微信上與當地約定上午9點去屠宰場取樣，但是9時27分當地的人才過來。在9時10分老師在其實已經不太高興了，老師告訴我做事約定時間，絕對不能遲到，但是當地的人來時候也是和顏悅色的并連說沒事，我在這時候知道了什么叫做涵養。上午10時15分來到采樣的屠宰場，樣品集中在當地的檢測室，剛開始與老師合作有些生澀，在熟悉流程之后好了很多，我負責收集樣品，老師負責寫采集報告，上午11時15分奔赴下一個采集地點采集樣品，當時天氣不太好，我們去的是當地的畜牧局，在當地的一位先生的幫助下很快完成了分揀工作，吃了簡單的一頓午飯后來到一個清真屠宰場，這里是采樣最最困難的地方。

第一次采集的時候，他們當地將所有的樣品混到了一起，沒辦法只能告訴當地的人第二天中午再來采集。晚上回到酒店賓館將所有樣品整理好后，我跟老師一起去當地的小吃街吃晚飯。青海在我的印象里真的沒有什么特色，在我來青海之前唯一知道只有青海湖，在小吃街里可以看到來到四方的小吃，但是唯獨沒有青海的特色，感覺像我小時候的看到的《邯鄲學步》的故事，學會了四方的舞姿最后卻忘記了自己原來的樣子。

我現在還在求學階段，往后八年內可能還是在求學之中，學四方之技，但是不能忘記自己，就像習總書記說的不忘初心，這是我在社會中應銘記的。第三天，我們去了海東市的采樣地點，這是當地的一個扶貧項目，它在村子的深處的艷陽高照的地方，但是當我們來到屋子里面的時候，明明沒有開冷氣但是卻能在屋子里感到涼意，很快完成了工作，與當地的老板閑聊，了解到當地的畜牧來源于新疆，但是從他口中得到消息，近年因為非洲豬瘟造成豬肉產量減少，但是豬肉需求不減反增，造成豬肉價格上漲，利益幾乎成倍增加，如果利益超過百分之三百，一些人會突破任何底線，非洲豬瘟現在治療技術還不健全，最重要的手段是進行防控，控制傳染源的交通是重要的防控一環，但是在利益面前偷渡運豬真的會出來，世事難料啊，這個犯罪成本很低，控制不起來就會造成封鎖線突破，希望在這個特殊時期能有些特殊的手段吧。

聊了一會兒后，因為時間已經不早了，我們去了當地的一家飯館吃飯，這里是西寧的最特色小吃的地方，我們在這里吃了釀皮和綠面飯。這里的人也喜歡吃辣，但是他們的偏向于干粉辣，就是吃完之后感覺在嘴里黏上干粉的感覺，我問當地老板為什么像這種特色的飯店為什么這么少，他回答說這里的人跟喜歡來自中國四方的食物，其他的我沒多問，每個地方都有每個地方的長處與難處。

中午吃完飯后，我們來到了昨天采樣的清真屠宰場，這次所有樣品都分好類了，但是就是樣品太少了，最少的羊尿只有幾滴，沒辦法，在詢問過領導之后我們將物品收集起來算是完成了任務。因為時間還早，在將樣品冷凍之后，我們順路去了藏藥文化博物館，見識了獨特的藏醫文化，在保護獨特的非物質文化遺產上國家還是高度重視的，江澤民主席后的主席和總理都先后視察了這里。

在6月14日下午6：50分，我們安全回到了青島，說來也奇怪，我在青海沒事，到了家里卻感覺頭暈，可能氧氣濃度對那時候的我太高了吧。這次出差與其說是工作，更多的像是一場修煉旅行。老人常說紅塵練心對我們年輕人很重要，但是這場試煉一旦開始了，就沒有結束，這是一場用一生來答復的考試，沒有什么標準的對與錯，只有值得還是不值得。

（三）實驗方法總結

在中國動物衛生與流行病學中心過去的六周中，我們主要學到的實驗主要是從豬肝或是豬尿中檢測多藥物的殘留，其中的主要方法分為兩個：

第一種方法適用于檢測瘦肉精在內的多藥物殘留。

在實驗的最開始設置空白對照組，可設空白豬肝對照或是試劑空白對照，同時設置基質校正樣品，此項操作就是在設置的空白豬肝里加入標準品，此項操作又稱為添加回收，目的是在液相色譜儀中形成標準，從而與樣品進行比較檢測是否超標。

其后每個樣品中加入8ml乙酸乙酯提取液，同時每個樣品中加入1ml氨水，乙酸乙酯能提取出樣品中的藥物，氨水的目的是是調節樣品的PH，因為在在初步處理中是進行液液萃取的，PH對具有酸堿性的物質的溶解性或分配系數影響很大，調節PH使組分在水相中處于中性分子狀態，或是達到兩性分子的等電點，水溶性降低易被有機溶劑萃取，而這里的有機溶劑就是乙酸乙酯。

在加入乙酸乙酯和氨水后，分別用渦動儀渦動，其后用振動儀振動，這個步驟的目的是讓試劑與樣品充分混合。

其后采用高速低溫離心機8000-11000r離心6分鐘，在4攝氏度下提取上清液，但是樣品中的藥物可能還沒有提取完全，需要再次提取。

在離心后的提取物中加入8ml乙酸乙酯，再加入0.5ml氨水，用渦動儀渦動，用振動儀振動，再次用相同條件的離心機離心，將兩次上清液合并，此次是將樣品中的所有藥物混合。

其后將合并的上清液放到氮吹儀上氮吹，這個步驟是將多余的物質吹掉，同時將藥物進行吹干濃縮。

在吹干后拿出樣品，用3ml的8：2的千分之一的甲酸水比乙腈溶液進行復溶，其后用渦動儀渦動使溶劑與藥物充分混合后，放入高速低溫離心機8000-11000r離心6分鐘，在4攝氏度下提取上清液。因為接下來就是應用反相固相萃取法，復溶液也是樣品通過的SPE小柱的溶劑，在反相SPE中是藥物保留的條件必須是水、緩沖液或是低濃度的乙腈或甲醇這是為什么采用這種復溶液的原因。在加入樣品之前要將MCX或是PCX小柱活化（兩種小柱均為陽離子交換小柱）采用3ml甲醇，3ml純水，3ml千分之一的甲酸水進行活化，這三種試劑作用分別是甲醇作為有機溶劑過柱活化，純水起到平衡的作用，而甲酸水是用來進行調節小柱的PH，PH值在這固相萃取中由為重要，他是保證離子化的的必要條件。其后檢測樣品的PH值，樣品的PH值必須要小于其PKA兩個單位，目的是保證其帶電荷。用千分之一的甲酸水緩沖溶液調節完成后加入小柱內，其后用3ml純水，3ml甲醇進行淋洗，目的是為了除去不需要的組分或雜質。其后將小管進行抽干，用3ml百分之五的氨化甲醇進行洗脫，選取百分之五的氨化甲醇的原因是因為洗脫溶液必須大于其PKA的兩個單位，目的是中和分析物的電荷。

其后再次進行氮吹，這個步驟是將多余的物質吹掉，同時將藥物進行吹干濃縮。

之后在空白豬肝樣品加入標準品，這個步驟是基質矯正曲線，是為了在液相中調整標準曲線的，其后采用1ml的9：1的千分之一甲酸水比乙腈溶液進行復溶，其后用渦動儀渦動使溶劑充分溶合，采用這種溶液進行復溶是因為這種溶液在液相分析儀中能穩定出現數值。將復溶之后的溶液過濾膜裝進檢測小瓶，這是為了去除雜質，保證樣品澄清。

第二種方法是檢測大環內酯和喹諾酮類藥物。

在實驗的最開始設置空白對照組，可設空白豬肝對照或是試劑空白對照，同時設置基質校正樣品，此項操作就是在設置的空白豬肝里加入標準品，此項操作又稱為添加回收，目的是在液相色譜儀中形成標準，從而與樣品進行比較檢測是否超標。

其后每個樣品加入8ml0.1mol每升的磷酸鹽提取液，因為在豬肝樣品中藥物易溶解在這種提取液，其后每個樣品加入2.5gNacl，其目的是采用鹽析，使樣品在離心過程中沉淀，使上清液更加澄清。

在加入磷酸鹽提取液和鹽后，分別用渦動儀渦動，其后用振動儀振動，這個步驟的目的是讓試劑與樣品充分混合。

其后采用高速低溫離心機8000-11000r離心6分鐘，在4攝氏度下提取上清液，但是樣品中的藥物可能還沒有提取完全，需要再次提取。

在離心后的提取物中加入8ml磷酸鹽提取液后，用渦動儀渦動，用振動儀振動，再次用相同條件的離心機離心，將兩次上清液合并，此次是將樣品中的所有藥物混合。

其后將在樣品上清液中加入16微升甲酸，調節上清液的PH值，樣品的PH值必須要小于其PKA兩個單位，目的是保證其帶電荷。其后采用高速低溫離心機8000-11000r離心6分鐘，在4攝氏度下提取上清液4ml.

在加入樣品之前要將MCX或是PCX小柱活化（兩種小柱均為陽離子交換小柱）采用3ml甲醇，3ml純水，3ml千分之一的甲酸水進行活化，這三種試劑作用分別是甲醇作為有機溶劑過柱活化，純水起到平衡的作用，而甲酸水是用來進行調節小柱的PH。將提取的4ml上清液倒入小管內，其后用3ml純水，3ml甲醇進行淋洗，目的是為了除去不需要的組分或雜質。其后將小管進行抽干，用3ml百分之五的氨化甲醇進行洗脫，選取百分之五的氨化甲醇的原因是因為洗脫溶液必須大于其PKA的兩個單位，目的是中和分析物的電荷。

其后再次進行氮吹，這個步驟是將多余的物質吹掉，同時將藥物進行吹干濃縮。

之后在空白豬肝樣品加入標準品，這個步驟是基質矯正曲線，是為了在液相中調整標準曲線的，其后采用1ml的9：1的千分之一甲酸水比乙腈溶液進行復溶，其后用渦動儀渦動使溶劑充分溶合，采用這種溶液進行復溶是因為這種溶液在液相分析儀中能穩定出現數值。將復溶之后的溶液過濾膜裝進檢測小瓶，這是為了去除雜質，保證樣品澄清。

這兩種方法是我學習的兩種檢測方法，上面詳細描述了豬肝藥物檢測方法，豬尿的檢測是做合并上清液之后的步驟。不同的是在活化中應用千分之五的甲酸水，在淋洗的時候應用百分之三十的甲醇水，在最后復溶的時候應用8：2千分之一的甲酸水比乙腈溶液。

其實在上述的過程中有很多的精確加入或是配置的藥品，我問過老師，為什么加入這種比例或是濃度的溶劑，老師說這是在不斷改進中，逐漸改變一個變量總結出來的方法。實驗是枯燥的，在嘗試中改變是創造新方法的必要條件，這給了我啟發，以后我在我的研究生生涯中，是不是可以應用這種思路去創作或是構思我的實驗或是屬于我自己的實驗方法，現在唯一的遺憾就是沒有把液相分析儀的技術學熟，這是我以后做實驗必要學習的內容，下周師姐會帶我們學習，一定要加油，為了自己將來，奮斗吧。

在這一個月中，我出現很多失誤，有很多的不足，這讓我看清我有哪些需要強化，有哪些需要改正。我是一個不斷進行嘗試與探索的青年，去過最發達的國家旅行，也去過最基層的農村調研。但是這次實踐是最特別的記憶，在這里我真正應用自己的所學去觀察了這個我未來可能投身的行業。我們青年在社會面前還很稚嫩，但是我們還有比別人年輕的資本，我們會在不斷學習中改進與成長，我們擁有無限的可能。

感謝老師給我這次實踐的機會，在這里學習的道理，我終身受益。