四種清熱解毒中藥注射液對(duì)血培養(yǎng)產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌感染的干擾實(shí)驗(yàn)及應(yīng)對(duì)策略

劉 佳 陶慶春 趙桂榮 隗立國(guó)

1.北京中醫(yī)藥大學(xué)房山醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 102400；2 北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100029；3.北京中醫(yī)藥大學(xué)房山醫(yī)院，北京 102400

表1 四種中藥注射液實(shí)驗(yàn)組藥物濃度、用量及菌液

隨著臨床創(chuàng)傷性診療技術(shù)的廣泛開(kāi)展以及抗生素和激素的濫用，導(dǎo)致血流感染病死率高。北美地區(qū)每年有超過(guò)575 000 人發(fā)生血流感染并導(dǎo)致近80 000 人死亡[1]。我國(guó)醫(yī)院獲得性血流感染發(fā)病率達(dá)5.7‰，為許多危重患者死亡原因之一[2]。因此，血培養(yǎng)檢測(cè)對(duì)臨床診斷和治療菌血癥有重要價(jià)值。肺炎克雷伯桿菌是血液感染的主要革蘭陰性病原體，成為第二大條件致病菌[3]。文獻(xiàn)報(bào)道，血培養(yǎng)分離的致病菌陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間一般在72h 之內(nèi)[4]，及時(shí)報(bào)告陽(yáng)性結(jié)果可以幫助醫(yī)生早期實(shí)施有效治療。段學(xué)光等[5]在血培養(yǎng)干擾實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，雙黃連和清開(kāi)靈注射劑對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌有不同程度的干擾作用。本實(shí)驗(yàn)旨在幫助醫(yī)護(hù)人員了解中藥注射液對(duì)血培養(yǎng)陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間干擾，預(yù)防并積極采取應(yīng)對(duì)措施提高血培養(yǎng)陽(yáng)性檢出率。

1 材料與方法

1.1 菌株來(lái)源

產(chǎn)KPC 酶肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1705 來(lái)自首都醫(yī)科大學(xué)附屬友誼醫(yī)院微生物室。

1.2 試劑

中藥注射液均由醫(yī)院藥劑科提供：熱毒寧注射液，江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)170606；清開(kāi)靈注射液，石家莊神威藥業(yè)有限公司，批號(hào)160516B1；痰熱清注射液，上海凱寶藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)1705109；喜炎平注射液，江西青峰藥業(yè)有限公司，批號(hào) 2017061703；血培養(yǎng)瓶法國(guó)生物梅里埃產(chǎn)品，批號(hào)：104864。

1.3 儀器

一次性注射器、微量加樣器、比濁儀、法國(guó)生物梅里埃Bact/ALERT 3D 60 全自動(dòng)血培養(yǎng)儀。

1.4 方法

1.4.1 菌液配制 挑取經(jīng)麥康凱血平皿純化培養(yǎng)的產(chǎn)KPC 酶肺炎克雷伯菌單菌落，制備成0.5 麥?zhǔn)蠁挝痪鷳乙海瑵舛葹?25CFU/mL。

1.4.2 藥物注射液濃度配制 分別取痰熱清注射液（10mL/ 支）、清開(kāi)靈注射液（10mL/ 支）原液濃度即100%，用0.9%無(wú)菌氯化鈉注射液將其稀釋至50%濃度；取熱毒寧注射液（10mL/支）、喜炎平注射液（5mL/ 支），原液濃度即100%，用0.9% 無(wú)菌氯化鈉注射液分別將其濃度稀釋至50%、25%、12.5%。

1.4.3 實(shí)驗(yàn)方法 按照表1 要求配置菌液、藥液濃度。每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

2 結(jié)果

痰熱清組藥物濃度50% 和100% 時(shí)，ATCC BAA-1705 陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間與對(duì)照組比較延長(zhǎng)25.6%和41.9%；清開(kāi)靈組藥物濃度50% 和100% 時(shí)，ATCC BAA-1705 陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間延長(zhǎng)4.7%和9.3%；熱毒寧組藥物濃度為12.5%、25%、50% 和100%時(shí)，ATCC BAA-1705 陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間分別比較延長(zhǎng)27.9%、32.6%、51.1% 和62.8%；喜炎平組藥物濃度分別為12.5%、25%、50%、100%時(shí)，ATCC BAA-1705 陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間與實(shí)驗(yàn)組相同，延長(zhǎng)率為0%。見(jiàn)表2。

表2 四組藥物不同濃度血培養(yǎng)報(bào)警時(shí)間比較

圖1 四種藥物實(shí)驗(yàn)濃度的陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間延長(zhǎng)比較結(jié)果

3 討論

血流感染是導(dǎo)致菌血癥的主要原因，所以采集患者的血液標(biāo)本培養(yǎng)分離出致病菌后進(jìn)行鑒定是診斷菌血癥的金標(biāo)準(zhǔn)[6]。本實(shí)驗(yàn)?zāi)M血培養(yǎng)產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae carpenemase，KPC 酶）感染，觀(guān)察四種中藥注射液陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間差異。清熱解毒中藥注射液是一類(lèi)清瀉里熱作用的藥物。熱毒寧注射液具有抗病毒、抗菌、消炎等多種功效， 能迅速改善全身癥狀， 縮短病程[7]；痰熱清主要成分黃芩具有瀉火解表，清熱止利的功效[8]；金銀花具有解表和宣肺、清熱解毒作用[9]。清開(kāi)靈亦含金銀花成分有清熱、解毒作用。張涓[10]清熱藥體外抗菌作用的文獻(xiàn)再評(píng)價(jià)討論中通過(guò)查閱文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)黃連、黃芩、金銀花等具有明顯的體外抗菌作用，對(duì)革蘭陽(yáng)性球菌、革蘭陰性桿菌和真菌均有較好的抑菌活性。喜炎平對(duì)肺炎克雷伯菌體外并無(wú)關(guān)或拮抗菌作用，與文獻(xiàn)報(bào)道相符[11-12]。

研究顯示四種中藥注射液對(duì)血培養(yǎng)產(chǎn)KPC 酶肺炎克雷伯菌感染陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間有不同程度的干擾影響，其中熱毒寧藥物干擾效果最為明顯，而喜炎平未產(chǎn)生干擾。實(shí)驗(yàn)參照《干擾實(shí)驗(yàn)指南》，藥物實(shí)驗(yàn)濃度應(yīng)至少三倍于治療濃度或最高預(yù)期濃度[13]。痰熱清最高治療濃度為13.8%，實(shí)驗(yàn)濃度為41.4%。清開(kāi)靈最高治療濃度為28.6%，實(shí)驗(yàn)濃度85.8%。熱毒寧最高治療濃度為7.4%，實(shí)驗(yàn)濃度22.2%。喜炎平最高治療濃度7.4%，實(shí)驗(yàn)濃度為22.2%。痰熱清實(shí)驗(yàn)組50%濃度接近與三倍治療濃度，ATCC BAA-1705 陽(yáng)報(bào)警時(shí)間延長(zhǎng)25.6%；清開(kāi)靈實(shí)驗(yàn)組100%濃度近似三倍治療濃度，陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間延長(zhǎng)9.3%；熱毒寧和喜炎平實(shí)驗(yàn)組25%濃度接近三倍治療濃度，陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間延長(zhǎng)分別為32.6%和0%。四種藥物實(shí)驗(yàn)濃度陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間結(jié)果為熱毒寧＞痰熱清＞清開(kāi)靈＞喜炎平。見(jiàn)圖1。

菌血癥患者僅1/3 血液培養(yǎng)有陽(yáng)性結(jié)果[14]，藥物干擾是其重要的影響因素。只有充分了解干擾藥物，才能提高血培養(yǎng)檢出陽(yáng)性率，并提出應(yīng)對(duì)策略：首先，應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行使用抗生素之前留取血培養(yǎng)標(biāo)本，陶世龍等[15]對(duì)不同臨床標(biāo)本微生物檢驗(yàn)的陽(yáng)性率結(jié)果對(duì)比發(fā)現(xiàn)護(hù)士人員采集標(biāo)本操作不規(guī)范影響結(jié)果；其次，患者使用清熱解毒類(lèi)藥物，臨床醫(yī)生要在申請(qǐng)單備注，便于檢驗(yàn)人員綜合考慮藥物干擾血培養(yǎng)陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間結(jié)果；最后，重視藥物對(duì)血培養(yǎng)干擾實(shí)驗(yàn)研究。

綜上所述，清熱解毒中藥注射液應(yīng)用越來(lái)越廣泛，臨床應(yīng)盡量避免藥物對(duì)血培養(yǎng)報(bào)警時(shí)間造成干擾，保證血培養(yǎng)結(jié)果的時(shí)效性和準(zhǔn)確性，以提高清熱解毒類(lèi)中藥的臨床療效，促進(jìn)中醫(yī)藥的合理使用。