臨床微生物檢驗(yàn)和細(xì)菌耐藥性監(jiān)測研究

胡海洋

湖北省鐘祥市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北鐘祥 431900

細(xì)菌耐藥性指的是細(xì)菌對(duì)抗菌藥物產(chǎn)生的耐受性，在細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性后，則會(huì)導(dǎo)致抗菌藥物治療效果降低[1]。造成上述癥狀的因素包括兩種，即抗菌藥物耐藥性和天然耐藥性，主要是因?yàn)榧?xì)菌染色體基因?qū)е碌模涮攸c(diǎn)以遺傳為主[2]。天然耐藥性抗生素包括鏈球菌和氨基糖普類等，上述細(xì)菌一旦接觸抗菌類藥物，則會(huì)形成較強(qiáng)的抵抗力，從而不斷繁殖和生長，并代替已經(jīng)被抗菌藥物吞噬的敏感性細(xì)菌，促進(jìn)藥物耐藥率的提高[3]。因此，需要合理采用抗菌藥物，加強(qiáng)對(duì)微生物檢驗(yàn)的重視程度。產(chǎn)生耐藥性的因素：由于細(xì)菌與抗生素接觸，在質(zhì)粒介導(dǎo)作用下，導(dǎo)致代謝發(fā)生異常變化，最終使得抗菌藥物無法徹底消滅該類物質(zhì)[4]。本研究主要針對(duì)臨床微生物與細(xì)菌耐藥性監(jiān)測進(jìn)行探析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將 本 院2017 年8 月～2018 年9 月350 株 非重復(fù)病原菌檢測標(biāo)本納入至本次試驗(yàn)，鑒定、培養(yǎng)并分離全部細(xì)菌。

1.2 方法

收集血液等標(biāo)本，將革蘭氏陰性桿菌藥敏板條CN09、CN13 及革蘭氏陽性球菌藥敏板條P535 作為抗菌藥物藥敏紙片，其源于法國生物梅里埃公司。鑒定并分離全部標(biāo)本病原菌，鑒定系統(tǒng)為Kirby-Bauer 系統(tǒng)，通過肉湯稀釋法對(duì)抗菌藥物最小抑菌濃度進(jìn)行檢測，并分析分離細(xì)菌的耐藥性。根據(jù)相關(guān)檢測標(biāo)準(zhǔn)開展檢測。

1.3 觀察指標(biāo)

分析菌株分布狀況及臨床常見菌株耐藥性。

2 結(jié)果

2.1 分析菌株分布狀況

本研究分離出350 株菌株，常見菌株包括大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌等。本次研究中，除了監(jiān)測到上述菌株，還包括變形桿菌屬、不動(dòng)桿菌屬、腸球菌、克雷伯均屬、腸桿菌屬和枸櫞酸菌屬，見表1。

表1 臨床細(xì)菌分布狀況分析表

2.2 臨床常見菌株耐藥性分析

金黃色葡萄球菌對(duì)氨芐西林及青霉素G 的MRSA 敏感性分別是100%和100%，而上述兩種藥物對(duì)MSSA 耐藥率分別是89.36%和93.62%；凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)氨芐西林及青霉素G 的MRCNS敏感性分別是100%和100%；而上述兩種藥物對(duì)MSCNS 耐藥率分別是91.07%和92.83%，見表2。

表2 分析臨床常見菌株耐藥性[n（%）]

3 討論

據(jù)有關(guān)資料顯示，細(xì)菌耐藥性基因較多，在抗菌藥物使用量不斷增加的同時(shí)，細(xì)菌耐藥性問題越來越突出，多種耐藥菌株不斷增加，從一定程度上對(duì)臨床治療效果造成了影響[5]。所以，有關(guān)人員加強(qiáng)了對(duì)細(xì)菌耐藥性問題的重視程度，并將其視為研究的重點(diǎn)，其同樣發(fā)展成為臨床上需要解決的問題[6]。臨床上，抗生素藥物使用期間，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)抗生素種類的選擇，通過科學(xué)、合理對(duì)策，確保抗菌藥物使用的合理性和可靠性，防止產(chǎn)生細(xì)菌耐藥性[7]。經(jīng)過本次研究結(jié)果可知，本次研究分離出350 株菌株，較為常見的細(xì)菌包括變形桿菌屬、凝固酶陰性葡萄球菌、腸球菌、金黃色葡萄球菌、腸桿菌屬、銅綠假單胞菌、枸櫞酸菌屬、大腸埃希菌、克雷伯菌屬和不動(dòng)桿菌屬。金黃色葡萄球菌對(duì)氨芐西林就青霉素G 的甲氧西林敏感性分別是100%和100%，而上述兩種藥物的甲氧西林耐藥率分別是89.36%和93.62%；凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)氨芐西林及青霉素G 的MRCNS 分別是100%和100%，而上述兩種藥物的MSCNS 分別是91.07%和92.83%。通過上述數(shù)據(jù)可知，就萬古霉素類和碳青霉素類藥物等，其屬于能夠有效殺滅耐藥菌的抗生素，使用該類藥物過程中，可延長此類藥物使用時(shí)間，以便促進(jìn)治療效果和提高[8]。通過本次研究結(jié)果可知，銅綠假單胞菌對(duì)左氧氟沙星耐藥性相對(duì)明顯，但是，對(duì)環(huán)丙沙星的耐藥性銅綠假單胞菌耐藥率相對(duì)較低，同銅綠假單胞菌的抗菌活性相比，環(huán)丙沙星治療效果更為顯著，因此值得進(jìn)一步采取和推廣[9]。腸桿菌屬尤其是大腸埃希菌和克雷伯菌，由其產(chǎn)生的超光譜β-內(nèi)酰胺酶，在β-內(nèi)酰胺類藥物、查諾酮類耐藥性方面更強(qiáng)，基于此，使得臨床治療難度增加。超光譜β-內(nèi)酰胺酶中氨基酸序列變化明顯，使得藥物催化腔面積增加，同時(shí)增強(qiáng)了其對(duì)光譜頭孢菌素親和力[10]。所以，他唑巴坦和哌拉西林在超光譜β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合物中的敏感性較高，值得在臨床上采納。

通過分析標(biāo)本接種特點(diǎn)和細(xì)菌分離特點(diǎn)等，并根據(jù)有關(guān)規(guī)范流程開展操作，應(yīng)以中華醫(yī)學(xué)會(huì)組織分會(huì)編寫的《臨床微生物檢驗(yàn)操作規(guī)范》為依據(jù)開展各項(xiàng)操作。細(xì)菌藥敏試驗(yàn)開展期間，利用自動(dòng)分化儀能夠?qū)⒛退幝实扔嘘P(guān)數(shù)據(jù)清楚地反映出來[11]，監(jiān)測特殊耐藥菌，同時(shí)也可以在短時(shí)間將檢測結(jié)果展示出來，紙片瓊脂擴(kuò)散法的優(yōu)點(diǎn)包括價(jià)格低廉、操作方便、簡單、快捷等，具有較高的使用率[12]，所以，通常用于微生物檢測中，但是其只針對(duì)部分細(xì)菌檢測有效，有些細(xì)菌無法采用該方法檢測。

細(xì)菌耐藥性檢測方法有耐萬古霉素腸球菌檢測、耐甲氧西林葡萄球菌檢測、直接β-內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)和超光譜β-內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)等[13]。細(xì)菌需要長時(shí)間檢驗(yàn)，所以，應(yīng)制定相對(duì)完善的微生物檢驗(yàn)分級(jí)報(bào)告制度。分離細(xì)菌后，若血培養(yǎng)結(jié)果以陽性呈現(xiàn)出來，則需要立即向有關(guān)醫(yī)生匯報(bào)，并對(duì)涂片實(shí)施染色操作，對(duì)染色形態(tài)進(jìn)行評(píng)估[14]。臨床醫(yī)生開展治療過程中，可以自身經(jīng)驗(yàn)為依據(jù)予以患者相應(yīng)的治療，然后根據(jù)檢測結(jié)果調(diào)整治療方案，采用鏡檢方式檢測原始標(biāo)本，培養(yǎng)符合標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)菌，將不合格標(biāo)本剔除，對(duì)主要病原菌進(jìn)行明確，最終解釋培養(yǎng)結(jié)果并提供相關(guān)數(shù)據(jù)[15]。

準(zhǔn)確規(guī)范并管理抗菌藥物的使用，定期組織微生物檢驗(yàn)人員學(xué)習(xí)有關(guān)理論知識(shí)并進(jìn)行培訓(xùn)，以此促進(jìn)檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的提高[16]。醫(yī)院發(fā)展期間，應(yīng)設(shè)立專門的微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，要求實(shí)驗(yàn)室人員具備一定的專業(yè)技能和綜合素質(zhì)，并對(duì)實(shí)驗(yàn)室專業(yè)性進(jìn)行要求，要求內(nèi)容如下：消毒滅菌室、接收室、無菌室、標(biāo)本接種室、培養(yǎng)基配置室、細(xì)菌分離室、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物觀察室等。將超干凈工作臺(tái)和具有一定安全的生物安全柜設(shè)置在細(xì)菌分離室和標(biāo)本接種室，建立健全生物安全管理制度，避免由于外界因素導(dǎo)致工作人員感染，降低有毒株散發(fā)引起的環(huán)境污染率。醫(yī)院發(fā)展期間，應(yīng)不斷更新操作技術(shù)，包括微生物鑒定技術(shù)、病原微生物分離技術(shù)和微生物培養(yǎng)技術(shù)等。

總而言之，臨床上將微生物檢驗(yàn)工作做好尤為重要，密切檢測細(xì)菌耐藥性在臨床藥物治療中發(fā)揮著重要作用。要想促進(jìn)檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的提高，則需要定期組織微生物檢驗(yàn)工作人員學(xué)習(xí)理論知識(shí)并進(jìn)行實(shí)踐操作，要求有關(guān)專家開展講座，提高微生物檢驗(yàn)工作人員專業(yè)水平，建立健全抗菌藥物使用管理制度，并構(gòu)建合理的微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，更新微生物鑒定技術(shù)、培養(yǎng)技術(shù)和分離技術(shù)，促進(jìn)微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室人員專業(yè)水平和綜合素質(zhì)的提高。與此同時(shí)，對(duì)細(xì)菌藥敏試驗(yàn)的條件及方法進(jìn)行嚴(yán)格規(guī)范，不斷完善質(zhì)量管理，促進(jìn)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測水平及微生物檢驗(yàn)水平的提高，以便更好的開展臨床治療工作。