生長激素治療前后矮小癥兒童血清生長激素釋放肽、攝食抑制因子1水平的變化及意義

王玉 解欣 柏金秀 程亞穎

1河北大學附屬醫院兒科（河北保定071000）；2河北大學醫學部臨床醫學系（河北保定071000）；3河北省人民醫院兒科（石家莊050051）

矮小癥患兒是指兒童的身高低于同年齡、同性別、同種族兒童平均身高的2 個標準差，骨齡落后實際年齡2 歲以上，每年生長速度不超過5 cm，且需排除遺傳代謝疾病、營養不良及器質性的疾病。矮小患兒常表現出身材矮小、生長速率減慢、代謝異常、骨成熟延遲，主要因內分泌代謝疾病、生長激素缺乏或分泌不足、家族性等因素所致，對患兒的正常生活產生了生理和心理的雙重影響［1］。Ghrelin 主要由胃底的X∕A 樣細胞分泌，是能夠作用于垂體而調節腺垂體生長激素分泌的內源性物質，可通過旁分泌或內分泌的方式對生長激素（growth hormone，GH）的釋放產生影響，還能夠控制能量平衡、刺激食欲、影響胃酸分泌和胃蠕動［2］。Nesfatin-1 是一種分泌性肽，廣泛分布在腦干中樞神經系統、下丘腦、胰島和外周胃腸等組織中，能夠調節攝食［3］。已有研究［4］指出其與胰島素抵抗和糖代謝紊亂等有一定相關性。本研究給予矮小患兒重組人生長激素治療，并選取血清ghrelin 和nesfatin-1 水平作為監測指標，以期能夠發現其在矮小患兒中的臨床意義，為后期臨床治療提供參考。現分析報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2015年10月至2018年11月期間我院收治的98 例矮小患兒為研究對象，依據胰島素和可樂定兩種藥物行GH 激發試驗將患兒分為3 組，生長激素缺乏（growth hormone deficiency，CGHD）組27 例，生長激素部分缺乏（partial absence of growth hormone，PGHD）組32 例，特發性矮小癥（idiopathic short stature，ISS）組39 例。并選取同期來我院進行健康檢查的30 名健康同齡兒童作為正常對照組。CGHD 組中男17 例，女10 例。年齡3 ～7 歲，平均（4.8 ± 1.9）歲；PGHD 組中男21例，女11 例。年齡3 ～7 歲，平均（4.5±1.7）歲；ISS組中男23 例，女16 例。年齡3 ～7 歲，平均（4.5 ±1.9）歲；對照組中男18 例，女12 例。年齡3 ～7 歲，平均（4.5±1.4）歲。4 組的一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法給予98 例患兒重組人生長激素（recombinant human growth hormone，rhGH）治療，每晚睡前0.5 h 在臍周進行皮下注射，劑量為0.1 IU∕（kg·d），用藥6 個月。

1.3 觀察指標比較正常身高兒童和矮小患兒用藥前（T1）、用藥3 個月（T2）、用藥6 個月（T3）的血清ghrelin 水平、nesfatin-1 水平和生長速率。（1）血清ghrelin 水平、nesfatin-1 水平：取患兒清晨空腹靜脈血3 mL，離心取上層血清，采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清ghrelin 水平（欣博盛生物科技有限公司生產的人Ghrelin∕GHRL ELISA 試劑盒）和nesfatin-1 水平（武漢博士德生物工程有限公司生產的Human Nesfatin-1 ELISA Research Reagent 試劑盒）；（2）生長速率：測量并記錄各組患兒的BMI、身高，并計算GV。

1.4 統計學方法采用SPSS 20.0 軟件包進行統計學分析，計量資料組間比較采用t檢驗，多組間比較采用方差，組內兩兩比較采用LSD-t檢驗，以P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 各時間點血清ghrelin 水平比較治療前PGHD 組、ISS 組患兒的血清ghrelin 水平高于對照組，CGHD 組患兒的血清ghrelin 水平低于對照組患兒，CGHD 組患兒治療后血清ghrelin 水平較治療前逐漸升高，PGHD 組和ISS 組患兒治療后血清ghrelin 水平較治療前逐漸降低，各時間點血清ghrelin水平由低到高依次為CGHD 組、ISS 組和PGHD 組，差異具有統計學意義（P ＜0.05）。見表1。

2.2 各時間點血清nesfatin-1 水平比較各時間點CGHD 組和PGHD 組患兒的血清nesfatin-1 水平均高于ISS 組和對照組，CGHD 組和PGHD 組患兒治療后血清nesfatin-1 水平較治療前下降，各時間點血清nesfatin-1 水平由低到高依次為ISS 組、PGHD 組和CGHD 組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。治療前與治療后ISS 組患兒的血清nesfatin-1 水平無顯著變化（P＞0.05），ISS 組患兒與對照組比較血清nesfatin-1 水平差異無統計學意義（P ＞0.05）。見表2。

2.3 各時間點生長速率比較治療前CGHD 組、PGHD 組、ISS 組患兒的BMI、身高和GV 均低于對照組，3 組患兒治療后BMI、身高和GV 較治療前均逐漸升高，各時間點BMI、身高和GV 由低到高依次為CGHD 組、PGHD 組、ISS 組，差異具有統計學意義（P ＜0.05）。見表3。

表1 各時間點血清ghrelin 水平比較Tab.1 Comparison of serum ghrelin levels at different time points ±s，pg∕mL

表1 各時間點血清ghrelin 水平比較Tab.1 Comparison of serum ghrelin levels at different time points ±s，pg∕mL

注：不同字母表示同一時間點不同組間比較，P ＜0.05；與同組T1時間點比較，*P ＜0.05；與同組T2時間點比較，#P ＜0.05

分組CGHD 組PGHD 組ISS 組對照組F 值P 值例數27 32 39 30 T1 T2 T3 3 796.54±169.74a*#4 390.33±172.11c*#3 995.09±264.13b*#-60.732＜0.001 3 121.44±112.65a 6 576.33±164.32d 6 049.42±795.38c 4 955.08±214.66b 320.381＜0.001 3 575.52±137.62a*5 974.63±179.23c*4 775.89±342.63b*-674.871＜0.001

表2 各時間點血清Nesfatin-1 水平比較Tab.2 Comparison of serum Nesfatin-1 levels at different time points ±s，pg∕mL

表2 各時間點血清Nesfatin-1 水平比較Tab.2 Comparison of serum Nesfatin-1 levels at different time points ±s，pg∕mL

注：不同字母表示同一時間點不同組間比較，P ＜0.05；與同組T1時間點比較，*P＜0.05；與同組T2時間點比較，#P ＜0.05

分組CGHD 組PGHD 組ISS 組對照組F 值P 值例數27 32 39 30 T1 T2 T3 156.53±26.74c 112.42±21.32b 48.59±12.32a 46.32±12.74a 247.472＜0.001 94.53±21.68c*82.87±18.69b*44.63±15.63a-68.424＜0.001 68.31±19.36c*#58.39±15.22b*#42.74±11.26a-24.055＜0.001

表3 各時間點生長速率比較Tab.3 Comparison of growth rates at different time points ±s

表3 各時間點生長速率比較Tab.3 Comparison of growth rates at different time points ±s

注：同一時間點不同組間比較，aP＜0.05，bP＜0.05；與同組T1時間點比較，*P＜0.05；與同組T2時間點比較，#P＜0.05

生長速率指標時間點T1對照組（n=30）20.18±2.89b BMI（kg∕m2）T2 T3- -T1 97.40±9.39b身高（cm）T2 T3- -T1 6.40±0.70b GV（cm∕年）T2 T3 CGHD 組（n=27）18.12±2.98a 18.53±2.93*19.71±2.95*#86.41±7.92a 88.32±6.48*91.24±5.39*#3.52±0.68a 6.51±1.13*9.44±1.46*#PGHD 組（n=32）18.59±3.32a 18.85±2.42*19.93±2.38*#88.56±6.31a 91.31±7.22*94.14±6.46*#3.69±0.46a 8.43±1.29 11.53±2.16*#ISS 組（n=39）18.89±2.11a 19.99±2.17*21.48±1.52*#91.43±6.72a 94.42±6.67*97.88±7.34*#3.90±0.55a 10.54±4.09*12.89±2.97*#- -F 值3.523 3.284 6.275 11.551 6.499 8.419 155.406 17.367 16.858 P 值0.017 0.042 0.003＜0.001 0.002＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

3 討論

生長是反映兒童健康狀況、遺傳背景和營養狀況的常用標志之一，人的生長和最終身高受到出生時身高和體質量、遺傳因素、激素和營養等因素的共同作用［5］。臨床中目前尚未明確矮小患兒出現的原因，有研究［6］指出下丘腦-生長激素-胰島素樣生長因子1（GHRH-GH-IGF-1）內分泌軸分泌和信息傳遞途徑的缺陷與矮小患兒的出現有一定相關性，矮小癥患兒體內多存在GH 基因突變，缺乏正常生物活性的GH。GHRH-GH-IGF-1 軸作為人體生長發育中最主要的分泌軸，由于IGF和GH分泌不足，外周組織對IGF-1 抵抗等因素可導致該內分泌軸發生功能失調，會導致兒童矮小癥［7］。Ghrelin 為內含28 個氨基酸的生長激素釋放肽，主要由胃底的X∕A 樣細胞分泌，是一種生長激素促分泌素受體（growth hormone secretagogue recepfor，GHS-R）的內源性配體，與GHS-R 結合后可促進GH 釋放，對人體GH-IGF 促生長軸具有重要的調節作用。另有報道顯示ghrelin 與GHS-R 結合后可刺激腺垂體分泌生長激素釋放抑制激素（growth hormone release-inlease-inhibiting hormone，GHRIH），通過負反饋抑制下丘腦對GHRIH 的分泌，從而增加GH 分泌［8］。已有研究指出［9］，由出生至2 歲，人體血液中ghrelin 濃度逐漸升高，2 歲左右達到高峰后開始下降，直至青春期結束時個體血液ghrelin 濃度降低30%～50%，在此期間其濃度與患兒年齡呈負相關。這是由于ghrelin 不僅能夠促進GH 分泌，調控骨發育，還能夠促進攝食，調節體內能量平衡。人體ghrelin 水平與兒童的生長和生長軸有一定相關性［10］。本研究結果顯示，rhGH 治療前PGHD 組、ISS 組患兒的血清ghrelin水平高于對照組，各時間點血清ghrelin 水平由低到高依次為CGHD 組、ISS 組和PGHD 組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。rhGH 治療后，PGHD 組和ISS 組ghrelin 水平明顯下降，且隨治療時間的延長，下降更顯著。通過詳細詢問病史，發現PGHD組和ISS 組的兒童普遍存在食欲減退，食欲較正常兒童差。有偏食、厭食等飲食不良的習慣，且ISS組患兒更為明顯，除身材矮小外，體質量偏低，其體內高水平的ghrelin 并未發揮相應的促生長作用，提示可能存在ghrelin 抵抗或某些信號轉導機制異常［11］。這也說明ghrelin 在不同生長激素峰值水平的矮小癥兒童中扮演的角色不同。

Nesfatin-1 由是核組蛋白2 氨基端水解產生的含82 個氨基酸而組成多肽，廣泛分布在腦干、下丘腦、脂肪和胃黏膜分泌細胞內，能夠抑制攝食，減少機體脂肪含量，增加能量消耗［12］。已有研究指出［13］糖尿病前期患者血清nesfatin-1 水平升高，nesfatin-1 可能通過與胰島素、胰高血糖素等激素相互作用進而調控糖脂代謝紊亂，是機體在糖尿病早期的代償性保護分子，且脂肪細胞是人體內nesfatin-1 的重要來源之一。本文研究結果顯示，各時間點CGHD 組和PGHD 組患兒的血清nesfatin-1 水平均高于iss 組和對照組，各時間點血清nesfatin-1 水平由 低 到 高 依次為ISS 組、PGHD 組 和CGHD 組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。這提示矮小患兒血清Nesfatin-1 水平高于正常同齡兒童，此時患兒體內能量平衡遭到破壞，能量消耗過多，脂肪含量過低，無法滿足代謝和生長的營養需求，導致出現矮小癥患兒［14］。

本文研究結果顯示ghrelin 和nesfatin-1 是兩種與矮小相關的細胞因子，二者均具有調節攝食功能、調整能量平衡等作用，前者主要發揮促進攝食的作用，而后者主要發揮抑制攝食作用。兩者相配合可能影響了兒童生長發育過程。矮小癥患兒治療前生長速率顯著低于正常同齡兒童，這提示血清ghrelin 及nesfatin-1 可能影響了患兒的生長速率，而經治療后生長速率顯著改善，且治療過程中未發現有肥胖兒的出現，考慮與兩者的協同作用相關。臨床中也可將其作為臨床治療的標志以及時改善治療方案，以獲得令人滿意的臨床療效。然而本研究只局限于rhGH 治療后6 個月內矮小癥患兒體內ghrelin、nesfatin-1 的變化，至于兩者隨年齡增長的變化趨勢，需擴大樣本量、延長隨訪時間進行更深入的研究。