王來平 鄭夕同 薛曉敏 陳汝
(1 山東省果樹研究所,泰安271000;2 山東省榮成市農業農村事務服務中心,榮成264300)
矮化自根砧一般由無性繁殖而來, 常采取扦插、壓條等傳統手段。但對于一些蘋果砧木來說,扦插不易生根,難成苗,且插條需求量大,繁育系數低;而壓條雖然能成苗,但繁育過程中需要多次培植,對培植高度和材料配比都有要求,分株起苗時還易對苗木根系造成傷害, 影響緩苗成活,繁殖系數相對較低。與扦插、壓條相比,利用組織培養技術繁育自根苗, 具有繁殖周期短、繁殖系數高、苗木整齊等優點[1]。 因此,組織培養成為高效繁育自根砧苗的重要途徑。 抗重茬砧木‘AM1’(暫定名)扦插難生根,利用組培技術可有效降低蘋果病害, 短時間內能供應大量優良苗木,滿足市場需求。組培苗增殖與生根是組培快繁技術的關鍵步驟, 能否生根及生根好壞直接影響成苗。 本試驗以新引進抗重茬砧木‘AM1’為材料,研究不同激素濃度配比對其增殖與生根的影響,建立組培快繁體系,為生產應用提供大量優質苗木。
從美國引進抗重茬砧木‘AM1’(暫定名),山東省果樹研究所提供, 試驗在山東省泰安惠農園藝科技有限公司進行。
8 月份從母樹上選取新長出的長度約1.0~1.5 cm 的莖尖,消毒后接種到啟動培養基上,培養基為MS+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L,用不同濃度6-BA、6-BA+IBA、6-BA+IBA+NAA 處理(表1),置于光照16 h/d、光照2 000 Lux、溫度24~26 ℃、空氣相對濕度50%~70%條件下進行培養。 將啟動培養后成活良好的外植體接種到增殖培養基上, 增殖培養基為MS+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L,用不同濃度6-BA+IBA 處理(表1),置于光照16 h/d、光照2 000 Lux、溫度24~26 ℃、相對濕度40%~50%條件下進行培養。 將增殖培養后獲得的生長20~25 d、高度大于1.5 cm健壯的組培苗,接種于生根培養基中,生根培養基1/2MS+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L, 用不同濃度IAA、IBA、IAA+IBA 處理(表1),先暗處理7 d 后,再置于光照16 h/d、光照2 000 Lux、溫度25 ℃條件下進行生根培養。 當組培苗根長度達到1.5 cm 后,開始煉苗,光強從2 000~5 000 Lux 逐步過渡,煉苗10~15 d。

表1 不同激素濃度處理 單位: mg/L
從表2~4 可以看出,啟動培養基使用不同濃度6-BA、6-BA+IBA、6-BA+IBA+NAA 處理,不同濃度6-BA+IBA+NAA 處理誘導率普遍高于6-BA、6-BA+IBA 處理, 其中1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+0.05 mg/L NAA 處理誘導率最高, 達到83.33%;6-BA+IBA 處理效果普遍高于6-BA 處理, 其中1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA 效果較好,達到76.67%;6-BA 處理效果普遍較差, 其中1.0 mg/L 6-BA 效果較6-BA 處理其它濃度好,萌芽率達到70.00%。

表2 6-BA 濃度對外植體誘導率的影響

表3 IBA 濃度對外植體誘導率的影響

表4 NAA 濃度對外植體誘導率的影響
從表5 看出,使用0.5 mg/L 的6-BA,增殖系數隨著IBA 濃度增大而增大,IBA 濃度0.15mg/L時最大,達到4.15,但砧木苗出現卷葉現象;使用1.0 mg/L 的6-BA,增殖系數隨著IBA 濃度增大,出現先增大后降低的趨勢,IBA 濃度0.1 mg/L 時增殖系數最大,達到5.14,且砧木苗綠色、葉大,生長較好;使用1.5 mg/L 的6-BA,增殖系數隨著IBA 濃度增大, 出現先降低又升高的趨勢,IBA濃度0.15 mg/L 時增殖系數最大,達到5.13,但出現玻化苗現象,因此增殖培養基最佳激素濃度為1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA。
從表6 看出,使用1.0 mg/L 的IAA,生根率隨著IBA 濃度增大而呈先升高后降低趨勢,而生根條數呈增大趨勢, 根長呈先降低后增高的趨勢。 其中IBA 濃度1.0 mg/L 時生根率最高,為94.86%,IBA 濃度1.5 mg/L 時, 生根條數最多, 為6.86 條,IBA 濃度0.5 mg/L 時, 根長最長,為2.12 cm;使用1.5 mg/L 的IAA,生根率、生根條數隨著IBA 濃度增大而降低,IBA 濃度為0.5 mg/L 時,生根率達100%,生根8.26 條;IBA 濃度1.0 mg/L 時,根長最長;使用2.0 mg/L的IAA, 生根率隨著IBA 濃度增大而降低,而生根數、 根長最大值出現在使用1.5 mg/L 的IBA 時,分別為7.48 條和2.21 cm。養基,增殖系數高達5.14;采用1/2MS+IAA 1.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L 生根培養基,生根率高達100%,根長多超過2 cm,移栽成活率在90%以上。 通過連續啟動培養、增殖培養、生根培養和移栽,可實現工廠化育苗,為蘋果產業的更新發展提供資源基礎。

表5 6-BA 和IBA 濃度對AM1 砧木增殖系數和生長狀態的影響

表6 IAA 和IBA 濃度對AM1 砧木生根的影響
近幾年關于蘋果砧木的組培快繁常有報道,許多矮化砧木都成功獲得組培苗[2-4]。蘋果砧木組培快繁不同砧木類型所需培養基中各種激素濃度配比不相同。本方法采用MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L 啟動培養基,成活率高達80%以上,可建立有效的組培苗群體;采用MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L 增殖培