小兒厭食癥模型大鼠血清代謝組特征探析

張鴻彬，藺湘寧，王鵬飛，尚菁，王強，李玉霞，段淑文，王小榮*

(1.甘肅中醫藥大學，甘肅 蘭州 730000；2.石家莊平安醫院，河北 石家莊 050000)

小兒厭食癥(Infantile anorexia,IA)[1]是指以小兒長期食欲減退或食欲缺乏為主要癥狀的一種疾病。中醫古代文獻中并無厭食癥病名，但依據證候學可將其歸為“傷食”“積滯”“疳積”等范疇。屬于學齡前兒童和青少年時期最為常見的疾病之一，由于這個時期的兒童正處于生長發育期，若不能攝取足夠的營養物質，則會影響正常發育，出現發育遲緩，免疫力下降和智力障礙等一系列問題。

代謝組學是近年來發展起來的一種新興學科，是研究生物體被擾動后其代謝產物(一般指相對分子質量<1 000的小分子代謝物質)的種類、數量及變化規律的科學[2]。代謝組學技術已經在實驗動物模型評價中展現了其特色和明顯的優勢[3-4]。但關于IA的代謝組學研究目前還少有報道，本研究利用代謝組學研究方法，以IA模型大鼠血清為研究對象，采用LC-Q/TOF-MS液相色譜-質譜聯用技術，通過化學計量學模式識別的方法，發現潛在生物標志物并鑒定，解析代謝通路，初步從代謝組學角度探析IA的生物學本質。

1 材料

1.1 儀器與設備

采用美國安捷倫科技公司LC-Q/TOF-MS儀器分析平臺；VELOCITY 18R臺式高速離心機(澳大利亞Dynamica公司)；DV314C精密電子分析天平(美國奧豪斯公司)；ULFT386冰箱(美國Thermo公司)。

1.2 試劑與藥物

LC-MS級乙腈(德國Merck公司)；HPLC級甲醇(德國Merck公司)；甲酸(上海CNW公司)；超純水(德國Merck公司)；2-氯苯丙氨酸[吉爾生化(上海)有限公司]；高脂飼料(北京科奧協力飼料有限公司)。

1.3 實驗動物

斷乳后1周齡的SPF級SD大鼠120只，雌雄各半，體質量(60±10)g，由甘肅中醫藥大學動物實驗中心提供，許可證號：SCXK(甘)2015-0005。飼養于甘肅中醫藥大學科研實驗動物中心，環境溫度(22±2)℃，相對濕度(50±20)%，明暗周期為12 h。

2 實驗方法

2.1 實驗分組

適應性喂養1周后，按雌雄及體質量根據隨機數表法分為空白組(K組)20只，模型組(M組)100只。

2.2 模型制備

參照汪受傳等[5]特制高脂飼料喂養幼齡大鼠建立IA模型的方法，各組大鼠雌雄分開，空白組以常規飼料喂養，模型組以高脂飼料喂養(采用奶粉、玉米粉、鮮雞蛋、鮮肥肉、魚肉松、黃豆粉和白糖按比例混勻制成)，自由進食飲水，共飼養5周。……