Xklp2靶蛋白在結直腸癌中的表達及與其臨床病理特征的關系

賈 樂 尚淑平

數據顯示，結直腸癌屬于消化道常見腫瘤之一，位居惡性腫瘤死亡率第4位[1]。我國近些年結直腸癌發病率及死亡率也呈現遞增趨勢，35歲以上人群中結直腸癌的發病率約為24～32/10萬，死亡率約為4.0%，位居我國惡性腫瘤發病第三位和死亡第五位，對居民生命健康造成嚴重威脅[2]。近些年流行病學及分子生物學的發展，使結直腸癌的高危因素及相關基因逐漸明確[3]。TPX2是1種受細胞周期嚴格調控的相關蛋白，在細胞有絲分裂中發揮重要作用[4]，本文作者通過研究發現，TPX2在結直腸癌患者中呈現高表達狀態，其表達水平與患者TNM分期、浸潤深度及是否存在淋巴結轉移存在明顯關聯，且TPX2表達與患者癌細胞增殖及血管新生過程是否有關，現詳述如下。

1 材料與方法

1.1 資料

選擇2015年1月至2017年1月于寶雞市中醫醫院進行治療的30例結直腸癌患者與銅川市礦務局中心醫院進行治療的37例結直腸癌患者為研究對象，采集其結直腸癌組織標本及癌旁組織標本，另選取70例正常結直腸黏膜作為對照組，67例結直腸癌患者中男性37例，女性30例，年齡44～68歲，平均年齡(53.06±2.65)歲，70例正常對象中男性35例，女性35例，年齡45～69歲，平均年齡(53.18±1.98)歲，兩組一般資料如性別、年齡等對比差異不具有統計學意義。

納入標準：①結直腸癌患者均經病理學診斷確診；②病歷資料齊全；③結直腸癌患者未接受放化療、免疫治療；④調研經醫院倫理學會批準實施；⑤研究對象及其家屬對本次調研過程、方法、原理等清楚明白并簽署知情同意書。

排除標準：①合并精神障礙者；②合并其他惡性腫瘤者③既往放化療史。

1.2 方法

取結直腸癌患者癌組織、癌旁組織，取健康對照組患者結直腸癌黏膜，使用液氮及多聚甲醛進行固定后使用石蠟包埋，連續切取4 μm切片，逐級脫蠟至水，使用雙氧水沖洗，高溫高壓修復，加入一抗，放入濕盒內，置于4 ℃保存，加入生物素標記，室溫放置20 min，脫水處理后封片，置于電子顯微鏡下觀察；抽取結直腸癌患者空腹靜脈血5 ml，分離血清后檢測其血清CEA及VEGF水平。

1.3 觀察指標及評測標準

1.3.1 不同組織TPX2表達陽性率檢測 對結直腸癌組織、癌旁組織及正常結直腸黏膜TPX2的表達陽性率進行觀測，標本檢測陽性率根據其免疫組化結果及陽性細胞比例進行記錄，免疫組化結果判定選擇如下方式：根據其著色強度，無色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，褐色、黑色為3分；陽性細胞比例按如下標準：≤10%為1分，11%～50%為2分，51%～75%為3分，75%以上為4分，兩項相乘<3分為陰性，≥3分為陽性[5]。

1.3.2 TPX2陽性率與臨床病理關系 對結直腸癌患者臨床病理特征進行分析，就其癌組織TPX2表達陽性率與其性別、年齡、TNM分期、是否存在淋巴結轉移、分化程度、病灶大小、浸潤深度之間的關系進行探究。

1.3.3 TPX2表達陽性率與其1年生存率關系 根據結直腸癌患者TPX2表達是否為陽性將其區分為陽性組與陰性組，對兩組患者進行1年遠期隨訪，對比其生存率。

1.3.4 TPX2表達陽性率與其癌細胞活力及血管新生關系 根據結直腸癌患者TPX2表達是否為陽性將其區分為兩組，分析對比兩組患者的血清CEA及VEGF水平。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 不同組織TPX2表達陽性率對比

經評估對比，癌組織TPX2表達陽性率85.07%(57/67)高于癌旁組織34.33%(23/67)，癌旁組織高于正常組織8.57%(6/70)(P均<0.05)。

2.2 TPX2陽性率與其臨床病理的關系

經評估對比，發現TPX2表達陽性率與結直腸癌患者TNM分期、浸潤深度及是否淋巴結轉移存在密切聯系(P<0.05)，與患者性別、年齡、分化程度、腫瘤直徑不存在明顯聯系(P>0.05)，見表1。

表1 TPX2陽性率與結直腸癌臨床病理的關系(例，%)

2.3 TPX2表達陽性與患者1年生存率的關系

經檢查，結直腸癌中TPX2表達陽性患者為57例，陰性者為10例，隨訪1年示，陽性患者1年生存率為63.16%(36/57)，陰性患者1年生存率為80.00%(8/10)，兩組對比差異具有統計學意義(P<0.05)。

2.4 TPX2表達陽性與其癌細胞活力及血管新生關系

經評估對比，TPX2陽性結直腸癌患者血清CEA及VEGF水平明顯高于陰性組患者，對比差異具有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 TPX2表達陽性率與其癌細胞活力及血管新生關系

3 討論

結直腸癌是全球三大惡性腫瘤之一，也是我國常見惡性腫瘤，數據顯示，30年來我國結直腸癌發病率以每年3%～4%的比率不斷攀升，雖然我國2012年結直腸癌標化發病率為14.2/10萬，位居世界第75位，暫處非高發水平，但我國結直腸癌的發病和死亡總例數卻位居世界第一位，據國家癌癥中心全國腫瘤登記數據報告，我國結直腸癌病死率位居惡性腫瘤第4位，已經成為威脅居民生命健康的重要因素[6-7]。早期的檢測及干預可提高結直腸癌患者的生活質量，延長其生存期的重要手段，以往結直腸癌病情判斷多依賴病理學檢查，此方式檢驗周期長、患者較為痛苦，臨床推廣難度也較大。近些年，隨著對腫瘤細胞和分子水平研究的深入，各類腫瘤標志物在惡性腫瘤病情分析及預后判斷中發揮出越來越重要的作用[8]。

TPX2是脊柱動物中一類新的紡錘體成分家族，該物質為組成紡錘體的微管蛋白，廣泛分布于S期和G2期，在細胞的有絲分裂中發揮著重要作用，此類物質的表達水平受到細胞周期的嚴格調控，隨著細胞周期的變化而不斷變動，其異常表達往往與細胞核的異常增殖有密切聯系。學者熊超[9]通過將42例結直腸癌組織與癌旁組織進行切片染色對比的方式發現，結腸癌組織TPX2蛋白陽性表達率明顯高于癌旁組織，該學者分析認為，TPX2能夠與Aurora A激酶相互作用從而促進該蛋白在紡錘體中定位，從而起到啟動有絲分裂及紡錘體聚集的作用，因而其高表達，提示細胞正處于積極分裂狀態，與癌組織的增殖擴散密切相關。學者劉潔等[10]也通過將72例結直腸癌、68例不典型增生組織及42例正常結直腸黏膜進行對比分析的方式發現，TPX2在3組標本中的表達水平呈現明顯差異，表達陽性率分別為66.7%、47.0%及7.1%，同時該研究還指出，TPX2表達與結直腸癌患者的臨床分期、浸潤深度密切相關，表明TPX2可能與結直腸癌的發生、發展有聯系。

本文比對分析發現，癌組織TPX2表達陽性率高于癌旁組織，癌旁組織高于正常組織，同時本研究還發現，TPX2表達陽性率與結直腸癌患者TNM分期、浸潤深度及是否存在淋巴結轉移存在密切聯系。本文作者分析認為，TPX2的過量表達能夠促進微管的形成，對細胞有絲分裂起促進作用，同時TPX2還能夠從細胞核逃逸以調解非有絲分裂細胞的微管細胞骨架，因而該物質能夠影響細胞周期，現階段已有多項研究證明，TPX2在肝癌、胃癌、胰腺癌、肺癌等都存在多表達狀態，分析其原因為TPX2能夠使細胞中心體異常擴增，使細胞遲滯于G2/M期，抑制細胞的凋亡，促進細胞增殖，從而促進腫瘤病灶的生長。本文研究同時發現，TPX2表達陽性患者其血清CEA及VEGF水平明顯高于表達陰性患者，CEA是臨床上常用的腫瘤標志物，能夠反映腫瘤的負荷程度及癌細胞的活力，而VEGF是介導血管新生的重要物質，其高表達提示血管正處于積極生長狀態，與癌組織擴散增殖有密切聯系，也印證了TPX2與腫瘤生長相關這一觀點。

總而言之，TPX2在結直腸癌患者中呈現高表達狀態，其表達水平與患者TNM分期、浸潤深度及是否存在淋巴結轉移存在明顯關聯，且TPX2表達與患者癌細胞增殖及血管新生過程有一定聯系，可以將該物質作為新的腫瘤標志物，對結直腸癌患者病情進行判斷。