膀胱癌患者血清血小板因子4的表達(dá)及臨床意義

（寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院東部院區(qū) 泌尿外科，浙江 寧波 315040）

膀胱癌發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，膀胱癌生長(zhǎng)依賴新生血管，膀胱癌細(xì)胞需要的大部分營(yíng)養(yǎng)由血管供應(yīng)，血管新生為膀胱癌細(xì)胞分裂、增殖和侵襲轉(zhuǎn)移提供了條件[1]。血管生成受血管生成調(diào)節(jié)因子調(diào)節(jié)。血小板因子4（platelet factor 4, PF4）具有抑制惡性腫瘤血管生成的作用，在肝癌等惡性腫瘤中發(fā)揮重要作用[2]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）為血管生成重要的調(diào)控因子，缺氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α）在血管生成中也發(fā)揮重要作用[3-4]。本文對(duì)血清PF4水平與膀胱癌、VEGF、HIF-1α的相關(guān)性進(jìn)行研究，探討血清PF4在膀胱癌中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年1月—2015年12月寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院泌尿外科收治的膀胱癌患者130例作為膀胱癌組，選取本院健康體檢者130例作為對(duì)照組。膀胱癌組中男性77例，女性53例；平均年齡（63.42±9.53）歲；腫瘤平均直徑（3.32±1.18）cm，腫瘤分期：Ta期19例、T1期31例、T2期30例、T3期43例及T4期7例；腫瘤分級(jí)：低級(jí)別65例、高級(jí)別65例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移59例、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移71例。對(duì)照組男性72例，女性58例；平均年齡（63.64±9.73）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：對(duì)照組身體健康；膀胱癌組患者經(jīng)術(shù)后病理確診為膀胱癌，首次診斷患者，術(shù)前未進(jìn)行放化療及生物靶向治療等其他治療，術(shù)后隨訪3年，病歷資料及隨訪資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重肝、腎等臟器功能異常者，其他惡性腫瘤者，血液系統(tǒng)疾病者，自身免疫性疾病者，近1個(gè)月內(nèi)免疫制劑及激素治療者。兩組性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。患者均簽署知情同意書(shū)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批。

1.2 方法

收集膀胱癌組患者術(shù)前靜脈血和對(duì)照組體檢當(dāng)天靜脈血，采用ELX800全自動(dòng)酶免分析儀（美國(guó)寶特）測(cè)定血清PF4、HIF-1α及VEGF水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用t檢驗(yàn)；膀胱癌預(yù)后影響因素采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型；相關(guān)分析用Pearson法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清PF4、HIF-1α及VEGF水平比較

兩組血清PF4、HIF-1α及VEGF水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），膀胱癌組均高于對(duì)照組。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清PF4、HIF-1α及VEGF水平比較（n =130，±s）

表1 兩組血清PF4、HIF-1α及VEGF水平比較（n =130，±s）

組別 PF4/（ng/ml） HIF-1α/（μg/L）VEGF/（pg/ml）對(duì)照組 0.17±0.10 4.63±0.84 7.13±1.24膀胱癌組 0.42±0.14 24.16±1.01 18.76±1.37 t值 16.568 169.508 70.982 P值 0.000 0.000 0.000

2.2 不同因素膀胱癌患者血清PF4水平比較

不同腫瘤分期患者血清PF4水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），T2～T4患者高于Ta、T1患者；不同性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清PF4水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 膀胱癌預(yù)后的Cox分析

單因素Cox分析結(jié)果顯示，腫瘤大小、腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血清PF4、HIF-1α及VEGF水平與膀胱癌的預(yù)后有關(guān)（P＜0.05）。見(jiàn)表3、4。

將膀胱癌預(yù)后作為因變量，將單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素作為自變量納入Cox回歸模型。引入水準(zhǔn)為0.05，剔除水準(zhǔn)為0.10。多因素分析結(jié)果顯示，腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、PF4、HIF-1α及VEGF水平為膀胱癌預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。見(jiàn)表5。

2.4 膀胱癌患者血清PF4與血清HIF-1α、VEGF水平的相關(guān)性

膀胱癌患者血清PF4與血清HIF-1α、VEGF水平呈正相關(guān)（r=0.591和0.624，均P=0.000）。

表2 不同因素膀胱癌患者血清PF4水平比較（ng/ml，±s）

表2 不同因素膀胱癌患者血清PF4水平比較（ng/ml，±s）

因素 n PF4 t值 P值性別男77 0.43±0.05 1.789 0.077女53 0.41±0.07年齡≥65歲 71 0.44±0.09 1.710 0.090＜65歲 59 0.41±0.11腫瘤大小≥3 cm 67 0.43±0.10 1.894 0.061＜3 cm 63 0.40±0.08腫瘤分期Ta、T1 50 0.34±0.07 16.464 0.000 T2～ T4 80 0.53±0.06腫瘤分級(jí)低65 0.44±0.12 1.900 0.060高65 0.40±0.12淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有59 0.43±0.11 1.871 0.064無(wú)71 0.39±0.13

表3 膀胱癌預(yù)后影響因素的賦值參數(shù)

續(xù)表3

表4 膀胱癌預(yù)后的單因素Cox分析參數(shù)

表5 膀胱癌預(yù)后的多因素Cox分析參數(shù)

3 討論

膀胱癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其生長(zhǎng)具有血管依賴性，血管新生是膀胱癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵，是局部浸潤(rùn)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的主要因素[5]。新生血管的發(fā)生受血管生成調(diào)節(jié)因子調(diào)節(jié)，正常情況下，促血管生成因子和抑制血管生成因子處于平衡狀態(tài)，在多種內(nèi)外因素的作用下，上述平衡被打破，當(dāng)促血管生成因子占優(yōu)勢(shì)時(shí)，血管內(nèi)皮細(xì)胞受到刺激產(chǎn)生金屬蛋白酶等溶解細(xì)胞外基質(zhì)，使血管內(nèi)皮細(xì)胞以出芽的方式形成新生血管，從而促進(jìn)惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲、轉(zhuǎn)移；當(dāng)抑制血管生成因子占優(yōu)勢(shì)時(shí)則抑制新生血管生成[6]。

PF4基因位于4號(hào)染色體上，主要由巨核細(xì)胞合成，少數(shù)由成熟血小板合成。PF4蛋白儲(chǔ)存在血小板a顆粒中，當(dāng)血小板活化時(shí)PF4蛋白以PF4-蛋白多糖復(fù)合物形式從血小板α顆粒釋放到血液中[7-8]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)PF4在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，如PF4可促進(jìn)肺癌生長(zhǎng)，可誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡，并抑制腫瘤轉(zhuǎn)移[9-12]。檢測(cè)惡性腫瘤血清PF4水平也具有重要意義，如肝細(xì)胞癌患者血清PF4水平升高，血清PF4水平隨肝細(xì)胞癌分期的升高而升高，可作為肝細(xì)胞癌診斷、鑒別診斷和分期的依據(jù)[13]。膀胱癌患者血清PF4水平尚不清楚，本文對(duì)膀胱癌患者血清PF4水平進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)膀胱癌患者血清PF4水平升高，血清PF4水平與膀胱癌患者的分期關(guān)系密切，膀胱癌分期越高血清PF4水平越高，血清PF4為膀胱癌預(yù)后的獨(dú)立影響因素。本研究結(jié)果表明檢測(cè)膀胱癌患者血清PF4水平也具有重要意義，血清PF4水平在膀胱癌的診斷、分期及預(yù)后評(píng)估中具有一定價(jià)值。

VEGF為研究比較多的促血管生成因子，VEGF可通過(guò)和受體結(jié)合促進(jìn)血管生成；VEGF在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲、轉(zhuǎn)移中也具有重要作用：VEGF通過(guò)與受體結(jié)合作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和生長(zhǎng)[14]；誘導(dǎo)惡性腫瘤血管和淋巴管生成，促進(jìn)惡性腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[15]。PF4為與VEGF相關(guān)聯(lián)的一種血管生成調(diào)節(jié)因子，具有抑制血管生成的作用，PF4可通過(guò)抑制VEGF受體激活抑制血管生成，也可通過(guò)抑制VEGF誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞再生抑制血管生成。PF4和VEGF在肝癌中呈顯著相關(guān)性，共同參與肝癌的發(fā)生、發(fā)展[16]。HIF-1α作為一種轉(zhuǎn)錄因子，在細(xì)胞應(yīng)對(duì)缺氧環(huán)境時(shí)發(fā)揮關(guān)鍵作用，在多種缺氧反應(yīng)中發(fā)揮調(diào)控作用[17]；HIF-1α在多種惡性腫瘤中也表達(dá)異常，和惡性腫瘤的血管生成關(guān)系較密切[18]。HIF-1α在參與血管生成中和PF4具有一定關(guān)系，如PF4和HIF-1α聯(lián)合可通過(guò)協(xié)同作用抑制肝細(xì)胞癌裸鼠皮下移植瘤的血管生成[19]。本文發(fā)現(xiàn)血清PF4與血清HIF-1α、VEGF呈正相關(guān)，分析PF4和VEGF作為血管生成相關(guān)因子，在體內(nèi)通過(guò)反饋機(jī)制維持人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，當(dāng)腫瘤組織中VEGF生成增加時(shí)，VEGF進(jìn)入血液循環(huán)，導(dǎo)致血清中VEGF水平升高，血清VEGF誘導(dǎo)巨核細(xì)胞合成和釋放PF4，反饋性抑制VEGF，以維持體內(nèi)血管生成，PF4和HIF-1α在血管抑制作用中具有協(xié)同作用，共同反饋性抑制VEGF對(duì)血管生成的促進(jìn)作用。

綜上所述，膀胱癌患者血清PF4水平升高，血清PF4水平在膀胱癌的診斷、分期和預(yù)后評(píng)價(jià)中具有一定參考價(jià)值，PF4可能通過(guò)抑制血管生成機(jī)制參與膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展。