一次性力竭運動后12h內大鼠肝臟NO含量的變化

李曬曬，張荷玲

1 前言

一氧化氮(NO)在生物體內具有重要作用，其本身是一種難溶于水的脂溶性氣體，在哺乳動物體內大部分細胞中都可以合成，如神經細胞、內皮細胞、肝細胞等[1-2]。NO參與生物體內多種重要的生理過程，可以維持生物體內細胞與組織正常生命活動，其生理作用主要表現為松弛血管平滑肌、抑制血小板凝集、防止心肌肥厚等[3-5]。但如果NO生成過多或過少都會影響其對機體的正常生理效應。如果體內NO過多，可能會誘發人類某些疾病，如糖尿病、中風、循環性休克等。若NO過少，也會使生物體內某些生理功能喪失，從而產生一系列疾病，如高血壓、冠心病、急性心肌梗死等[6-8]。不同類型的運動會使機體各細胞組織內NO含量產生不同的影響[9-11]。肝臟是人體的化學加工廠，是人體最大的消化腺，參與人體消化、免疫、解毒等過程，對人體代謝機能、免疫機能等都有著非常重要的作用。因此通過研究力竭運動后大鼠肝臟NO含量的變化，根據NO的生理病理作用，可以為運動訓練提供理論依據。

2 材料與方法

2.1 材料

2.1.1 模型建立、飼養與分組

由北京維通利華生物科技有限公司提供152只雌性清潔級SD大鼠，200-220克左右，每八只一籠進行飼養，適應性喂養三天。自由飲食和飲水，自然光照，每兩天換一次墊料。飼養溫度為(24±2℃)，相對濕度65%±5%。全部飲食高脂飼料。高脂飲食喂食8周后，選出24只符合標準的肥胖抵抗大鼠，隨機分組，每組6只，建立肥胖抵抗大鼠游泳模型。適應性游泳三天，每天15分鐘。第四天進行一次性力竭運動。每組分別于一次性力竭運動實驗結束后即刻，休息2h后，休息6h后，休息12h后取材。

常規飼料59%、20%豬油、10%雞蛋黃、9.5%蔗糖和1.5%食鹽。常規飼料采用山西醫科大學實驗動物中心的基礎飼料。

實驗大鼠分組分為對照組和實驗組。對照組分為正常對照組，實驗組分為力竭即刻組、力竭2h組、力竭6h組、力竭12h組。

2.1.2 運動訓練方式

對照組不運動，運動組適應性游泳三天，每天15分鐘。第四天進行一次性力竭運動(力竭標準：大鼠下沉10秒不能浮上水面為力竭)。即刻組力竭后即刻處死。其余組力竭后按實驗方案禁食相應時間處死。

游泳池為圓形塑料桶，水溫為32±2℃，每八只大鼠在一桶內進行自由游泳。游泳時間為每天中午12:30-14:00，每周游泳六天，每次90分鐘。所有大鼠先進行適應性游泳運動三天，依次為15分鐘，30分鐘，60分鐘，第四天開始正式的游泳運動。

每周測量體重、體長、腹圍。計算Lee’s指數=體重(g)^(1/3)x1000/體長(cm)。

2.2 實驗方法

將力竭運動后處死的大鼠進行解剖，取出其肝臟進行福爾馬林固定，之后做石蠟切片，通過免疫組化方法對切片進行染色，在光學顯微鏡40倍鏡下觀察切片，對肝臟NO含量進行半定量分析。

3 研究結果

圖1 肥胖抵抗組大鼠肝臟中NO變化隨處死時間的變化

分組平均值±標準差正常對照組21.833±1.2583力竭即刻組17.300±3.0537 ?力竭2h組10.625±1.0308 ?力竭6h組14.875±0.6292 ?力竭12h組19.833±0.2887

注：*表示P<0.05與正常對照組比較有顯著性差異。

圖1顯示肝細胞NO含量隨恢復時間的變化規律：隨著一次性力竭恢復時間的增長，肥胖抵抗組大鼠肝臟中NO含量先減少而后逐漸恢復到運動前水平。

表1顯示：與正常對照組相比，力竭即刻組、力竭2h組與力竭6h組的NO含量下降且均有顯著性差異(P<0.05)；力竭12h組與正常對組相比，NO含量雖然低于正常對照組，但沒有顯著性差異。說明力竭運動后肝臟NO含量明顯降低，且隨著恢復時間的變化，NO含量先下降后上升，休息12h后，與正常對照組無顯著性差異，說明已經恢復到正常水平。

4 分析討論

研究顯示，NO在調節肝臟內血流、物質代謝、氧化損傷過程中發揮著重要的作用[12]。力竭運動后即刻肝臟NO含量顯著下降，24h恢復后NO含量恢復到正常水平[13]。有學者認為，力竭性運動影響NO含量變化的機制可能是：NO的過度生成會引起細胞毒性作用，NO顯著減少可能是對機體的一種保護作用[14]。

作為一種血管舒張因子，NO可使血管舒張，增加器官血流量。器官血流量在很大程度上影響運動能力的高低，因此NO對運動員的運動能力有著非常重要的作用。但多數研究者認為，NO在運動過程中血管舒張的作用并不是決定性的，但在恢復期卻有著非常重要的作用[15]。

本實驗結果顯示：一次性力竭運動能夠改變大鼠肝臟NO的含量：力竭即刻到力竭后2小時期間大鼠肝臟內的NO含量急劇減少，這可能與NO對機體的保護作用有關；而力竭后6小時到力竭后12小時大鼠肝臟內的NO逐漸恢復到運動前水平，則可能與NO具有擴張血管并維持正常的血流的功能有關。

NO可以通過多種機制在肝臟中發揮其病理生理作用，通過研究力竭運動后大鼠肝臟NO含量的變化，可以為更多運動訓練提供理論依據。

5 結論

一次性力竭運動后即刻大鼠肝臟NO含量顯著下降，并在12h后恢復到正常水平，力竭運動對肝臟NO含量帶來明顯影響。這可能與運動后的血液重新分配有關。