黃芪多糖對繁殖獼猴生長性能、血液生理生化指標及腹瀉發病率的影響*

陳麗雄 王俊斌 李艷艷 徐鴻界 禹文海 馬 進 楊鳳梅 段素琴 楊亞平 劉 權 和占龍 趙 遠

(中國醫學科學院醫學生物學研究所，昆明 650118)

獼猴屬靈長目、類人猿亞目、猴科、獼猴屬動物。雌猴3歲達到性成熟，4～5歲體成熟；雄猴 4～5 歲性成熟，4.5～5歲才允許配種[1]。達到配種條件的獼猴統稱為繁殖猴。因其基因與人有97.5%的相似性[1]，71%的化合物與人類相似，獼猴被作為人類疾病動物模型廣泛應用于疫苗生產、神經生理學、病毒學、心理學、傳染病學、行為學、計劃生育學、老年病學、腫瘤學和器官移植學等的研究[2]。黃芪多糖是中藥黃芪的主要活性成分之一，黃芪多糖具有明顯的免疫調節作用，它能提高淋巴細胞的吞噬能力，對某些藥物及不同應激模式下的免疫功能下降，均有顯著免疫增強作用[3]；并能有效改善動物腸道功能，具有一定的抑菌和抗病毒作用，在畜禽養殖中已被廣泛應用。本實驗通過在繁殖獼猴日糧中添加黃芪多糖，同時與未添加黃芪多糖之前對比，探討黃芪多糖對繁殖獼猴生長性能、血液生理、生化指標及腹瀉發病率的影響。從而證實黃芪多糖在繁殖獼猴飼養中的應用價值。

1 材料與方法

1.1 材料

黃芪多糖由四川恒通動物制藥有限公司提供。

1.2 實驗動物

中國醫學科學院醫學生物學研究所自己飼養的成年實驗獼猴。實驗動物生產許可證號：SCXK(滇)2015-0006，公母配比為1∶6～7，以籠為單位飼養。

1.3 實驗設計

在基礎日糧中添加0.1%的黃芪多糖粉，每日飼喂一餐。不同年齡階段的獼猴選取60只，分3次采血：①實驗前采血一次，稱體質量一次。②實驗1個月后采血一次，稱體質量一次。③實驗3個月后采血一次，稱體質量一次。統計實驗前及實驗1個月后獼猴的腹瀉情況?；A日糧的配方組成見表1。

表1 飼料配方組成Table 1 composition of feed formula

1.4 生長性能指標測定

分別在實驗前、實驗1個月后、實驗3個月后稱體質量，計算體質量增加的情況。

1.5 血液生化、生理指標測定

在實驗前對繁殖獼猴進行靜脈采血，血液2 000 r/min離心20 min,吸取血清，用于測定肝臟功能、腎臟功能、微量元素。采用全自動生化分析儀(Mindray BS-200全自動生化分析儀)測定。采用全自動血液分析儀(日本Sysmex公司)檢測血液生理指標。主要查看白細胞、紅細胞、淋巴細胞百分數、淋巴細胞數等。

1.6 統計方法

通過Excel對實驗數據進行整理，采用SPSS 24.0軟件對數據進行分析。

2 結果

2.1 黃芪多糖對繁殖獼猴生長性能的影響

結果見表2，實驗后1個月、3個月與實驗前相比體質量都有了明顯的升高。從表中可以看出所有猴子的體質量隨黃芪多糖的添加時間的延長不斷增加，4歲猴子實驗后1個月、3個月與實驗前比較，增重差異顯著(P<0.05)。5～10歲猴子體質量也隨黃芪多糖的添加時間而增加，實驗1個月后與實驗前比較差異顯著(P<0.05)。實驗3個月后與實驗前比較沒有明顯差異(P>0.05)。10歲以上的猴子體質量也隨黃芪多糖添加時間的延長而增加，實驗后1個月、3個月與實驗前比較，增重差異顯著(P<0.05)。

表2 不同年齡階段的繁殖猴的生長情況(kg)Table 2 growth of reproductive monkeys at different ages(kg)

2.2 黃芪多糖對繁殖獼猴血液生理指標的影響

從整體趨勢來看隨著黃芪多糖添加時間的延長，白細胞、淋巴細胞百分數、淋巴細胞數均逐漸升高。白細胞數實驗1月后與實驗前比較顯著升高(P<0.05)；實驗3個月后與實驗前比較白細胞數也有顯著升高(P<0.05)；淋巴細胞百分數實驗1個月后與實驗前比較，差異并不顯著(P>0.05)，實驗3個月后與實驗前比較差異也并不顯著(P>0.05)；淋巴細胞數實驗1月后和實驗3個月后與實驗前比較差異顯著(P<0.05)，見表3。

表3 繁殖猴血液生理指標檢查結果Table 3 results of blood physiological examination in breeding monkeys

2.3 黃芪多糖對繁殖獼猴血液生化指標的影響

2.3.1繁殖猴肝功能檢測結果：結果見表4，隨著黃芪多糖添加的時間變化，谷草轉氨酶的濃度不斷增高，實驗1個月和3個月后與實驗前比較，差異均較顯著(P<0.05)。谷丙轉氨酶的濃度也隨黃芪多糖添加時間的延長而增加，實驗前后比較差異顯著(P<0.05)。間接膽紅素的濃度也隨添加時間的延長而增加，但實驗前后比較無明顯差異(P>0.05)?？偰懠t素的濃度也隨添加時間的延長而增加，實驗1個月、3個月后與實驗前比較差異顯著(P<0.05)。白蛋白與球蛋白比值隨黃芪多糖添加時間的延長而增加，實驗前后比較差異顯著(P<0.05)。

表4 繁殖猴肝功能指標檢測結果Table 4 results of liver function test in breeding monkeys

2.3.2繁殖猴腎功能檢測結果：結果見表5，從表中可以看出尿素隨黃芪多糖添加的時間延長不斷增高，實驗后3個月與實驗前比較差異顯著(P<0.05)。血糖隨著黃芪多糖的添加時間的延長不斷降低，實驗前與實驗1個月后比較差異顯著(P<0.05)，實驗前與實驗3個月后比較無明顯差異(P>0.05)。

表5 繁殖猴腎功能指標檢測結果Table 5 results of renal function test in breeding monkeys

2.3.3繁殖猴血脂檢測結果：結果見表6，血脂隨著黃芪多糖添加時間的延長而增加，總膽固醇實驗前與實驗1個月后比較差異較顯著(P<0.05)，實驗前與實驗3個月后比較無明顯差異(P>0.05)。甘油三酯隨黃芪多糖添加時間的延長而增加，實驗前與實驗1個月后、實驗3個月后比較差異顯著(P<0.05)。高密度脂蛋白和低密度脂蛋白均隨黃芪多糖添加時間的延長而增加，實驗前與實驗1個月后、實驗3個月后比較差異較顯著(P<0.05)。

表6 繁殖猴血脂檢測結果Table 6 results of blood lipid test in breeding monkeys

2.3.4繁殖猴血液微量元素的檢測結果：結果見表7，鎂隨黃芪多糖添加時間的延長而增加，實驗前與實驗1個月后、實驗3個月后比較差異較顯著(P<0.05)。鐵的含量隨黃芪多糖添加時間的延長而增加，實驗前與實驗1個月后、實驗3個月后比較差異較顯著(P<0.05)。

表7 繁殖猴血液微量元素的檢測結果Table 7 results of blood micronutrient test in breeding monkeys

2.3.5繁殖猴血液免疫物質的檢測結果：結果見表8，除IgM外，所有免疫物質實驗3個月后與實驗前比較數值呈上升趨勢，差異較顯著(P<0.05)。

表8 繁殖猴血液免疫物質的檢測結果(g/L)Table 8 results of blood immune substances in breeding monkeys(g/L)

2.4 黃芪多糖對繁殖獼猴腹瀉的影響

飼養區內共84個大籠。由圖1可知，實驗期間以3天內腹瀉籠數的平均數為一個統計點，統計結果明顯看出腹瀉籠數是呈下降趨勢的，說明黃芪多糖對繁殖獼猴的腹瀉有很好的預防及治療效果。

圖1 黃芪多糖對繁殖獼猴猴腹瀉的影響Fig.1 Effect of astragalus polysaccharides on diarrhea of Breeding rhesus monkey

3 討論

3.1 黃芪多糖對繁殖獼猴生長性能的影響

黃芪多糖作為飼料添加劑能提高飼料中營養物質的表觀消化率，促進脂肪、糖類的沉積與血清總蛋白的生成，進而提高飼料利用率，提高繁殖獼猴生長性能[4]。黃芪多糖能明顯改善小腸的形態結構，還能調節腸道微生物的平衡，改善腸道功能，提高營養物質利用率。黃芪多糖可增加肉仔雞十二指腸、空腸及回腸的絨毛高度和寬度、黏膜厚度從而提高仔雞對飼料的消化率[4]。黃芪多糖可提高仔豬的回腸消化率[5]。黃芪多糖作為飼料添加劑時，在飼料中添加至0.5%和0.7%時可以顯著提高肉仔雞的平均日增重[6]。在仔豬飼料中添加0.2%，0.4%的黃芪多糖有效提高仔豬對飼料營養物的消化率[7]。本實驗中隨著黃芪多糖添加時間的延長，繁殖獼猴年齡越小的體質量增重就越快，年齡偏大的體質量增重緩慢一些。

3.2 黃芪多糖對繁殖獼猴血液生理指標的影響

白細胞的數量是反應機體免疫狀態的一個重要指標。有研究表明中草藥制劑能增加血液中白細胞的數量[8]。黃芪具有益氣健脾的作用，可以保護骨髓的功能增加外周血液的白細胞及血小板的數量從而提高免疫力。本實驗中隨著黃芪多糖添加時間的延長白細胞的數量不斷升高。淋巴細胞數量也是機體免疫應答功能的重要細胞成分，其數量的增加也代表著機體抵抗力增強。

3.3 黃芪多糖對繁殖獼猴血液生化指標的影響

谷草轉氨酶、谷丙轉氨酶是動物肝細胞內參與氨基酸代謝的重要酶，正常情況下分布在肝細胞以及其它組織內，在非必需氨基酸和蛋白質分解代謝中起重要的中介作用[9]。 黃芪多糖能明顯保護實驗性肝損傷[10]。血糖水平降低從另一方面說明機體內合成代謝加強，表明飼喂黃芪多糖后肝臟轉化以及組織細胞利用葡萄糖的能力增強了[11]。黃芪多糖具有雙向調節血糖的作用，能降低葡萄糖超負荷的小鼠的血糖，能明顯降低腎上腺素引起的小鼠的血糖升高反應[12]。本實驗研究表明在飼料中添加黃芪多糖對繁殖獼猴的肝腎功能沒有損傷，同時還具有一定的保護作用。

3.4 黃芪多糖對繁殖猴免疫力的影響

黃芪多糖能夠促進動物機體免疫器官的發育增強機體免疫力[3]。黃芪多糖可以通過增加免疫器官質量來提高機體免疫力[13]可以通過激活免疫細胞功能而增強機體免疫力[14]。還可以通過促進樹突狀細胞成熟并特異性激活T細胞，增強樹突狀細胞對T細胞的抗原呈遞能力，進而提高機體細胞免疫[15]。黃芪多糖通過提高血液中球蛋白/白蛋白比值，增強機體體液免疫和細胞免疫的能力，從而提高動物機體免疫能力[16]。黃芪多糖對免疫系統的調節作用范圍極廣，不僅能調節固有的免疫系統，還能刺激、激活單核-巨噬細胞、樹突狀細胞，對免疫器官、T淋巴細胞、B淋巴細胞及各種細胞因子都有調節作用，從而起到增強免疫力的作用[17]。黃芪多糖對繁殖獼猴的免疫功能有很好的調節作用。

3.5 黃芪多糖對繁殖獼猴腹瀉的影響

繁殖獼猴腹瀉主要是排便次數增加，形狀改變，總量增加。原因可由細菌病毒感染、著涼、應激、免疫力低下、腸道菌群紊亂等原因引起。黃芪多糖有抗菌、抗病毒、防霉、防腐的作用。黃芪多糖能對多種病毒產生干擾、結合作用，也可促進巨噬細胞的吞噬作用以殺滅病毒，同時還能誘生干擾素產生抗病毒作用[12]。黃芪多糖對大腸桿菌、沙門菌、綠膿桿菌具有明顯的抑制效果[18]，對志賀氏痢疾桿菌、金黃色球菌、a、b型溶鏈球菌肺炎雙球菌都能發揮出較好的抗菌作用[19]。黃芪多糖能明顯改善小腸的形態結構，提高小腸的消化率，還能調節腸道微生物菌群平衡，進而改善動物的腸道功能[3]。黃芪多糖具有免疫增強作用，其主要是促進動物胸腺、脾臟、淋巴結及各淋巴組織的增生，增強免疫器官的指數，提高淋巴細胞轉化率，增強巨噬細胞的吞噬能力，提高動物機體對抗原的免疫應答能力，提高動物機體免疫力[3]。黃芪多糖對繁殖獼猴的腹瀉有較明顯的防治效果。

綜上所述，在繁殖獼猴日糧中添加0.1%的黃芪多糖對繁殖獼猴的生長性能有改善作用，同時能提高繁殖獼猴的免疫力，降低腹瀉的發病率；降低抗生素的使用率，為提高繁殖獼猴的質量，降低飼養成本起到了不可替代的作用。