應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)HPV-DNA診斷女性生殖道尖銳濕疣的價(jià)值分析

王翠花

（省陽(yáng)泉市平定縣人民醫(yī)院 山西 平定 045200）

乳頭瘤病毒感染引起的鱗狀上皮增生性疣狀病變會(huì)引起女性的尖銳濕疣病毒病癥，女性外陰發(fā)生尖銳濕疣病癥大得多數(shù)原因都是由于性接觸所引發(fā)的，但是女性在性激素水平相對(duì)比較高的情況下，加上過(guò)多分泌物的長(zhǎng)期刺激就會(huì)很容易出現(xiàn)尖銳濕疣的病癥又稱為假性尖銳濕疣，與性生活沒(méi)有太大的關(guān)系[1]。本片文章就針對(duì)女性生殖道尖銳濕疣采用聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)HPV DNA進(jìn)行診斷。

1.資料與方法

1.1 一般資料

所有病人都是來(lái)自于2017年3月-2019年8月在本院接受女性生殖道尖銳濕疣門診診斷的患者，其中患者的年齡在20～35歲。病情診斷標(biāo)本都來(lái)自于患者的外陰、陰道壁、陰唇等部位。采用ETC811型PCR擴(kuò)增儀器和乳頭瘤病毒基因分型23型PCR檢測(cè)試劑盒對(duì)患者的病情進(jìn)行診斷。

1.2 方法

采用常規(guī)的石蠟切片以及HE染色對(duì)患者進(jìn)行組織病理學(xué)的相關(guān)檢查。在檢測(cè)HPV、DNA的時(shí)候，操作PCR要嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)做檢測(cè)

2.結(jié)果

2.1 PCR擴(kuò)增結(jié)果

對(duì)360例女性生殖道尖銳濕疣患者進(jìn)行PCR進(jìn)行擴(kuò)增結(jié)果，經(jīng)過(guò)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)有210例患者確診為尖銳濕疣，其中HPV 6、11型患者有160例；假性濕疣有150例，其中HPV 6、11型患者有90例，見(jiàn)表1。

表1 PCR進(jìn)行擴(kuò)增結(jié)果[n(%)]

2.2 HPV各個(gè)類型陽(yáng)性率

對(duì)這360例患者進(jìn)行PCR檢測(cè)，觀察其HPV各個(gè)類型的陽(yáng)性率，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)HPV11和HPV6與HPV18和HPV16之間陽(yáng)性率的差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。進(jìn)行操作。在進(jìn)行擴(kuò)增的時(shí)候利用兩對(duì)寡核苷酸引入，將其擴(kuò)增到HPV11型以及6型的特異性DNA片段。采用無(wú)菌鹽水將分泌物洗滌、離心。沉淀?xiàng)壣锨逡海尤肓呀庖?00μl，將均勻混合，懸浮沉淀，沸水浴10分鐘，每分鐘13000r/min離心時(shí)間為10分鐘并且選取2μl上清液進(jìn)行備用。將PCR進(jìn)行擴(kuò)增，將離心管離心秒數(shù)分裝進(jìn)有PCR反應(yīng)混合物里，每一個(gè)加入模板5μl。將離心秒數(shù)混合均勻，將其放置在93℃的環(huán)境中，預(yù)判其在5min之類的化情況，并且按93℃30s、55℃30s、73℃30s這幾個(gè)條件下進(jìn)行擴(kuò)增，最后在72℃環(huán)境中延伸了5min。將前面的PCR 25μl的擴(kuò)增產(chǎn)物，采用2%的瓊脂凝液將其電泳30min，將紫外燈調(diào)制300nm并觀察其結(jié)果做好記錄，出現(xiàn)了HPV陽(yáng)性就是為陽(yáng)性對(duì)照相同的條帶，所有的實(shí)驗(yàn)過(guò)程大概需要2～3h。采取陰道分泌物

表2 HPV各個(gè)類型的陽(yáng)性率

3.討論

生殖道的尖銳濕疣主要分為HPV6、11、16、18，所以HPV亞型居多。相比較國(guó)內(nèi)的外陰尖銳濕疣也在不斷地增長(zhǎng)，這種疾病具有傳染性在女性疾病中較為常見(jiàn)。HPV的在潮濕、有溫度的外陰皮膚上個(gè)很容易感染。HPV主要發(fā)生于鱗狀上皮，并且外陰的尖銳濕疣占據(jù)50%～70%，并伴有宮頸以及陰道的尖銳性濕疣，很容易和不同種類的性傳播疾病（滴蟲(chóng)、衣原體、淋病奈氏苗、梅毒螺旋體以及白念珠菌等）形成共存關(guān)系。特別是在自身患有其他疾病例如糖尿病等免疫功能下降的情況下，尖銳濕疣的病情會(huì)發(fā)作的更快，并且很難受到控制[2]。

HPV不但可以引起尖銳濕疣這一種病癥，還會(huì)引發(fā)女性生殖腫瘤的癌前病變，宮頸癌、外陰癌與HPV6、18型有著密不可分的關(guān)系[3]。病情較輕的患者可以肉眼診斷出來(lái)。避免出現(xiàn)誤診的情況，在對(duì)外陰有尖銳濕疣患者進(jìn)行檢查時(shí)多檢查陰道及宮頸。最準(zhǔn)確的檢測(cè)方法有PCR這種方式敏感性高、快速、簡(jiǎn)潔、特異性強(qiáng)。檢測(cè)出微量的HPV、DNA并且確診是否感染HPV和感染類型。在進(jìn)行測(cè)試得時(shí)候需要提取標(biāo)本為女性患者的外陰、陰道壁、陰唇等部位。對(duì)患有尖銳濕疣的360例患者進(jìn)行PCR進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)。

綜上所述，采用聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)HPVDNA診斷女性生殖道尖銳濕疣，快速、簡(jiǎn)便，并且靈敏度高特異性強(qiáng)，值得臨床應(yīng)用。