邢 蕾,熊忙利,杜 飛
(1.咸陽職業技術學院,陜西 咸陽 712000;2.咸陽市天使寵物醫院,陜西 咸陽 712000)
紫錐菊又稱“紫松果菊”,為松果菊屬植物,其內含多糖、黃酮、菊苣酸、糖蛋白、咖啡酸衍生物、生物堿和烷基酰胺類等多種有效成分。目前,紫錐菊及其各種制劑被廣泛用于預防和治療呼吸系統、皮膚感染以及由免疫缺陷引起的疾病[1],臨床效果顯著[2]。
相關研究顯示,紫錐菊可有效提高和改善動物的免疫功能。Kuhn 等研究懷孕和哺乳母豬使用紫錐菊后,其免疫系統相關功能性指標均明顯得以改善,且未影響其后代胴體、生長性能[3]。王長彥等研究認為,紫錐菊的合理使用可提高仔豬成活率及日增重,降低腹瀉發生率,同時有效增強仔豬的免疫機能[4]。
目前關于紫錐菊及其制劑在豬、禽、魚類等動物中的應用報道較多,但在犬中的應用效果罕見報道。筆者試驗旨在研究紫錐菊復方超微粉在幼犬飼糧中按照不同劑量添加后對幼犬生長性能和免疫功能的影響。
45日齡的中華田園犬幼犬16只,體重1.2~1.6 kg左右,由咸陽市長武縣犬繁育基地提供。試驗前常規驅蟲與免疫,定時定量喂食,自由飲水。
紫錐菊、黃芪、甘草、板藍根、魚腥草,購自咸陽市禮泉縣中醫院。
犬免疫球蛋白IgA,IgG,IgM,γ-干擾素(IFN-γ)酶聯免疫檢測試劑盒購自菲恩生物科技有限公司。
1.2.1 配制紫錐菊復方超微粉 分別將紫錐菊、黃芪、甘草、板藍根、魚腥草分別置于 37 ℃溫箱中烘干,經過 500 目超微粉碎(WFJ-18型微粉碎機)處理后按照 2∶1∶1∶1∶1比例混合均勻制成紫錐菊復方超微粉。陰涼處密閉保存,備用[5]。
1.2.2 試驗設計 16只中華田園犬幼犬隨機分為4組(即Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組),每組4只。Ⅰ組為空白對照組;Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組為添加紫錐菊復方超微粉組,添加比例分別為0.25%、0.50%和 0.75%。預試期 7 d,正試期 30 d,試驗期間4組試驗犬飼喂管理條件一致,每天定點飼喂兩次相應日糧,上午8時下午18時各飼喂1次,每次150g,自由飲水。
1.2.3 基礎日糧配制及營養水平 參照國標GB/T 31216-2014配制基礎日糧,原料選用優質肉類及其副產品、玉米粉、小麥粉、精煉大豆油、動物性脂肪、骨粉、青菜、全脂奶粉、魚肝油、酵母、胡蘿卜。基礎日糧成分及配比見表1。
1.2.4 試驗指標測定 在試驗開始前和結束后對所有犬只空腹稱重,計算各處理組每只犬的平均日增重。分別于試驗的第0、15和30 d采集血液,采血前保證試驗犬空腹12 h,前肢靜脈采血(每次每只采血2 mL),3 000 轉·min-1離心 10 min,分離血清,分裝于 EP 管內,采用ELISA法檢測血清中IgA、IgM、IgG、IFN-γ水平,嚴格依照說明書操作。
應用spss20.0軟件分析試驗數據,具體進行單因素方差分析和Duncan多重比較,結果用“平均值±標準差”表示。
由表2可知,與Ⅰ組比較,Ⅲ組、Ⅳ組平均日增重均顯著提高(P<0. 05); 與Ⅱ組比較,Ⅲ組平均日增重顯著提高(P<0. 05),試驗Ⅲ組平均日增重比對照Ⅰ組提高了7.04%,說明在幼犬基礎日糧中添加 0.50%、0.75% 的紫錐菊復方超微粉可顯著改善幼犬的生長性能,且添加劑量為0.50%時改善效果更明顯。
由表3可知,第0天時,各組IgA、IgM、IgG水平差異均不顯著(P>0.05);第15 d時,Ⅲ組IgA水平顯著高于Ⅰ組(P<0.05)。Ⅲ組、Ⅳ組IgM水平顯著高于Ⅰ組(P<0.05);第30 d時,Ⅲ組、Ⅳ組IgA、IgG、IgM水平均顯著高于Ⅰ組。Ⅲ組、Ⅳ組IgA水平差異顯著(P<0.05)。Ⅲ組、Ⅳ組IgG、IgM水平差異不顯著。可見,堅持在幼犬基礎日糧中添加一定比例紫錐菊復方超微粉可顯著提高幼犬的IgA、IgG、IgM水平,添加比例0.50%時免疫效果改善最明顯。

表1 基礎日糧成分及配比

表2 幼犬生長性能測定結果
注:同列小寫字母不同表示差異顯著(p<0.05),相同表示差異不顯著(p>0.05)。

表3 幼犬免疫球蛋白水平測定結果
注:同行小寫字母不同表示差異顯著(p<0.05),相同表示差異不顯著(p>0.05)。
由表4可知,第0天時,各組IFN-γ水平差異不顯著(P>0.05);第15 d時,Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組都顯著高于Ⅰ組(P<0.05);第30 d時,Ⅲ組顯著高于Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅳ組(P<0.05)。Ⅱ組、Ⅳ組也顯著高于Ⅰ組(P<0.05)。

表4 幼犬血清中IFN-γ水平檢測結果
注:同列小寫字母不同表示差異顯著(p<0.05),相同表示差異不顯著(p>0.05)。
劉榮生[5]等研究表明,在仔豬飼糧中使用紫錐菊添加劑可顯著改善斷奶仔豬的生長性能,差異顯著(P<0. 05)。筆者試驗結果表明,試驗Ⅲ組平均日增重最大,比對照Ⅰ組提高了7.04%(P<0. 05),與上述研究結果一致,說明在幼犬基礎飼糧中使用紫錐菊復方超微粉可有效改善飼糧口味,刺激幼犬食欲,調節內分泌系統功能,促進新陳代謝,提高營養物質消化率,進而提高飼料轉化率,有效提高幼犬平均日增重,從而顯著改善幼犬生長性能。
免疫球蛋白是一類具有抗體活性和重要生物學功能的動物蛋白,在整個機體體液免疫中擔負著重要使命,血清免疫球蛋白(Ig)的測定是檢查體液免疫功能最常用的方法,是反映體液免疫功能強弱的重要參考指標。血清中的免疫球蛋白主要有三種,即IgA、IgM、IgG,其測定值可直接反映研究對象體液免疫功能情況,測定值越高則研究對象體液免疫功能越強,反之越弱[6~8]。楊侃侃等[9]研究表明,在仔豬日糧中添加刺五加提取物可有效增強仔豬免疫功能。筆者試驗中,添加0.50%復方超微粉的試驗Ⅲ組血清中IgA、IgG、IgM水平均較Ⅰ組顯著提高 (P<0. 05)。
干擾素含量微少但可發揮多種生物學功能,是細胞應對外界刺激自行產生的一種特殊蛋白質,其中IFN-γ最重要的功能是激活巨噬細胞和NK細胞,輔助抗體和吞噬細胞抵抗病原微生物的侵害,介導免疫溶菌作用,起到增強動物機體免疫功能的作用。伍參榮等[10]認為七味白術散可有助于增強仔鼠IFN-γ的表達,提高細胞活性,有效增強機體的免疫能力。舒迎霜等[11]試驗結果證明,黃芪多糖可顯著或極顯著提高犬血清中IFN-γ、IgA、IgM、IgG水平,從而增強犬的免疫能力。從表4可見,在犬糧中使用紫錐菊復方超微粉可增強幼犬血清中IFN-γ水平,其中試驗Ⅲ組顯著高于對照Ⅰ組(P<0. 05)。
綜上所述,本試驗原料選用黃芪、甘草、板藍根、魚腥草與紫錐菊,制成復方超微粉,其含有豐富的活性物質和微量礦物質元素,可起到健胃消積、清熱解毒、涼血利咽、疏風散熱、增加飼料適口性的作用。該復方超微粉同時具有營養和藥物作用,試驗結果表明,以0.50%的比例添加到幼犬基礎日糧中可顯著改善幼犬的生長性能和免疫功能。