白族藥梁王茶化學成分研究

羅曉磊 王敏 肖朝江

【摘 要】 目的：研究白族藥用植物梁王茶的化學成分。方法：植物樣品以80%乙醇冷浸提取，采用硅膠、Sephadex LH-20柱色譜等方法進行化合物的純化分離，通過理化性質及波譜數據鑒定化合物結構。結果：從梁王茶中分離得到9個化合物，分別鑒定為路路通內酯（1），三對節酸（2），丁香脂素（3），3-oxo-6β-hydroxylean-12-en-28-oic acid（4），3β，29-dihydroxy-olean-12-en-28-oic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester（5），5-O-caffeoylquinic acid methyl ester（6），β-谷甾醇（7），胡蘿卜苷（8），雙酚 A（9）。結論：化合物1、3-6為首次從該屬植物中分離得到。

【關鍵詞】 白族藥;梁王茶;化學成分;結構鑒定;丁香脂素;三萜

【中圖分類號】R284.1 ??【文獻標志碼】 A ???【文章編號】1007-8517（2019）18-0022-04

Abstract：Objective Tostudy the chemical constituents of a Bainationality medicine，Nothopanaxdelavayi.Methods The plant samplewas extracted with80% ethanol and the resulting extract was purified by open column chromatographypadded with silica gel and Sephadex LH-20， respectively.Results Nine compounds were isolated and identified asliquidambaric lactone（1）， serratagenic acid （2），syringaresinol （3）， 3-oxo-6β-hydroxylean-12-en-28-oic acid（4）， 3β，29-dihydroxy-olean-12-en-28-oicacid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester （5）， 5-O-caffeoylquinic acid methyl ester （6）， β-sitosterol（7）， carotene （8）， and bisphenol A（9）. Conclusion Compounds 1and 3-6were isolated from Nothopanaxgenusfor the first time.

Keywords：Bainationality Medicine;Nothopanaxdelavayi;Chemical Constituents;Structural Identification;Syringaresinol; Triterpenoids

梁王茶為五加科（Araliaceae）梁王茶屬（Nothopanax Miq.）植物掌葉梁王茶Nothopanax delavayi的樹皮或葉。灌木，葉為掌狀復葉，稀單葉;花期9～10月;生于森林或灌木叢中，海拔1600～2500m;分布于貴州、云南、四川等地;全株無毒，可入藥，有清熱解毒、消炎止痛、理氣舒筋、生津止瀉等療效[1]。該植物在大理全州均有分布，是傳統的白族藥用植物，白族民間主要用于口腔潰瘍、咽喉腫痛、咳嗽、月經不調、跌打損傷、解煙毒，以及急性結膜炎、消化不良、蛔蟲、腸炎等病癥的治療與處理;其根具有祛風除濕、止痛等功效，可用于風濕骨痛[2]。

目前，關于梁王茶屬植物化學成分有少量研究報道，分離得到的化合物主要包括三萜皂苷類，咖啡酸類，黃酮苷類，多糖和精油類等成分[3-11]。本課題組前期研究發現梁王茶具有一定的抗瘧活性[12]，另有文獻報道梁王茶屬植物還具有鎮痛[13]、抗腫瘤、抗病毒、抑菌、調節免疫、防治心腦血管疾病[14-15]、抑制前列腺增生[10]以及解酒保肝[11]等作用。其中抗腫瘤、抗病毒、抑菌以及防治心腦血管疾病等作用的相關活性成分尚未見報道。為進一步認識掌葉梁王茶的化學成分，明確相關活性與藥用物質基礎，本實驗對采自云南大理的掌葉梁王茶莖葉進行了化學成分研究，分離得到9個化合物，分別鑒定為路路通內酯（1），三對節酸（2），丁香脂素（3），3-oxo-6β-hydroxylean-12-en-28-oic acid（4），3β，29-dihydroxy-olean-12-en-28-oic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester（5），5-O-Caffeoylquinic acid methyl ester（6），β-谷甾醇（7），胡蘿卜苷（8），雙酚 A（9）。其中，化合物1、3-6為首次從該屬植物中分離得到。

1 儀器與材料

1.1 儀器 BrukerAvanceIII-400核磁共振儀（德國布魯克公司，TMS 為內標）;DionexUltiMate 3000超高效液相色譜儀及BrukerDaltonics MS質譜系統;RE-52AA 型旋轉蒸發儀（上海亞榮生化儀器廠）;AL204 型電子天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）;柱層析硅膠和薄層層析硅膠板GF254（青島海洋化工廠）;Sephadex LH-20（瑞典Amersham Biosciences 公司）;MCI CHP-20（75～150 μm）（日本三菱公司）;石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、甲醇等有機試劑均為工業級溶劑，重蒸后使用;正丁醇、異丙醇為分析純（上海化工有限公司）;10%硫酸烘烤顯色或碘蒸氣熏蒸顯色。

1.2 材料 實驗用掌葉梁王茶于2014年1月采自云南大理，由大理大學藥學與化學學院張德全博士鑒定為梁王茶屬植物掌葉梁王茶Nothopanaxdelavayi（Franch.）Harmsex Diels，植物標本（編號：20140108-3）保存于大理大學藥物研究所姜北教授研究組。

2 提取和分離

梁王茶干燥莖葉2.4 kg，粉碎后用15 L 80%乙醇冷浸提取3次，每次24 h。過濾，合并濾液，用旋轉蒸發儀減壓條件下回收乙醇后得總浸膏195 g。將總浸膏分散于400 mL水中，依次用乙酸乙酯（600 mL×6），正丁醇（600 mL×4）萃取，減壓條件下回收溶劑后得乙酸乙酯部位55 g，正丁醇部位64 g。取乙酸乙酯部位樣品以適量粗硅膠（80～100目）拌樣，經300～400目硅膠柱，氯仿-丙酮混合溶劑系統梯度洗脫（1∶ 0～0∶ 1），TLC檢測，合并得7個組分（A-G）。

A組分經MCI柱色譜（50%～100%甲醇/水），硅膠柱色譜（石油醚-乙酸乙酯10∶ 1～0∶ 1）和重結晶等方法得化合物1（28 mg）和7（78 mg）;B組分經MCI柱色譜（50%～100%甲醇/水），硅膠柱色譜（石油醚-乙酸乙酯5∶ 1～0∶ 1、氯仿-丙酮25∶ 1～0∶ 1），Sephadex LH-20 凝膠柱色譜（氯仿-甲醇1∶ 1）得化合物2（21 mg）、3（12 mg）、4（10 mg）和9（5 mg）;E組分經MCI柱色譜（50%～100%甲醇/水），反復硅膠柱色譜（氯仿-甲醇25∶ 1～0∶ 1、20∶ 1～0∶ 1）得化合物5（51 mg）、6（1 g）和化合物8（148 mg）。

3 結構鑒定

化合物1：分子式：C30H44O4，白色無定型粉末H-NMR （400MHz， CDCl3）δ： 3.06 （2H， brs， H-11， 12）， 2.66 （1H， ddd， J = 16.0， 11.9， 6.9 Hz， H-21a）， 2.44 （ddd， J = 16.0， 6.9， 3.4 Hz， H-21b） 2.33 （1H， dd， J =13.8， 3.1 Hz， H-18）， 1.18， 1.11， 1.11， 1.10， 1.06， 1.00 and 0.93（each 3H， s， Me -25， 26， 27， 24， 23， 29 and 30）;13C-NMR （100 MHz， CDCl3）δ： 38.8（t， C-1）， 34.4 （t， C-2）， 216.4 （s， -C=O）， 47.7 （s， C-4）， 54.9 （d， C-5）， 18.9 （t， C-6）， 30.6 （t， C-7）， 40.8 （s， C-8）， 50.3 （d， C-9）， 36.4 （s， C-10）， 52.6 （d， C-11）， 57.2 （d， C-12）， 87.5 （s， C-13）， 41.4 （s， C-14）， 27.1 （t， C-15）， 21.4 （t， C-16）， 44.0 （s， C-17）， 49.8 （d， C-18）， 37.9 （t， C-19）， 31.6 （s， C-20）， 33.9 （t， C-21）， 27.1 （t， C-22）， 21.3 （q， C-23）， 26.1 （q， C-24）， 16.6 （q， C-25）， 18.8 （q， C-26）， 19.9 （q， C-27）， 179.4 （s， -C=O）， 33.3 （q， C-29）， 23.7 （q， C-30）。以上數據與文獻[16]報道基本一致，故鑒定該化合物為路路通內酯。

化合物2：分子式：C30H46O5，白色針晶（吡啶）。1H-NMR （400MHz， C5D5N） δ： 5.58 （1H， t， J = 3.4 Hz， H-12）， 3.46 （2H， overlap， H-3， 18）， 2.62 （1H， t，J = 13.9 Hz， H-19a）， 1.98 （1H， overlap， H-19b）， 1.60， 1.30， 1.24， 1.05， 1.04 and 0.91 （each 3H， s， Me-30， 27， 23， 26， 24 and 25）;13C-NMR （100 MHz， C5D5N） δ： 39.4 （t， C-1）， 28.6 （t， C-2）， 78.6 （d， C-3）， 39.9 （s， C-4）， 56.3 （d， C-5）， 19.3 （t， C-6）， 33.8 （t， C-7）， 40.3 （s， C-8）， 48.6 （d， C-9）， 37.9 （s， C-10）， 24.4 （t， C-11）， 123.7 （d， C-12）， 144.8 （s， C-13）， 43.1 （s， C-14）， 28.8 （t， C-15）， 24.4 （t， C-16）， 47.2 （s， C-17）， 41.6 （d， C-18）， 41.6 （t， C-19）， 42.7 （s， C-20）， 29.8 （t， C-21）， 32.9 （t， C-22）， 29.3 （q， C-23）， 17.1（q， C-24）， 16.1 （q， C-25）， 17.9 （q， C-26）， 26.6 （q， C-27）， 180.5 （s， -C-28）， 181.5 （s， C-29）， 20.5 （q， C-30）。以上數據與文獻[17]報道基本一致，故鑒定該化合物為三對節酸。

化合物3：分子式：C22H26O8，白色無定型粉末。HR-ESI-MS m/z： 417.1541[M-H]- （calcd for C22H25O8， 417.1555）。1H-NMR （400MHz， CD3OD）δ： 6.65 （4H， s， H-2′， 6′， 2″ and 6″）， 4.72 （2H， d， J= 3.7 Hz， H-2， 6）， 4.26 （2H， td， J = 6.9， 1.7 Hz， H-4a， 8a）， 3.88 （2H， overlap， H-4b， 8b）， 3.84 （12H， s， 4×-OCH3）， 3.14 （2H， brs， H-1， 5）;13C-NMR （100 MHz， CD3OD）δ： 55.5 （d， C-1， 5）， 87.6 （d， C-2， 6）， 72.8 （t， C-4， 8）， 133.1 （s， C-1′， 1″）， 104.5 （d， C-2′， 6′， 2″， 6″）， 149.3 （s， C-3′， 5′， 3″， 5″）， 136.2 （s， C-4′， 4″）， 56.8 （q， 4×-OCH3）。以上數據與文獻[18]報道基本一致，故鑒定該化合物為丁香脂素。

化合物4：分子式：C30H46O4，白色簇晶（氯仿）。1H-NMR （400MHz， C5D5N） δ： 5.60 （1H， t， J = 3.4 Hz， H-12）， 4.69 （1H， s， H-6）， 3.37 （1H， overlap， H-18）， 2.89 （1H， td， J = 14.5， 6.2 Hz， H-21）， 1.69， 1.69， 1.63， 1.38， 1.29， 1.04 and 0.98 （each 3H， s， Me-24， 25， 26， 23， 27， 30 and 29）; 13C-NMR （100 MHz， C5D5N） δ： 41.4 （t， C-1）， 33.6 （t， C-2）， 216.0 （s， C-3）， 47.1 （s， C-4）， 57.3 （d， C-5）， 68.5 （d， C-6），42.2 （t， C-7）， 39.6 （s， C-8）， 48.3 （d， C-9）， 37.3 （s， C-10）， 24.1 （t， C-11）， 123.0 （d， C-12）， 144.7 （s， C-13）， 43.2 （s， C-14）， 28.6 （t， C-15）， 24.3 （t， C-16）， 49.6 （s， C-17）， 42.5 （d， C-18）， 46.8 （t， C-19）， 31.4 （s， C-20）， 35.1 （t， C-21）， 34.6 （t， C-22）， 26.2 （q， C-23）， 24.5 （q， C-24）， 16.7 （q， C-25）， 19.1 （q， C-26）， 26.6（q， C-27），180.5 （s， C-28）， 33.7 （q， C-29）， 24.1 （q， C-30）。以上數據與文獻[19-20]報道基本一致，故鑒定該化合物為3-oxo-6β-hydroxylean-12-en-28-oic acid。

化合物5：分子式：C32H50O6。白色簇晶（甲醇）。1H-NMR （400MHz， CD3OD） δ： 5.34 （1H， d， J = 8.1 Hz， H-1′）， 5.26 （1H， t， J = 3.2 Hz， H-12）， 3.77 （1H， d， J= 11.3 Hz， H-6′a）， 3.63 （1H， dd， J = 11.3， 3.5 Hz， H-6′b）， 3.35-3.26 （6H， overlap， H-3， 29， 2′， 3′ and 4′）， 3.10 （1H， dd， J = 11.2， 4.8 Hz， H-5′）， 2.84 （1H， dd， J = 13.9， 4.0 Hz， H-18）， 1.19， 1.12， 0.92， 0.90， 0.76 and 0.73 （each 3H， s， Me-30， 27， 23， 25， 26 and 24）.13C-NMR （100 MHz， CD3OD） δ： 39.9 （t， C-1）， 28.8 （t， C-2）， 78.2 （d， C-3）， 39.8 （s， C-4）， 56.7 （d， C-5）， 19.5 （t， C-6）， 33.9 （t， C-7）， 39.8 （s， C-8）， 49.1 （d， C-9）， 38.1 （s， C-10）， 24.1 （t， C-11）， 124.5 （d， C-12）， 144.1 （s， C-13）， 43.0 （s， C-14）， 27.8 （t， C-15）， 24.6 （t， C-16）， 47.8 （s， C-17）， 41.5 （d， C-18）， 41.2 （t， C-19）， 42.9 （s， C-20）， 29.5 （t， C-21）， 32.0 （t， C-22）， 28.7 （q， C-23）， 16.3 （q， C-24）， 16.0 （q， C-25）， 17.7 （q， C-26）， 26.3 （q， C-27）， 177.5 （s， C-28）， 73.9 （t， C-29）， 19.8 （q， C-30）， 95.7 （d， C-1′）， 73.9 （d， C-2′）， 78.7 （d， C-3′）， 71.0 （d， C-4′）， 79.7 （d， C-5′）， 62.3 （d， C-6′）。以上數據與文獻[21]報道基本一致，故鑒定該化合物為3β，29-dihydroxy-olean-12-en-28-oic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester。

化合物6：分子式：C17H20O9，黃色固體（丙酮）。HR-ESI-MS m/z： 367.1021[M-H]- （calcd for C17H19O9， 367.1034）。1H-NMR （400MHz， CD3OCD3） δ：7.51 （1H， d， J = 15.9 Hz，H-7′）， 7.13 （1H， d， J= 1.8 Hz， H-2′）， 6.97 （1H， dd， J = 8.3， 1.8 Hz， H-6′）， 6.83 （1H， d， J = 8.3Hz， H-5′）， 6.23 （1H， d， J= 15.9Hz， H-8′），5.34 （1H， m， H-5）， 4.20 （1H， m， H-3）， 3.78 （1H， dd， J= 8.5， 3.1 Hz， H-4）， 3.64 （3H， s， -OCH3）， 2.26–2.04 （4H， m， H-2， 6）;13C-NMR （100 MHz， CD3OCD3） δ： 75.7 （s， C-1）， 36.6 （t， C-2）， 70.6 （d， C-3）， 72.8 （d， C-4）， 71.2 （d， C-5）， 38.3 （t， C-6）， 174.4 （s， C-7）， 127.2 （s， C-1′）， 114.9 （d， C-2′）， 146.0 （s， C-3′）， 148.6 （s， C-4′）， 116.2 （d， C-5′）， 122.5 （d， C-6′）， 146.0 （d， C-7′）， 115.2 （d， C-8′）， 167.1 （s， C-9′）， 52.7 （q， -OCH3）。以上數據與文獻[22]報道基本一致，故鑒定該化合物為5-O-caffeoylquinic acid methyl ester。

化合物7：白色針狀結晶（氯仿）。通過在TLC上用三種溶劑系統展開對比，與β-谷甾醇的對照品斑點顏色及Rf值均一致，故鑒定為β-谷甾醇。

化合物8：白色粉末（氯仿-甲醇）。通過在TLC上用3種溶劑系統展開對比，與胡蘿卜苷的對照品斑點顏色及Rf值均一致，故鑒定為胡蘿卜苷。

化合物9：白色粉末，分子式C15H16O2，白色針晶（丙酮）。1H-NMR （400MHz， CD3COCD3） δ： 6.95 （4H， d， J=8.7 Hz， H-3， 5， 3′， 5′）， 6.62 （4H， d， J=8.7 Hz， H-2， 6， 2′， 6′）， 1.48 （6H， s， 2×-CH3）;13C-NMR （100 MHz，CD3COCD3） δ：， 156.0 （s， C-1）， 115.4 （d， C-2， 6）， 128.4 （d， C-3， 5）， 142.8 （s， C-4）， 42.0 （s， C-7）， 31.5 （q， C-8， 8′）。以上數據與文獻[23]報道基本一致，故鑒定該化合物為雙酚A。

4 討論

本研究從掌葉梁王茶莖中分離鑒定了9個化合物，包括4個三萜類化合物，2個甾體類化合物，1個木脂素類化合物，2個酚類化合物，其中5個化合物（1、3-6）為首次從該屬植物中分離得到。

白俊鵬等[24]的研究表明化合物6具有較好的神經保護活性，在15 μmol·L-1給藥濃度下神經保護率為21.33%。化合物6還具有一定的抗氧化活性，其IC50值為7.5～8.8 μg·mL-1[22，25]。另有文獻報道化合物3對人體宮頸癌細胞系（HeLa）、肺癌細胞系（A-549）、乳腺癌細胞系（MCF-7）具有一定的抑制活性，IC50值均≤47.12 μg·mL-1[26-27]，對結腸癌細胞系（HT-29）有較強的細胞毒性，其IC50值為0.227 μg·mL-1[27]。除此之外化合物3還具有一定的抑制乙酰膽堿酶活性，IC50值為200 μg·mL-1[28]，在0.6 mg·mL-1濃度下對油菜菌核病菌抑制率達到36.72%[29]。根據本研究分離得到的成分及相關活性報道，初步證實了掌葉梁王茶的白族民間藥用具有活性物質基礎，該植物的抗腫瘤、抗病毒、抑菌以及防治心腦血管疾病等作用也具有一定的合理性，為掌葉梁王茶的開發藥用提供了理論依據，更多的化學成分與深入的藥理作用機制仍有待一步研究。

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（收稿日期：2019-07-30 編輯：陶希睿）