微柱凝膠免疫檢測技術在臨床輸血治療中的應用分析

王小燕，強新晨

（1.無錫市錫山醫院鵝湖分院檢驗科；2.無錫市人民醫院輸血科，江蘇 無錫 214116）

輸血在臨床診療過程中較為常見,主要應用于手術、低血容量休克以及貧血患者，能夠及時補充患者機體血容量,有助于維持機體正常的血氧供應,在臨床多種疾病診治過程中占有重要地位[1]。受到輸血技術操作不當、血型不符以及血液制品出現問題等多種因素影響,使得輸血反應在臨床中較為常見，主要包括發熱反應、過敏反應，較嚴重的表現為溶血反應，嚴重威脅患者的生命安全，應予以重視[2]。因此，采取適宜的手段，進行準確的血型鑒定及交叉配曲，對降低輸血反應，提高輸血安全性尤為重要。以往臨床常采用鹽水試管檢測技術及凝聚胺法進行血型及交叉配血檢查,雖然具有一定的臨床診斷價值,但該種檢測技術不能夠敏感檢出不完全抗體情況,影響交叉配血檢測結果的準確度及輸血過程的安全性[3-4]。隨著臨床技術發展與創新，交叉配血方法研究也取得一定進步，其中就包括微柱凝膠免疫檢測技術,該種檢測技術在臨床鑒定血型及輸血的過程中有一定的診斷價值，但目前臨床上在這方面研究尚少。本次實驗特選擇經本院診療需要進行輸血治療的患者為研究對象，采用不同的交叉配血檢測技術進行檢查，意在研究微柱凝膠免疫檢測技術在鑒定血型及輸血的過程中的應用價值。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2015年11月-2017年11月期間來我院診療需要進行輸血的患者選為研究病例,隨機選取148例輸血患者分別采用不同的檢測技術進行血型鑒定以及交叉配血,根據檢測方法不同分成鹽水試管組及微柱凝膠免疫組采用微柱凝膠免疫檢測技術進行血型鑒定以及交叉配血。輸血患者納入標準：⑴思維感受方面正常，簽署了知情同意書；⑵具備完善的臨床資料，其能夠較好的配合完成研究及相關檢查。排除標準：⑴認知功能障礙者及依存性差無法完成本研究者；⑵不能完成治療療程或不愿參加本研究者。供血者健康人群納入標準：近期未出現呼吸道或泌尿系統等感染情況，無藥物及食物等過敏史。輸血患者中，男性患者75例，女性患者73例；年齡24～68歲，平均年齡(36.83±3.67)歲；是否有過輸血史：有輸血史26例，無輸血史122例。供血者中，男性77例，女性71 例；年齡 19～41 歲，平均年齡(31.84±3.54)歲。 經過醫院倫理委員會批準后，本組研究開始實施，研究目的、治療方法均被患者及其家屬了解，臨床資料不公開,保證了其隱私性。兩組研究對象的基線資料比較均衡性較好,差異均無統計學意義 （P＞0.05）。

1.2 方法 所有血液標本分別給予微柱凝膠免疫檢測技術及鹽水試管法檢測技術進行血型鑒定以及交叉配血檢查。微柱凝膠免疫組采用微柱凝膠免疫檢測技術進行檢查，血型鑒定方法：醫務人員采取靜脈血后，常規分離輸血患者的血液樣本，在4攝氏度環境下保存血清，立即送檢，取6支分別標注 A、B、C、D、E、F 的凝膠微管,完成后將 0.5%紅細胞懸液分別滴入A～D管，并將血清以及已知血型的A型及B型的0.5%紅細胞懸液分別滴入E、F管，采用3000r/min離心5min，由醫務人員根據檢查結果進行肉眼比對。交叉配血方法：醫務人員常規分離供血者及受血者的血液標本,完成后并配置成1%紅細胞懸液，取2支分別標注主側以及次側的凝膠微管,將50μl供血者紅細胞懸液及受血者樣本滴入主側凝膠微管,并將50μl受血者紅細胞懸液及供血者樣本滴入次側凝膠微管，在37℃孵育15min，采用3000r/min離心5min離心，醫務人員采用肉眼對檢查結果進行比對。鹽水試管組采用鹽水試管檢測技術及凝聚胺法進行檢查。血型鑒定方法：參照鹽水試管法檢測操作規程進行血型鑒定，同時給予陰性對照管，以便能夠排除冷凝集。交叉配血方法：采用凝聚胺法進行檢測，常規分離供血者及受血者的血液標本,完成后并配置成5%紅細胞懸液,進行凝集主次側凝集試驗，采用肉眼對檢查結果進行比對。

1.3 觀察指標 觀察兩組不同檢查方法的檢測結果,計算血型鑒定正反定型相符的符合率和交叉配血相合成功率。

1.4 統計學處理 采用spss20.0統計學軟件對表中數據進行統計分析，用表示計量資料，用檢驗比較計數資料，采用t檢驗，多組間比較采用方差分析，采用雙側檢驗所有統計分析，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者血型鑒定檢驗結果的差異 微柱凝膠免疫組微住凝膠免疫檢測血型鑒定檢查結果的正反定型符合率與鹽水試管組鹽水試管法正反定型符合率結果比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

2.2 觀察兩組患者交叉配血檢驗結果的差異 微柱凝膠免疫組采用微柱凝膠免疫法檢測的交叉配血不合率高于鹽水試管組凝聚胺法檢測的交叉配血不合率，差異比較具有統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表1 兩組血型鑒定檢驗結果的差異[n（%）]

表2 觀察兩組交叉配血檢驗結果的差異[n（%）]

3 討論

輸血治療是臨床常見治療手段，受患者體質、多次輸血以及輸血操作等多種因素影響，輸血反應較為常見，患者會出現發熱、過敏以及溶血等不良反應。因此，為了降低輸液反應發生情況，進行準確的血型鑒定及交叉配血顯得尤為重要。

以往臨床常采用鹽水試管檢測技術進行血型鑒定,該種檢測方法對血型鑒定檢測結果的準確性較高,但隨著鹽水試管檢測技術在臨床中廣泛應用，其不足之處也逐漸體現出來[5]。主要表現在鹽水試管檢測技術操作步驟簡單,能夠較快速出結果，不影響臨床輸血治療進行,但相關研究顯示，將其應用于IgM抗體引起的價差配血不合準確率尚可,而對IgG抗體引起的較差配血不合會漏診，影響臨床工作效率[6-7]。隨著臨床技術的快速進步，血型鑒定的檢測方法也有一定發展,微柱凝膠免疫檢測技術引起醫務人員的廣泛關注,該種檢測方法利用凝膠微柱分子層析原理,使得體積較小的紅細胞先通過凝膠間隙,并與不規則的抗體進行有效結合,得以完成血型鑒定[8-9]。微柱凝膠免疫檢測技術能夠有效提高紅細胞與不規則抗體的結合情況，有較好的敏感度,使得血型鑒定結果的正反定型符合率較高，可以提高檢測結果的準確性[10]。本次研究結果顯示,微柱凝膠免疫組患者檢查結果的正反定型符合率與鹽水試管組比較,差異無統計學意義（P＞0.05）。結果說明，微柱凝膠免疫檢測技術對血型鑒定的檢查結果的準確性與鹽水試管法的準確度，大致相同，但相關調查研究顯示[11]，與鹽水試管檢查技術相比,微柱凝膠免疫檢測技術整個流程操作標準化，需要樣本量較少，應用于血型鑒定的臨床應用價值較優。

以往臨床常采用凝聚胺法進行交叉配血檢測，雖然該種檢測手段可以快速檢測出配血結果，但操作步驟也相對較多,需要添加的溶液種類也較多，使得檢測手段相對復雜[12]。凝聚胺溶液釋放大量正電荷,使得紅細胞下降進而發生非特異性凝集，再滴入枸緣酸鈉，觀察凝集是否散開，對配血結果進行判斷[13]。凝聚胺法檢查結果的準確性較好,特別是對于IgM和IgG抗體引起的配血不合的檢測，可以提高檢測結果的準確性[10]。但該種檢測方法也存在一定問題,主要表現在凝聚胺法需要較好的操作技能,需要操作人員不僅嚴格按照流程進行操作,同時對檢測結果的判斷標準要有較好的把握能力。同時，相關結果顯示[14]，凝聚胺法進行交叉配血檢測的檢查結果易受到多種藥物以及肝素等影響，使得凝集的紅細胞散開，使其檢測結果出現假陽性而不準確,不利于臨床診斷及緊急救治輸血。鹽水法及凝聚胺法檢測技術的檢查結果不易保存，也不易通過圖片保存，不利于臨床工作的記錄,在一定程度上會造成血液樣本不必要的浪費。微柱凝膠免疫檢測技術利用生物凝膠過濾原理，使紅細胞表現發生抗原抗體結合,從而增大紅細胞體積,讓配對血型凝集的紅細胞不能夠通過凝膠間隙，留在凝膠微管中上部，反之配型不符的紅細胞沉積于凝膠微管底部[15-16]。微柱凝膠免疫檢測技術不受藥物、低濃度抗體等因素影響，而是通過抗體球蛋白與試劑中抗體特異性結合的生物學原理進行檢查，該種檢測方法操作簡單，流程標準化，能夠減少血液樣本被污染，安全性較好，同時該種檢測手段特異性較好，檢測結果較為穩定，準確率較高[17]。本次結果顯示,微柱凝膠免疫組交叉配血成功率高于鹽水試管組,差異比較具有統計學意義（P＞0.05）。結果說明，與凝聚胺檢測方法相比，采用微住凝膠免疫法檢測技術進行交叉配血檢查，檢測結果交叉配血成功率較高,說明檢查結果的穩定性較好,不會受到藥物及其他物質影響而出現假陽性，有較優的參考意義。與鹽水試管法及凝聚胺法相比，采用微柱凝膠免疫法檢測技術能夠同時進行血型鑒定及交叉配血檢查，操作步驟簡單，需要血液樣本相對較少；能夠有效檢測出是否存在不規則抗體，有較好的血型鑒定結果準確性[18-19]；同時,微柱凝膠免疫法檢測技術能夠更加準確的檢查出供血者與受血者配血不合情況,有助于減少溶血反應的不良輸液反應，提高輸液過程的安全性，提高臨床工作質量[20]。本次實驗受到研究時間以及研究對象的限制，存在一定局限性，同時，血型鑒定及交叉配血等各項檢查操作技術存在細致差異，對統計結果會產生一定的影響,需要增加研究樣本數量，對實驗進一步補充及完善。

綜上所述,采用微柱凝膠免疫法檢測技術進行血型鑒定及交叉配血檢查，檢測結果穩定性較好，有較高的準確性，有助于提高臨床輸血的安全性，對臨床診斷有較優的應用價值。