35%氟吡菌酰胺·戊唑醇懸浮劑的高效液相色譜分析

趙成林，王佛嬌，程小會，陳麗金，江 林

（廣州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，廣州 511462）

氟吡菌酰胺為拜耳公司研發(fā)的琥珀酸脫氫酶抑制劑，屬于吡啶乙基苯酰胺類，用于防治蔬菜、水果等作物的白粉病等病害[1-2]。戊唑醇為三唑類殺菌劑，主要用于防治禾谷類作物的銹病、白粉病等病害[3]。目前，關(guān)于氟吡菌酰胺的分析研究較少，主要是氣相法和氣相-質(zhì)譜聯(lián)用法[4-5]，關(guān)于戊唑醇的分析研究方法主要有氣相色譜法和液相色譜法[6-8]，兩者復(fù)配為混劑的液相色譜同條件分析方法未見報道。

本文建立同一液相色譜條件下同時檢測35%氟吡菌酰胺·戊唑醇懸浮劑中的氟吡菌酰胺、戊唑醇的分析方法，具有較高的準(zhǔn)確度和精密度，是一種較為實用的分析方法。

1 材料與方法

1.1 試劑

氟吡菌酰胺標(biāo)準(zhǔn)品（99%），Dr.Ehrenstorfer公司；戊唑醇標(biāo)準(zhǔn)品（99.3%），沈陽化工研究院；超純水；甲醇（色譜純）；35%氟吡菌酰胺·戊唑醇懸浮劑，拜耳股份公司。

1.2 儀器

高效液相色譜儀：Agilent 1260（具有可變波長紫外檢測器）；色譜柱：Eclipse XDB-C18不銹鋼柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；超聲波清洗機。

1.3 液相色譜條件

流動相：甲醇與水的體積比為70∶30；流速：1.0 mL/min；柱溫：30℃；檢測波長：220 nm；進樣體積：10 μL；保留時間：氟吡菌酰胺約為4.81 min，戊唑醇約為7.82 min。氟吡菌酰胺和戊唑醇標(biāo)樣及樣品的高效液相色譜圖見圖1、圖2。

圖1 氟吡菌酰胺和戊唑醇標(biāo)樣高效液相色譜圖

圖2 35%氟吡菌酰胺·戊唑醇懸浮劑高效液相色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

稱取氟吡菌酰胺和戊唑醇標(biāo)樣各0.01 g（精確至0.000 2 g），置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，超聲溶解后搖勻備用。

1.4.2 樣品溶液的配制

稱取含氟吡菌酰胺和戊唑醇各0.057 g（精確至0.000 2 g）的試樣，置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，超聲溶解后過膜備用。

1.4.3 測定

按上述色譜條件，連續(xù)進不少于5針標(biāo)樣溶液，當(dāng)相鄰2針的相對響應(yīng)值變化小于1.5%時，按照標(biāo)樣溶液、樣品溶液、樣品溶液、標(biāo)樣溶液的順序進樣測定。

1.4.4 計算

將測得的2針試樣溶液及其前后2針標(biāo)樣溶液中氟吡菌酰胺（戊唑醇）峰面積分別進行平均。試樣中氟吡菌酰胺（戊唑醇）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w（%）按式（1）計算。

式中：A1為標(biāo)樣溶液中氟吡菌酰胺（戊唑醇）峰面積的平均值，mAU·s；A2為試樣溶液中氟吡菌酰胺（戊唑醇）峰面積的平均值，mAU·s；m1為氟吡菌酰胺（戊唑醇）標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為試樣的質(zhì)量，g；P為標(biāo)樣中氟吡菌酰胺（戊唑醇）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與分析

2.1 波長的選擇優(yōu)化

筆者利用紫外可見分光光度計對氟吡菌酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液進行最大波長檢測，發(fā)現(xiàn)在220 nm處有最大吸收，經(jīng)液相色譜上機試驗，確定220 nm為氟吡菌酰胺的檢測波長。經(jīng)參考現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)以及其他研究文獻，確定戊唑醇的檢測波長為220 nm，此波長下，兩個目標(biāo)物都有很好的響應(yīng)，無雜質(zhì)干擾。

2.2 色譜條件的選擇

選擇C18短柱，以甲醇-水作為流動相，選擇甲醇與水的體積比為50∶50、60∶40、70∶30、80∶20等4種情形下對兩個目標(biāo)分別進行試驗比較，發(fā)現(xiàn)當(dāng)甲醇與水的比例為70∶30時，氟吡菌酰胺和戊唑醇分離效果理想，出峰時間適中，峰形對稱，能夠滿足檢測要求。

2.3 分析方法的線性相關(guān)性測定

準(zhǔn)確吸取“1.4.1”中標(biāo)樣溶液1.0 mL置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容成標(biāo)樣溶液A，再從標(biāo)樣溶液A中吸取0.1、0.5、1.0、5.0 mL分別置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，搖勻，將兩次配制的標(biāo)樣溶液用于液相色譜分析。在上述色譜條件下，測得其相應(yīng)的峰面積，以氟吡菌酰胺（戊唑醇）的濃度為橫坐標(biāo)，氟吡菌酰胺（戊唑醇）的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制線性關(guān)系曲線，線性方程分別為y=17.461x-8.787 8，y=21.678x-12.674，相關(guān)系數(shù)均為0.999 3。

2.4 分析方法精密度測定

稱取同一批樣品，在上述穩(wěn)定的色譜操作條件下，進行6次平行測定，精密度的測定結(jié)果見表1，其中，氟吡菌酰胺和戊唑醇的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.15、0.16，變異系數(shù)分別為0.84%、0.92%。結(jié)果表明分析方法精密度良好。

表1 精密度測定結(jié)果

2.5 分析方法的準(zhǔn)確度測定

采用標(biāo)樣添加法，在已知含量的試樣中，加入一定量的氟吡菌酰胺和戊唑醇標(biāo)準(zhǔn)品，配成5個已知樣，在相同的液相色譜操作條件下，測得氟吡菌酰胺和戊唑醇的平均回收率分別為99.08%、98.88%（表2）。

表2 準(zhǔn)確度測定結(jié)果

3 結(jié)論

本方法能夠同時測定35%氟吡菌酰胺·戊唑醇懸浮劑中的氟吡菌酰胺和戊唑醇的含量。試驗結(jié)果表明，方法具有較好的準(zhǔn)確度和精密度，線性關(guān)系良好，操作簡單方便，是一種較為實用的分析方法，可滿足日常產(chǎn)品檢驗的要求。