35%氟吡菌酰胺·戊唑醇懸浮劑的高效液相色譜分析

趙成林，王佛嬌，程小會，陳麗金，江 林

（廣州市農業科學研究院，廣州 511462）

氟吡菌酰胺為拜耳公司研發的琥珀酸脫氫酶抑制劑，屬于吡啶乙基苯酰胺類，用于防治蔬菜、水果等作物的白粉病等病害[1-2]。戊唑醇為三唑類殺菌劑，主要用于防治禾谷類作物的銹病、白粉病等病害[3]。目前，關于氟吡菌酰胺的分析研究較少，主要是氣相法和氣相-質譜聯用法[4-5]，關于戊唑醇的分析研究方法主要有氣相色譜法和液相色譜法[6-8]，兩者復配為混劑的液相色譜同條件分析方法未見報道。

本文建立同一液相色譜條件下同時檢測35%氟吡菌酰胺·戊唑醇懸浮劑中的氟吡菌酰胺、戊唑醇的分析方法，具有較高的準確度和精密度，是一種較為實用的分析方法。

1 材料與方法

1.1 試劑

氟吡菌酰胺標準品（99%），Dr.Ehrenstorfer公司；戊唑醇標準品（99.3%），沈陽化工研究院；超純水；甲醇（色譜純）；35%氟吡菌酰胺·戊唑醇懸浮劑，拜耳股份公司。

1.2 儀器

高效液相色譜儀：Agilent 1260（具有可變波長紫外檢測器）；色譜柱：Eclipse XDB-C18不銹鋼柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；超聲波清洗機。

1.3 液相色譜條件

流動相：甲醇與水的體積比為70∶30；流速：1.0 mL/min；柱溫：30℃；檢測波長：220 nm；進樣體積：10 μL；保留時間：氟吡菌酰胺約為4.81 min，戊唑醇約為7.82 min。氟吡菌酰胺和戊唑醇標樣及樣品的高效液相色譜圖見圖1、圖2。

圖1 氟吡菌酰胺和戊唑醇標樣高效液相色譜圖

圖2 35%氟吡菌酰胺·戊唑醇懸浮劑高效液相色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1 標準溶液的配制

稱取氟吡菌酰胺和戊唑醇標樣各0.01 g（精確至0.000 2 g），置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，超聲溶解后搖勻備用。

1.4.2 樣品溶液的配制

稱取含氟吡菌酰胺和戊唑醇各0.057 g（精確至0.000 2 g）的試樣，置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，超聲溶解后過膜備用。

1.4.3 測定

按上述色譜條件，連續進不少于5針標樣溶液，當相鄰2針的相對響應值變化小于1.5%時，按照標樣溶液、樣品溶液、樣品溶液、標樣溶液的順序進樣測定。

1.4.4 計算

將測得的2針試樣溶液及其前后2針標樣溶液中氟吡菌酰胺（戊唑醇）峰面積分別進行平均。試樣中氟吡菌酰胺（戊唑醇）的質量分數w（%）按式（1）計算。

式中：A1為標樣溶液中氟吡菌酰胺（戊唑醇）峰面積的平均值，mAU·s；A2為試樣溶液中氟吡菌酰胺（戊唑醇）峰面積的平均值，mAU·s；m1為氟吡菌酰胺（戊唑醇）標樣的質量，g；m2為試樣的質量，g；P為標樣中氟吡菌酰胺（戊唑醇）的質量分數，%。

2 結果與分析

2.1 波長的選擇優化

筆者利用紫外可見分光光度計對氟吡菌酰胺標準溶液進行最大波長檢測，發現在220 nm處有最大吸收，經液相色譜上機試驗，確定220 nm為氟吡菌酰胺的檢測波長。經參考現行國家標準以及其他研究文獻，確定戊唑醇的檢測波長為220 nm，此波長下，兩個目標物都有很好的響應，無雜質干擾。

2.2 色譜條件的選擇

選擇C18短柱，以甲醇-水作為流動相，選擇甲醇與水的體積比為50∶50、60∶40、70∶30、80∶20等4種情形下對兩個目標分別進行試驗比較，發現當甲醇與水的比例為70∶30時，氟吡菌酰胺和戊唑醇分離效果理想，出峰時間適中，峰形對稱，能夠滿足檢測要求。

2.3 分析方法的線性相關性測定

準確吸取“1.4.1”中標樣溶液1.0 mL置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容成標樣溶液A，再從標樣溶液A中吸取0.1、0.5、1.0、5.0 mL分別置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，搖勻，將兩次配制的標樣溶液用于液相色譜分析。在上述色譜條件下，測得其相應的峰面積，以氟吡菌酰胺（戊唑醇）的濃度為橫坐標，氟吡菌酰胺（戊唑醇）的峰面積為縱坐標，繪制線性關系曲線，線性方程分別為y=17.461x-8.787 8，y=21.678x-12.674，相關系數均為0.999 3。

2.4 分析方法精密度測定

稱取同一批樣品，在上述穩定的色譜操作條件下，進行6次平行測定，精密度的測定結果見表1，其中，氟吡菌酰胺和戊唑醇的標準偏差分別為0.15、0.16，變異系數分別為0.84%、0.92%。結果表明分析方法精密度良好。

表1 精密度測定結果

2.5 分析方法的準確度測定

采用標樣添加法，在已知含量的試樣中，加入一定量的氟吡菌酰胺和戊唑醇標準品，配成5個已知樣，在相同的液相色譜操作條件下，測得氟吡菌酰胺和戊唑醇的平均回收率分別為99.08%、98.88%（表2）。

表2 準確度測定結果

3 結論

本方法能夠同時測定35%氟吡菌酰胺·戊唑醇懸浮劑中的氟吡菌酰胺和戊唑醇的含量。試驗結果表明，方法具有較好的準確度和精密度，線性關系良好，操作簡單方便，是一種較為實用的分析方法，可滿足日常產品檢驗的要求。