38%2甲4氯·滅草松可溶液劑的高效液相色譜分析

錢忠海

（江蘇省農(nóng)藥總站，南京 210036）

38%2甲4氯·滅草松可溶液劑為廣譜、高效的低毒類除草劑，能迅速殺死雜草地下根莖，有效防除常見闊葉雜草和螢藺、荊三棱、三棱草等惡性雜草，其選擇性強、持效期長、防除效果顯著[1-5]。但有關2甲4氯和滅草松混配制劑采用HPLC同時檢測的方法，無相關文獻報道。筆者建立采用Agilent ZORBAX SB-Phenyl不銹鋼柱和紫外檢測器，以甲醇-水-磷酸溶液為流動相的高效液相色譜分析方法，對有效成分2甲4氯和滅草松同時進行定量分析。旨在為簡便快捷地測定38%2甲4氯·滅草松可溶液劑的有效成分含量提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

具全自動進樣器及紫外可變波長檢測器的高效液相色譜儀U3000；甲醇（色譜純）；Millipore超純水制備系統(tǒng)；2甲4氯對照物（98.3%）、滅草松對照物（99.0%），國家農(nóng)藥質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心（沈陽）；38%2甲4氯·滅草松可溶液劑，江蘇農(nóng)墾生物化學有限公司。

1.2 色譜條件

色譜柱：Agilent ZORBAX SB-Phenyl不銹鋼柱（150 mm×4.6 mm，3.5 μm）；檢測波長：230 nm；流動相：甲醇＋水（體積比44∶56），每1 000 mL水中加入1 mL磷酸；流速：1.0 mL/min；進樣量：5 μL；柱溫：25℃；保留時間：滅草松約為11.0 min，2甲4氯約為15.5 min。高效液相色譜圖見圖1、圖2。

圖1 2甲4氯和滅草松對照物高效液相色譜圖

圖2 38%2甲4氯·滅草松可溶液劑高效液相色譜圖

1.3 分析步驟

1.3.1 對照物溶液的配制

稱取2甲4氯對照物約0.04 g（精確至0.000 2 g）于50 mL容量瓶，用甲醇溶液稀釋，超聲使其溶解，待溫度降至室溫，進行定容，搖勻后備用。稱取滅草松對照物約0.05 g（精確至0.000 2 g）于100 mL容量瓶，移取10 mL上述2甲4氯對照物溶液于此容量瓶中，用甲醇溶液稀釋，超聲使其溶解，待溫度降至室溫，進行定容，搖勻后經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾后備用。

1.3.2 被試物溶液的配制

稱取被試物約0.15 g（精確至0.000 2 g）于100 mL容量瓶，用甲醇溶液稀釋，超聲使其溶解，待溫度降至室溫，進行定容，搖勻后經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾后備用。

1.3.3 測定

在優(yōu)化的色譜條件下，待儀器穩(wěn)定后，使參照物溶液連續(xù)進樣，直至相鄰兩次有效成分峰面積的響應值相對變化小于1.5%時，依照參照物溶液、被試物溶液、被試物溶液、參照物溶液的順序進行測定。

1.3.4 計算

將檢測所得的兩次被試物溶液和被試物前后兩次對照物溶液中檢測成分的峰面積分別進行平均。被試物中各檢測成分的質(zhì)量分數(shù)w（%）按式（1）計算。

式中：A1為參照物溶液中2甲4氯（滅草松）峰面積的平均值，mAU；A2為被試物溶液中2甲4氯（滅草松）峰面積的平均值，mAU；m1為參照物溶液中2甲4氯（滅草松）的質(zhì)量，g；m2為被試物2甲4氯（滅草松）的質(zhì)量，g；P為參照物中2甲4氯（滅草松）的質(zhì)量分數(shù)，%。

2 結(jié)果與分析

2.1 檢測波長的選擇

利用數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)，采集被試物2甲4氯和滅草松在波長為190～400 nm范圍內(nèi)的紫外吸收光譜曲線。經(jīng)與參照物紫外吸收光譜圖比對，同時考慮溶劑吸收干擾以及各組分的靈敏度，最后優(yōu)化選擇的檢測波長為230 nm。

2.2 線性相關性

按照確定的色譜條件，配制不同濃度的參照物溶液測定線性相關性。以2甲4氯（滅草松）的質(zhì)量濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標繪制線性關系圖（圖3、圖4）。2甲4氯和滅草松的線性回歸方程分別為y=0.211 7x-1.325 2，y=0.216 3x＋6.360 8；相關系數(shù)分別為0.999 2、0.999 7。2甲4氯和滅草松定量線性關系在濃度為60～500 mg/L范圍內(nèi)良好。

圖3 2甲4氯線性關系圖

圖4 滅草松線性關系圖

2.3 方法的精密度

采用3批次的被試物38%2甲4氯·滅草松可溶液劑，重復測定5次，考察定量分析方法的精密度（表1）。結(jié)果表明，2甲4氯和滅草松的變異系數(shù)分別為0.64%、0.58%，符合樣品定量分析的要求。

表1 精密度測定結(jié)果

2.4 方法的準確度

在產(chǎn)品制劑空白中添加2甲4氯參照物、滅草松參照物，合成5批次組成與被試物38%2甲4氯·滅草松可溶液劑相似的模擬被試物，作為準確度測定的被試物溶液，進行添加回收率試驗，結(jié)果見表2。結(jié)果表明，2甲4氯和滅草松的平均添加回收率為99.74%、99.68%，方法的準確度較高，符合定量分析的要求。

表2 準確度測定結(jié)果

3 結(jié)論

本研究建立的HPLC檢測方法可同時快速檢測38%2甲4氯·滅草松可溶液劑中有效成分的質(zhì)量分數(shù)，具有適中的保留時間以及較高的精密度與準確度，可有效用于質(zhì)量檢驗機構(gòu)和生產(chǎn)企業(yè)對2甲4氯和滅草松混配制劑的質(zhì)量監(jiān)控[6]。