老年膿毒血癥致急性腎損傷患者血清miR210水平及其在病情和預后評估中的價值

張志坤 蓋鑫 劉健 劉芹 樊曉光 胡國鑫

(勝利油田中心醫院重癥醫學科，山東 東營 257034)

膿毒血癥常導致急性腎損傷(AKI)，AKI的發生增加患者死亡率。早期準確地對膿毒血癥患者腎損傷及其嚴重程度進行評估，可有效改善膿毒血癥AKI患者的預后，降低患者死亡率〔1〕。近年研究發現微小RNA(miRNA)在AKI中發揮重要作用〔2〕，miR210為一種新發現的miRNA，在腎癌等疾病的發生發展中發揮重要作用〔3,4〕，但其在膿毒血癥導致的AKI中的作用尚不十分清楚。本文對老年膿毒血癥致AKI患者血清miR210水平進行研究，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇2017年6月至2018年5月勝利油田中心醫院重癥醫學科104例60歲以上膿毒血癥患者，根據是否出現AKI分為AKI組(59例)和非AKI組(45例)，并選擇同期60歲以上老年健康體檢者50例作為對照組(C組)。對照組年齡(75.29±4.26)歲，男27例，女23例；AKI組年齡(75.63±4.72)歲，男31例，女28例，根據KDIGO分期將AKI患者分為輕度AKI組(KDIGO分期1期)和重度AKI組(KDIGO分期2期和3期)，死亡AKI者10例，存活AKI者49例；非AKI組年齡(75.42±5.03)歲，男23例，女22例。三組年齡、性別差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經勝利油田中心醫院倫理委員會審批。排除標準：年齡<60歲，患其他慢性腎臟疾病者，膿毒血癥發病前腎功能異常者，惡性腫瘤者，血液系統疾病者，24 h內死亡者，嚴重心肝肺疾病者。

1.2研究方法 測定血清miR210水平：采集兩組入ICU時靜脈血，離心取上清液，提取上清液提取總RNA，采用qRT-PCR法測定血清miR210水平，以U6為內參照，PCR反應條件為95℃ 30 s，95℃ 15 s、56℃ 20 s、72℃ 15 s，共42個循環。采用2-ΔΔCt表示血清miR210水平。測定血胱抑素C、血肌酐水平：采集患者入ICU時靜脈血，送該院檢驗科檢查血胱抑素C、血肌酐水平。測定尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)水平：采集患者入ICU時尿液5 ml，3 000 r/min離心15 min，留取上清尿液，采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)測定尿NAG水平。

1.3統計學方法 采用SPSS20.0軟件進行方差分析或t、χ2檢驗，相關性采用Pearson分析。

2 結 果

2.1三組血清miR210、胱抑素C、血肌酐、尿NAG水平比較 非AKI組和AKI組血清miR210、胱抑素C、血肌酐、尿NAG水平顯著高于C組(P<0.05)；AKI組血清miR210、胱抑素C、血肌酐、尿NAG水平顯著高于非AKI組(P<0.05)。見表1。

表1 三組血清miR210、胱抑素C、血肌酐、尿NAG水平比較

與C組比較：1)P<0.05；與非AKI組比較：2)P<0.05

2.2不同嚴重程度AKI組血清miR210、胱抑素C、血肌酐、尿NAG水平比較 與輕度AKI組比較，重度AKI組血清miR210、胱抑素C、血肌酐、尿NAG水平顯著升高(P<0.05)。見表2。

表2 不同嚴重程度AKI組血清miR210、胱抑素C、血肌酐、尿NAG水平比較

2.3死亡組和存活組AKI患者血清miR210、胱抑素C、血肌酐、尿NAG水平比較 與AKI存活組比較，AKI死亡組血清miR210、胱抑素C、血肌酐、尿NAG水平顯著升高(P<0.05)。見表3。

表3 死亡組和存活組AKI患者血清miR210、胱抑素C、血肌酐、尿NAG水平比較

2.4AKI組血清miR210與胱抑素C、血肌酐、尿NAG水平的相關性 AKI組血清miR210與胱抑素C(r=0.497,P=0.000)、血肌酐(r=0.523,P=0.000、尿NAG(r=0.518,P=0.000)水平呈正相關。

3 討 論

AKI在臨床上十分常見，腎功能下降是其主要的臨床特征，AKI的死亡率非常高〔5〕。膿毒血癥是引起臨床AKI的主要原因，膿毒血癥患者入院時情況緊急，常合并多種并發癥，危險評分比較高，近年來膿毒血癥導致的AKI在治療方面雖然取得了巨大進步，但其發病率和死亡率仍比較高〔6，7〕。故早期診斷、早期干預、早期治療AKI具有重要意義，目前臨床上缺乏早期診斷AKI的標志物，臨床尚比較常用的診斷AKI的方法檢測血肌酐，但血肌酐受多種因素影響，難以準確反映急性腎功能的改變，具有一定局限性。

miRNA為非蛋白編碼小RNA，長度18～25 nt。miRNA在人體代謝、發育、凋亡、疾病方面發揮重要作用，可在翻譯水平調節基因的表達，因此近年來受到大家廣泛關注〔8，9〕。miRNA可介導轉錄后基因調節，其機制可能為mRNA降解和翻譯抑制，miRNA選擇mRNA降解還是翻譯抑制取決于miRNA和靶mRNA互補配對的程度，完全互補配對或者接近完全互補配對可引起RNA剪切，導致RNA降解；兩者不完全互補配對時可引起翻譯抑制〔10〕。近年研究發現miRNA在AKI的發生發展中發揮重要作用，如曹李娜等〔11〕研究發現miR-21可預測心臟介入術后AKI的發生；鄧旭等〔12〕研究發現miR-21在AKI小鼠腎臟中異常表達。

miR-210為新發現的一種miRNA，在多種疾病的發生發展中發揮重要作用〔13，14〕。如曹慧琴等〔15〕研究發現淋巴瘤患者血漿中miR-210的表達水平升高，可淋巴瘤的發生和進展關系密切，對臨床淋巴瘤的診治具有重要意義；吳皎等〔16〕研究發現急性腦梗死患者血清miR-210水平降低，其水平與急性腦梗死的嚴重程度關系密切；賀永進等〔17〕研究發現氧化應激損傷可影響脊髓神經元細胞中miR-210表達，miR-210抑制劑具有神經保護效應。miR-210在老年膿毒血癥致AKI中的作用尚不清楚，本研究發現老年膿毒血癥患者血清miR-210水平升高，血清miR-210水平和膿毒血癥致AKI患者的病情嚴重程度有關，與病情的預后關系也比較密切。胱抑素C、血肌酐、尿NAG都是判斷腎損傷程度的指標，血清miR210與這些指標呈正相關，表明血清miR210可在一定程度上反映腎損傷程度。由此可見血清miR210在老年膿毒血癥致AKI的病情嚴重程度、預后及腎損傷程度中具有一定價值。