HLA-G對子癇前期發生發展的影響

劉翠蓮 崔 澂

(河北省人民醫院，石家莊 050051)

子癇前期 (preeclampsia,PE) 是起源于胎盤的產科常見而特有的并發癥之一,易引起胎兒宮內生長發育受限及孕產婦和圍生兒死亡，但其病因及發病機制尚未完全闡明。因此,探討PE相關病因及發病機制對改善母嬰預后具有重要意義。有證據顯示，母胎界面局部免疫系統在PE發病中發揮重要作用[1，2]。人類白細胞抗原G(human leucocyte antigen-G，HLA-G)在母胎免疫調節中起重要作用[3]，對PE發生發展有不可忽視的影響。

1 HLA-G的分子結構與分布

HLA-G為非經典人類白細胞抗原Ⅰ類基因家族成員，位于染色體6p21.31。HLA-G基因經轉錄剪切可產生7種蛋白異構體，其中HLA-G1、HLA-G2、HLA-G3、HLA-G4為膜結合型蛋白(mHLA-G)，HLA-G5、HLA-G6、HLA-G7為分泌型蛋白(sHLA-G)，又稱為可溶型蛋白。HLA-G抗原在生理狀態下僅表達于絨毛外滋養層細胞、胸腺髓質、角膜等免疫豁免組織。其中HLA-G5表達可遍布胎盤及母體血液，HLA-G6可表達在浸潤于蛻膜的細胞滋養層、絨毛膜滋養層。

2 HLA-G基因特性及其與PE的相關性

與經典HLA-Ⅰ類分子基因(HLA-A、B、C)相比，非經典HLA-G基因具有兩個特性：①啟動子序列結構的獨特性。經典的HIA-Ⅰ類基因的5′端調控元件，包括增強子A、增強子B、干擾素反應元件和α位點，目前在HLA-G啟動子中均未發現。②等位基因的限制多態性。目前研究顯示HLA-G的限制多態性主要發生在5′上游調節區/啟動子區和3′非翻譯區。該2個區域對HLA-G的表達調控作用極其重要，出現異常可能導致PE的發生[4]。

3′端非翻譯區多態性與HLA-G mRNA的穩定性及HLA-G蛋白表達相關，國內外已有眾多研究報道HLA-G 3′非翻譯區14 bp插入/缺失多態性與PE的相關性，有研究認為其外顯子8中14 bp插入與PE發病相關[5]，但近期的多數研究并未發現14 bp插入/缺失與PE有關[6-9]。因PE是妊娠特有疾病，國內的一項研究通過對母、子HLA-G 14 bp插入/缺失基因型分析發現，母子均為14 bp缺失純合子(-14 bp/-14 bp)，或者母親為14 bp插入/缺失(+14 bp/-14 bp)，其子為14 bp插入純合子(+14 bp/+14 bp)時PE的發生率會增高[10]；但國外的一項研究認為母胎間HLA-G 14 bp基因型配伍與PE發生無相關性[8]；又因胎兒攜帶一半的父系基因，研究者發現父兒均為缺失純合子可以降低母親發生早發型重度PE的風險[11]。雖然研究結果存在爭議，但這為PE病因研究提供了新的方向。

國外研究發現HLA-G 3′端非翻譯區單核苷酸多態性復合體在PE患者胎盤中普遍存在，提示兩者間可能具有一定的相關性[12]，但國內一項研究報道，母體外周血中HLA-G 3′端非翻譯區外顯子2與3中存在的5個單核苷酸多態性位點分布與重度PE無相關性[13]。目前對于5′端上游調節區/啟動子區基因與PE的相關性研究較少，最近研究顯示HLA-G 5′端上游調節區+274位點和+289位點多態性可能與PE的易感性有關[14]；另有研究發現PE胎盤活檢組織中HLA-G 5′端啟動子區DNA甲基化轉移酶1(調節基因啟動子區甲基化最主要的甲基化酶)表達水平較正常妊娠高，而啟動子區甲基化將導致轉錄過程受阻，使HLA-G蛋白表達水平降低，從而導致PE發生；而甲基化酶抑制劑可阻斷啟動子區甲基化并使HLA-G蛋白表達水平增高[15]。這為未來臨床應用甲基化酶抑制劑靶向預防及治療PE患者提供了理論基礎。

現有研究的爭議點可能在于研究的試驗設備、樣本量、研究起止時間上的差異，并且研究對象存在一定的地域及種族差異，再者PE可以涉及多種器官系統而出現不同的臨床癥狀，所入選的孕婦病情輕重程度也存在一定差異，可能存在多種因素參與其發病過程，HLA-G基因的多態性是否為其獨立危險因素尚需進一步研究。

3 HLA-G特異性miRNA與PE的相關性

微小RNA (microRNA,miRNA)是長度為17～22個核苷酸的單鏈非編碼RNA，HLA-G特異性的miRNAs可調控胎兒滋養細胞HLA-G表達。研究發現在子癇前期孕婦血清中有特異性的miRNA(miR-152)表達增強，而miR-152在正常妊娠孕婦胎盤組織中低表達[16，17]，推測miR-152可能通過抑制HLA-G基因轉錄參與PE的發生發展。此外，應用miRNA芯片技術發現在缺氧狀態下miR-365表達顯著升高,并可通過與HLA-G 3′端非翻譯區特異位點結合抑制HLA-G表達[18]，揭示了缺氧導致PE病情向重度發展的機制。這均提示HLA-G特異性的miRNAs未來可作為子癇前期發病的預測因子。

4 HLA-G分子影響PE發病的可能機制

目前認為子宮螺旋動脈滋養細胞重鑄障，導致胎盤缺血、缺氧，釋放多種胎盤因子進入母體血液循環，進而導致系統性炎癥反應激活及血管內皮損傷為PE主要發病機制，但具體機制尚不明確。現有研究已證實HLA-G分子在促進滋養細胞侵襲、胎盤形成及子宮螺旋動脈重鑄方面起重要作用[19]。眾多研究表明PE孕婦血液sHLA-G水平及胎盤組織HLA-G表達較正常孕婦均顯著降低[15]，且孕早期母體外周血中sHLA-G低水平與孕中晚期重度PE發生密切相關[20]，而外周血sHLA-G及胎盤組織HLA-G主要來源于胎兒滋養細胞，因此可推測，胎兒滋養細胞HLA-G分子的低表達是介導PE發生發展的關鍵環節。

正常妊娠母體對胚胎是以Th2細胞介導的體液免疫為主，而HLA-G具有免疫趨化作用，可與蛻膜及外周單核細胞表面特異受體結合調節TNF-α、INF-γ、IL-4等細胞因子的釋放，與抗原提成細胞細胞表面受體結合刺激TGF-β、IL-10等免疫抑制性細胞因子分泌，誘導Th1/Th2平衡向Th2偏移，保護胚胎不被母體排斥，保證妊娠成功；而PE孕婦體內HLA-G水平低表達對胚胎則是以Th1細胞介導的細胞免疫為主，導致滋養細胞免疫損傷加重，浸潤能力下降，引發PE[21，22]。

正常妊娠中胎兒滋養細胞通過表達HLA-G抗原與蛻膜組織細胞表面特異性受體結合可觸發抑制或激活信號，限制母體蛻膜組織中的NK細胞、CD4+和CD8+T細胞以及B細胞潛在的有害的抗父系免疫反應，從而保障滋養細胞能夠充分浸潤到蛻膜組織中[23]；且滋養細胞分泌的sHLA-G5與自身KIR2DL4及ILT2受體結合,可刺激滋養細胞進一步侵入蛻膜，增強基質金屬蛋白酶的表達，促進子宮內膜細胞外間質重鑄，為胚胎著床及子宮螺旋動脈重鑄提供條件，若sHLA-G5表達減少，可導致滋養細胞浸潤能力受損，造成胎盤淺著床和子宮螺旋動脈重鑄不足，血管阻力增大及胎盤灌注減少，從而引發PE的一系列癥狀[24]。

此外，HLA-G可通過胞啃機制(即細胞間通過接觸快速獲取胞膜片段或相關分子的現象)產生HLA-Gpos免疫細胞間接參與妊娠期的免疫調節。有研究表明，NK細胞、單核細胞、CD4+及CD8+T淋巴細胞均能通過胞啃機制從HLA-G陽性抗原提呈細胞中獲得HLA-G蛋白，從而誘導母體對胎兒的免疫耐受，如果這一過程受阻，可能導致此類細胞攻擊胎兒滋養細胞，阻礙胚胎著床，導致PE發生。有試驗通過檢測未妊娠女性、PE女性及健康妊娠女性外周血及蛻膜中的CD4+HLA-G+T細胞發現，與未妊娠對照組相比，妊娠組外周血及蛻膜中CD4+HLA-G+T細胞數量增加；與健康妊娠組相比，PE組CD4+HLA-G+T細胞的數量顯著下降[25]。另有研究顯示，PE的女性相對于正常妊娠女性，蛻膜中CD14+DC-SIGN+APCHLA-G+表達的比例及強度都有明顯下降[26]，提示PE孕婦蛻膜類細胞胞啃機制受阻，使其不能充分獲得HLA-G，從而導致PE發生。

5 展望

PE是一種多因素、多機制及多通路致病的疾病，其免疫因素已成為近年研究的熱點，其中以HLA-G與PE的相關性研究最多，但研究結果尚不一致，因此開展大樣本的多種族、多地域HLA-G 基因型調查及其轉錄產物HLA-G特異性miRNA、HLA-G蛋白在妊娠免疫調節等方面的研究，進一步闡明 HLA-G與PE發病之間的關系，并探索其具體發病機制，從而采取有效干預措施，將對改善母嬰預后具有重要的臨床意義。