醋酸阿比特龍二聚體雜質合成研究

袁小明，江德福劉偉鋒黃星星歐陽婷，付 敏

（1.江西青峰藥業有限公司，江西 贛州 341000；2.江西科維協同創新藥物有限公司，江西 贛州 341000）

醋酸阿比特龍是世界著名癌癥研究治療中心英國皇家馬斯登醫院發明的一種前列腺癌治療藥物，屬于國家重點支持的高新技術領域中的新型抗腫瘤藥物。醋酸阿比特龍是一種口服藥物，通過抑制睪酮合成中關鍵酶甾（類）17α-羥化酶/C17-20 裂解酶（P450c17）來阻止睪酮生成。醋酸阿比特龍可抑制體內任何部位雄激素的產生，不僅可以降低腫瘤標志物前列腺特異性抗原（PSA）水平，而且有助于縮小腫瘤，對于已采用藥物治療或經手術切除而腫瘤繼續增長的前列腺癌患者同樣適用，給腫瘤患者帶來希望[1-5]。2011年4 月28 日經美國FDA 批準上市，是繼卡巴他賽后去勢抵抗性前列腺癌治療的又一突破，上市不久，便憑借良好的藥效和安全性，得到廣泛的認可，同年7 月，在歐盟上市，2015 年5 月進入中國市場。

在阿比特龍合成步驟Suzuki 偶聯反應條件下，產生少量二聚體雜質1；由于二聚體雜質溶解性較差，易殘留至下一步進而生成二聚體雜質2（圖1）；產生的雜質現行藥典中尚未收錄。

圖1 雜質1 及雜質2 結構式Figure 1 The Structure of impurity1 and impurity 2

本文主要介紹二聚體雜質的合成方法，以17-碘-雄甾-5，16-二烯-3-β-醇及二乙基-3-（吡啶基）硼烷為起始原料，經Suzuki 偶聯、Heck 偶聯及乙酰化反應定向合成了二聚體雜質，分別為3β-16-（3β-醇-雄甾-5，16-二烯-17-基）-17-（3-吡啶基）雄甾-5，16-二烯-醇（雜質1）和3β-16-（3β-乙酸酯-雄甾-5，16-二烯-17-基）-17-（3-吡啶基）雄甾-5，16-二烯-乙酸酯（雜質2），產物經1H NMR、13C NMR、MS 進行結構確證。按照雜質對照品的要求制備，分離得到二聚體雜質樣品，用于醋酸阿比特龍產品的質量研究；具體合成路線見圖2。

圖2 醋酸阿比特龍二聚體雜質的合成路線Figure 2 Synthetic route of dimer impurities of Abiraterone acetate

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

AV400 MHz 核磁共振儀（DMSO 為溶劑，TMS 為內標，瑞士Bruker 公司）；Surveyor MSQ 型高效液相色譜-質譜聯用儀（賽默飛世爾科技公司）；ZF-113 型三用紫外分析儀（上海和勤分析儀器有限公司）；LC-20AT 高效液相色譜儀（島津科技有限公司）。

17-碘-雄甾-5，16-二烯-3-β-醇（成都伊諾達博醫藥科技有限公司），二乙基-3-（吡啶基）硼烷（山東威智醫藥工業有限公司）；其他試劑均為市售分析純或化學純。

1.2 合成方法

1.2.1 （3β）-17-（3-吡啶基）-雄甾-5，16-二烯-醇（阿比特龍）的合成

向500 mL 三口瓶中依次加入200 mL N-甲基吡咯烷酮、6 mL 飲用水、70 g 17-碘-雄甾-5，16-二烯-3-β-醇和260 g 二乙基-3-（吡啶基）硼烷，攪拌均勻，在攪拌下加入178 g 碳酸鉀。然后在氮氣保護條件下，加入8 g 雙三苯基膦二氯化鈀；升溫至95 ℃～110 ℃，保溫反應5 h，反應結束。向反應液中加入165 mL 水，攪拌60 min，過濾。濾餅用700 mL 乙醇重結晶，干燥得到45 g 類白色固體阿比特龍；收率為72.85%；HPLC 純度為99.37%；1H NMR（DMSO，400 MHz），δ 8.52～8.45（m，1H），8.43～8.35（m，1H），7.61（dt，J=15.0，2.9 Hz，1H），7.19（t，J=15.0 Hz，1H），6.45（t，J=12.2 Hz，1H），5.27（tt，J=12.3，2.0 Hz，1H），3.45（p，J=14.7 Hz，1H），2.19（s，1H），2.19（s，1H），2.02（s，1H），2.01～1.92（m，3H），1.89（s，1H），1.85（s，1H），1.83（s，1H），1.81～1.78（m，1H），1.77（s，1H），1.73（s，1H），1.67～1.55（m，3H），1.54（s，1H），1.41（s，1H），1.33（s，1H），1.29（s，1H），0.94（s，6H）。

13C NMR（DMSO，400 MHz）δ 149.51，146.13，140.33，139.08，136.63，135.91，130.87，123.40，121.38，71.26，52.90，50.62，46.46，43.25，37.38，37.01，36.39，35.37，33.69，31.76（d，J=2.8 Hz），21.99，20.12，16.78.MS（m/z）：[M+H]+350.4。

1.2.2 3β-16-（3β-醇-雄甾-5，16-二烯-17-基）-17-（3-吡啶基）雄甾-5，16-二烯-醇（雜質1）的合成

在氬氣保護下，向500 mL 四口瓶中加入40 g 阿比特龍、46 g 17-碘-雄甾-5，16-二烯-3-β-醇及27 g 碳酸鉀，加入300 mL DMF 溶解，氬氣保護，加入200 mg 醋酸鈀，快速升溫至130 ℃～140℃，保溫反應4 h，TLC 監控，反應完全后，將反應液加入至500 mL 水中，析出大量類白色固體物質，過濾，濾餅用二氯甲烷甲醇混合液溶解后拌硅膠，用柱層析純化[硅膠（100～200 目），洗脫劑：V（甲醇）：V（二氯甲烷）=1 ∶20]，得到白色固體20 g，即二聚體雜質1；收率為28.19%；HPLC 純度為95.46%；1H NMR（CDCl3，400 MHz ）δ 8.48（d，J=1.4 Hz，1H），8.39（dd，J=7.5，1.3 Hz，1H），7.61（dt，J=7.5，1.5 Hz，1H），7.19（t，J=7.5 Hz，1H），5.29（dt，J=15.0，6.2 Hz，3H），3.45（t，J=7.3 Hz，2H），2.74（dd，J=12.4，5.2 Hz，1H），2.63（dd，J=12.4，5.2 Hz，1H），2.30～2.10（m，5H），2.07～1.89（m，6H），1.90～1.72（m，6H），1.68～1.50（m，7H），1.45～1.34（m，4H），1.34～1.24（m，6H），0.94（s，12H）。

13C NMR（CDCl3，400 MHz）δ 151.84，146.86，146.46，146.02，142.73，140.33，136.36，134.62，128.80，122.98，121.38，71.26，53.53，50.62，48.08，47.40，45.50，43.25，37.38，36.99（d，J=5.3 Hz），36.37，35.37，34.88，33.71，33.16，31.76（d，J=2.8 Hz），21.99，20.12，19.48，17.28.MS（m/z）：[M+H]+620.5。

1.2.3 3β-16-（3β-乙酸酯-雄甾-5，16-二烯-17-基）-17-（3-吡啶基）雄甾-5，16-二烯-乙酸酯（雜質2）的合成

向100 mL 三口瓶中加入12.0 g 二聚體雜質1、30 mL 吡啶和20 mL 乙酸酐，在攪拌下升溫至60℃～70 ℃反應12 h，TLC 監控至原料消耗完全，反應結束后將反應液滴加到200 mL 水中，降溫至5 ℃攪拌2 h，過濾，濾餅用600 mL 水洗滌3次，抽濾，濾餅加入120 mL 的無水乙醇重結晶，過濾，干燥得到白色固體物質10.5 g，收率為77.04%，HPLC 純 度 為97.45%。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ 8.48（d，J=1.4 Hz，1H），8.39（dd，J=7.5，1.3 Hz，1H），7.64～7.57（m，1H），7.19（t，J=7.5 Hz，1H），5.28（dt，J=14.0，6.2 Hz，3H），4.71（t，J=7.4 Hz，2H），2.75（dd，J=12.5，4.9 Hz，1H），2.63（dd，J=12.3，5.0 Hz，1H），2.33～2.24（m，2H），2.23～2.10（m，3H），2.04（d，J=5.2 Hz，1H），2.02（s，6H），2.01～1.97（m，1H），1.97～1.85（m，9H），1.77（s，1H），1.66（d，J=21.4 Hz，2H），1.56（dd，J=12.3，5.1 Hz，5H），1.39（dd，J=6.3，1.2 Hz，4H），1.29（t，J=7.0 Hz，4H），0.94（s，12H）。

13C NMR（400 MHz，CDCl3）δ 170.55，151.84，146.86，146.46，146.02，142.73，139.72，136.36，134.62，128.80，122.98，122.02，74.08，53.53，50.62，48.08，47.40，45.50，39.44，37.38，36.97（d，J=1.6 Hz），36.37，35.37，34.88，33.71，33.16，31.74，28.35，21.99，21.26，20.12，19.48，17.28.MS（m/z）：[M+H]+704.5。

2 結果與討論

本文主要研究醋酸阿比特龍二聚體雜質合成工藝，以17-碘-雄甾-5，16-二烯-3-β-醇及二乙基-3-（吡啶基）硼烷為起始原料，經Suzuki 偶聯、Heck 偶聯及乙酰化反應得到醋酸阿比特龍兩個二聚體雜質：3β-16-（3β-醇-雄甾-5，16-二烯-17-基）-17-（3-吡啶基）雄甾-5，16-二烯-醇（雜質1）和3β-16-（3β-乙酸酯-雄甾-5，16-二烯-17-基）-17-（3-吡啶基）雄甾-5，16-二烯-乙酸酯（雜質2）；純化后樣品純度均大于95%，可直接用于雜質對照品，用于醋酸阿比特龍產品的雜質控制。