直接細菌鑒定與藥敏試驗法在臨床血液檢驗中的敏感性、準確性分析

宋廣賾

隨著抗菌藥物在臨床上的廣泛使用，使人體細菌耐藥性不斷提升，因此，在臨床血液檢驗中，選擇準確的檢驗方式，以獲得細菌耐藥性發展趨勢相關數據，在指導臨床合理用藥及制定防治策略中具有重要意義[1-3]。常用的臨床血液檢驗方法主要經過細菌培養，進行細菌檢測及藥敏試驗，但該方法所需時間較長，不適用于急診患者的臨床治療[4]。直接細菌鑒定及藥敏試驗法屬于臨床血液檢驗新興檢測方法，但臨床對于直接細菌鑒定及藥敏試驗法的檢測準確性、敏感性類報道鮮少。本次研究，即結合血液采集樣本，合理探究直接細菌鑒定與藥敏試驗法在臨床血液檢驗中的敏感性及準確性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年6月—2019年6月因發熱或伴有感染癥狀在我院就診的182例患者進行研究，其中，男102例，女80例，年齡20～65歲，平均年齡（42.18±7.22）歲。血液樣本采集后，分為2份，分別進行檢測。按照檢測方法分組：常規組（182份血液樣本）采用常規細菌鑒定與藥敏試驗，觀察組（182份血液樣本）采用直接細菌鑒定及藥敏試驗。排除精神障礙、免疫及血液系統疾病患者。本次研究屬于自愿參與，參與者獲知情權。

1.2 方法

在無菌操作下，采集患者空腹靜脈血10 mL冷藏，血液檢驗環節在血液樣本采集后2 h內完成。

觀察組：使用生化自動血培養儀對血培養標本進行自動培養及檢測，當培養儀自動報警時，提示血液樣本檢測呈陽性，有細菌生長；用無菌注射器快速抽取10 mL陽性樣品，注入無菌試管，以1 500 r/min，離心10 min；收集上清液，以3 000 r/min，離心20 min，保留沉淀物，用無菌生理鹽水洗滌兩次后收集細菌懸液，取20 μL懸液涂片，行革蘭染色后鏡檢；如看到革蘭氏陽性菌（G+）呈鏈狀，可以水解酪蛋白陳（MH）瓊脂平板聯合血平板行藥敏試驗，并得到結果制定酶試驗方案；稀釋菌液濃度，若細胞黏液內出現一般菌類，可將其直接接種至MH瓊脂平板中，使用無菌拭子均勻涂抹，隨后貼上藥敏紙片，實施藥敏試驗。

常規組：將所選血液樣本放置在血平板、巧克力平板中進行接種；設置培育溫度為35℃、二氧化碳濃度為5%，培育時間為18～24 h；培育完成后，取出菌落圖片，進行革蘭染色鏡檢，根據鏡檢結果，選擇相應觸酶或氧化酶進行實驗；使用生物鑒定儀鑒定細菌種類并進行藥敏試驗。

1.3 觀察指標

以常規細菌鑒定與藥敏試驗為“金標準”，常規組各選取1 415份革蘭氏陰性菌桿菌標本，698份革蘭氏陽性菌球菌標本，觀察組選取1 435份革蘭氏陰性菌桿菌標本，685份革蘭氏陽性菌球菌標本，觀察直接細菌鑒定與藥敏試驗法在臨床血液檢驗中的敏感性及準確性。

1.4 統計學處理

以SPSS 20.0軟件分析。計數資料采用χ2檢驗，用例（%）表示。計量資料兩組之間采用t檢驗，兩組以上采用方差分析，用（）表示。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 直接細菌鑒定的準確性

常規組182份血培養標本中，經常規組鑒定出革蘭陰性菌桿菌134株，革蘭陽性菌球菌18株；觀察組182份血培養標本中，鑒定出革蘭陰性菌桿菌129株，革蘭陽性菌球菌15株。

常規組：革蘭陰性桿菌共134株，準確性為100%（134/134），包括克雷柏桿菌25株、埃希氏菌35株、銅綠假單胞菌22株、大腸桿菌32株、不動桿菌14株、變形桿菌6株；革蘭陽性球菌共18株，包括葡萄球菌13株、腸球菌5株。觀察組：革蘭陰性桿菌共129株，準確性為96.27%（129/134），包括克雷柏桿菌25株、埃希氏菌34株、銅綠假單胞菌20株、大腸桿菌30株、不動桿菌14株、變形桿菌6株；革蘭陽性球菌共14株，準確性為93.33%（14/15），包括葡萄球菌10株、腸球菌4株。

與常規組相比，直接細菌鑒定的準確性差異無統計學意義（P＞0.05）。

2.2 兩組檢驗方法的敏感性

常規組：革蘭氏陰性菌桿菌敏感620份、中度敏感265份、耐藥530份，敏感性為62.54%（885/1 415）；革蘭氏陽性菌球菌敏感240份、中度敏感68份、耐藥390份，敏感性為44.13%（308/698）。觀察組：革蘭氏陰性菌桿菌敏感640份、中度敏感245份、耐藥550份，敏感性61.67%（885/1 435）；革蘭氏陽性菌球菌敏感230份、中度敏感60份、耐藥395份，敏感性42.34%（290/685）。

兩組檢驗方法在臨床血液檢驗中的敏感性差異無統計學意義（P＞0.05）。

3 討論

臨床血液檢驗包括血液一般檢測、溶血性貧血的實驗室檢測、骨髓細胞學檢測、血型鑒定與交叉配血試驗等內容，可通過檢測人體的血液學持征，為臨床疾病診斷提供參考[5-7]。現階段，實驗室常見的血液檢驗方法較多。本次研究數據顯示，直接細菌鑒定與藥敏試驗法在血液樣本檢測中，對細菌的檢驗敏感性及準確性較高，表明，直接細菌鑒定和藥敏試驗法屬于較優秀的血液檢驗方法。臨床檢驗中，常規檢驗法檢測陽性血液標本的數據較準確，但細菌鑒定速度及藥敏試驗結果報告較慢，通常，一份完成的檢測報告需要耗費3～4 d時間。考慮到臨床部分疾病發病較急，需要快速確定致病菌種類的情況，常規法不利于臨床感染性疾病的治療及診斷。本次研究中，觀察組選用生化自動血培養儀對血液樣本進行檢測，在獲得陽性樣本后，可直接進行細菌鑒定與藥敏試驗。與常規組相比，直接細菌鑒定與藥敏試驗省略了分離培養步驟，操作更方便快捷，且結果準確性高。采用常規檢測法進行細菌鑒定+藥敏試驗與直接細菌鑒+藥敏試驗，均具有較高的準確性[8-9]。還可縮短臨床報告出具時間，幫助臨床盡快使用合理抗菌藥物，延緩患者的耐藥性[10-12]。

綜上所述，直接細菌鑒定與藥敏試驗法在臨床血液檢驗中，敏感性及準確性較高，是臨床檢驗中較為可靠的檢驗方法。